MODUL 7 UJI RESISTENSI BAKTERI TERHADAP ANTIBIOTIK

MODUL

7

Uji Resistensi Bakteri terhadap Antibiotik

POKOK BAHASAN : Uji Resistensi Bakteri terhadap Antibiotik TUJUAN PRAKTIKUM : Mengetahui tingkat resistensi bakteri terhadap berbagai jenis bahan antibiotik TINJAUAN PUSTAKA : Uji resisten adalah suatu pengujian untuk mengetahui kepekaan bakteri terhadap antibiotik. Telah diketahui bahwa antibiotik merupakan bahan yang cukup representatif untuk membunuh bakteri. Penggunaan antibiotik yang tidak terkendali telah menyebabkan terjadinya efek samping yang sangat mebahayakan yaitu menyebabkan bakter-bakteri tertentu menjadi tahan atau resisten terhadap antibiotik. Antibiotik pada umumya diproduksi dari kapang (yeast), misalnya: Penicillium notatum, Penicillium chisogenum, dan lain sebagainya. Antibiotik yang dihasilkan dari Penicillium sp tersebut dikenal sebagai penisilin. Untuk mengetahui bakteri-bakteri yang telah resisten terhadap antibiotik, maka dilakukan uji resistensi. Bakteri ditumbuhkan pada medium lempeng agar, kemudian bahan Antibiotik dipaparkan dengan menempatkannya di atas kertas berbentuk cakram (paper disk) dan diletakan di atas lempeng agar tersebut. Media kemudian diinkubasikan selama 24 jam pada suhu 370 C. Ketahanan bakteri terhadap antibiotik dilihat berdasarkan daerah hambat (zona halau) yang terbentuk di sekeliling paper disk antibiotik tersebut. Adapun interpretasi terhadap daerah hambat (zona halau) tersebut yaitu sebagai berikut: 1. Daerah hambat dengan diameter lebih dari 30 mm menunjukan bahwa bakteri tersebut Peka terhadap antibiotik; 2. Daerah hambant dengan diameter antara 20 – 30 mm menunjukan bahwa bakteri tersebut Agak Resisten terhadap antibiotik;

Praktikum Mikrobiologi Laut [M10A205] TA 2012

Page 30

3. Daerah hambat dengan diameter kurang dari 20 mm menunjukan bahwa bakteri tersebut Resisten terhadap antibiotik.

Paper diskDisk

Zona Hambatan

Biakan Bakteri Uji

Cawan Petri

Gambar : Pengukuran Zona Hambatan pada Uji Resistensi Bakteri

PROSEDUR PELAKSANAAN PRAKTIKUM : Alat :  Tabung Reaksi  Jarum Ose  Cawan Petri  L-Glass  Beaker Glass  Pinset Steril  Bunsen  Jangka Sorong

Bahan :  Biakan (Agar Culture)  NaCl Fisiologis  Antibiotik  Aquades Steril  Paper disk  Spiritus

Prosedur : 1. Persiapkan biakan bakteri yang sudah ditanam dalam medium Agar Miring; 2. Secara aseptis, ambil 1 (satu) Ose biakan dari medium Agar Miring, masukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi 10 mL NaCl Fisiologis; Praktikum Mikrobiologi Laut [M10A205] TA 2012

Page 31

3. Suspensikan biakan dengan Vortex; 4. Ukur Densitas/Kekeruhan suspensi dengan membandingkannya dengan Reagent Mc Farlan’s; 5. Ambil 100 µL suspensi dengan menggunakan Micropipet, tebarkan di atas medium Agar Plate yang sudah padat, ratakan dengan L-Glass; 6. Dengan menggunakan Pinset Steril, celupkan Paper Disk ke dalam larutan antibiotik, kemudian tempatkan di atas Lempeng Agar; 7. Inkubasi pada suhu 370 C selama 24 jam; 8. Amati dan Ukur Zona Hambat yang terbentuk.

Gambar : Ilustrasi Prosedur Uji Resistensi Bakteri

Praktikum Mikrobiologi Laut [M10A205] TA 2012

Page 32

PARAMATER YANG DIAMATI : No

Sumber Isolat

Diameter Zona Hambat (mm) Antibiotik A (………..)

Praktikum Mikrobiologi Laut [M10A205] TA 2012

Antibiotik B (………..)

Page 33