PRUEBA RÁPIDA DE ALCOHOL POR SALIVA Número de catálogo: 07RD-7124 Solo para uso in vitro USO ESPECÍFICO La Prueba Rápida de Alcohol se diseñó para usarse como un método rápido para detectar la presencia de alcohol en la saliva para una concentración de alcohol en la sangre (BAC, por sus siglas en inglés) superior a 0,02%. Se publicó que la concentración de alcohol en la saliva es casi igual a la de la sangre.4 El uso específico de la prueba rápida es la semicuantificación del alcohol etílico en la saliva humana. Para confirmar la concentración de muestras positivas, debe utilizarse una tecnología alterna, no enzimática como la cromatografía de gases con espacio de cabeza. EXPLICACIÓN DE LA PRUEBA La intoxicación con alcohol puede causar la pérdida del estado de alerta, coma, la muerte y defectos congénitos. La BAC en la que una persona pierde sus capacidades normales es variable. El Departamento de Transportes de los Estados Unidos (DOT, por sus siglas en inglés) ha establecido una BAC de 0,02% (0,02 g/dL) como el nivel de corte en el que se considera que una persona tiene un resultado positivo por la presencia de alcohol. Generalmente, se utiliza la determinación de alcohol etílico en la sangre y la saliva para medir la discapacidad por ley, el envenenamiento por alcohol, etc. En el mercado, se dispone de técnicas mediante cromatografía de gases y métodos enzimáticos para determinar la presencia de alcohol etílico en los fluidos humanos. La Prueba Rápida de Alcohol de MP está diseñada como la herramienta de diagnóstico para determinar con rapidez si el nivel de BAC es mayor que 0,02% al evaluar una muestra de saliva. PRINCIPIO DEL PROCEDIMIENTO La Prueba Rápida de Alcohol se basa en la alta especificidad de alcohol oxidasa (ALOx) para el alcohol etílico en presencia de la peroxidasa y un sustrato enzimático como tetrametilbencidina (TMB), tal y como se muestra a continuación:
EtOH + TMB → CH3CHO + TMB de color ALOx/Peroxidasa
El color distinto en la almohadilla reactiva pudo observarse en menos de 20 segundos después de que la punta tuviera contacto con las muestras de saliva con una concentración de alcohol etílico superior a 0,02%. Cabe destacar que otros alcoholes como el metílico, propílico y arílico desarrollarían un color similar en la almohadilla reactiva. Sin embargo, por lo general estos alcoholes no están presentes en la saliva. MATERIALES SUMINISTRADOS 1. Instrucciones de uso 2. Prueba Rápida de alcohol Cada prueba contiene estos materiales:
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Tetrametilbencidina (TMB)
0,12 mg
Alcohol oxidasa (EC)
0,5 IU
Peroxidasa (EC)
35 IU
Proteínas
0,15 mg
MATERIALES REQUERIDOS PERO NO SUMINISTRADOS 1. Timer o reloj PRECAUCIONES 1. Solo para uso in vitro 2. No usar el producto después de la fecha de vencimiento. 3. Manipular todas las muestras como potencialmente infecciosas. 4. El producto es sensible a la presencia de alcohol y humedad. Una vez abierto el empaque, el dispositivo de prueba debe utilizarse de inmediato. RECOLECCIÓN Y PREPARACIÓN DE MUESTRAS 1. No debe colocarse nada en la boca del sujeto durante al menos 10 minutos antes de colectar la saliva. Esto incluye alimentos, bebidas, productos del tabaco y otros materiales. 2. La muestra de saliva puede recolectarse en un recipiente para recolectar esputo o un recipiente limpio, o aplicarse directamente en la almohadilla reactiva de la tira de prueba. 3. Evitar contacto con la piel usando guantes y vestimenta de laboratorio adecuada. CONTROL DE CALIDAD Las Buenas Prácticas de Laboratorio recomiendan usar diariamente el material de control para validar la confiabilidad del dispositivo. Con la Prueba Rápida de Alcohol, no pueden usarse controles disponibles en el mercado que contengan azida de sodio u otros preservantes que inhiban la actividad enzimática. La Prueba Rápida de Alcohol puede verificarse cuantitativamente utilizando una solución de prueba preparada agregando 10 gotas de alcohol etílico a 8 oz de agua destilada. Esta solución debe mostrar un resultado positivo distintivo. PROCEDIMIENTO 1. Abrir el empaque de aluminio y retirar la tira de prueba. 2. Saturar la almohadilla reactiva introduciendo la almohadilla en la muestra de saliva recolectada en un recipiente para recolectar saliva o aplicando directamente la saliva en la almohadilla reactiva. Después de 60 segundos, agitar para retirar el exceso de saliva. Es posible que los resultados después de más de 2 minutos no sean exactos INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS Negativo: Prácticamente no hay cambio de color al compararse con el fondo. El resultado negativo indica que la BAC es menor que un 0,02%. Positivo: Un color particular se desarrolla en toda la almohadilla. El resultado positivo indica que la BAC es 0,02% o mayor. Inválido: La prueba debe considerarse inválida si solo el borde de la almohadilla reactiva cambió de color, lo que podría atribuirse a un muestreo insuficiente. El sujeto debe someterse nuevamente a la prueba.
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LIMITACIÓN DEL PROCEDIMIENTO La Prueba Rápida de Alcohol está diseñada para usarse únicamente con saliva humana. Un resultado positivo solo indica la presencia de alcohol y no indica o mide la intoxicación. Existe la posibilidad de que un error técnico o de procedimiento, así como otras sustancias en ciertos alimentos y medicamentos interfieran con la prueba y produzcan resultados falsos. Favor referirse a la sección “INTERFERENCIA” para la lista de sustancias que pueden interferir con los resultados de la prueba. RESULTADOS ESPERADOS La Prueba Rápida de Alcohol es un ensayo semicuantitativo. Identifica la presencia de alcohol en la saliva humana a una BAC de 0,02%. CARACTERÍSTICAS DEL DESEMPEÑO A. Exactitud Los siguientes datos se obtuvieron con base en 86 muestras clínicas de saliva al comparar la Prueba Rápida de Alcohol con la cromatografía de gases con espacio de cabeza.
Cromatografía de gases con espacio de cabeza (g/dL) 0
0,01 – 0,02
≥0,02
No. de muestras
31
14
41
Negativo
30
11
2
Positivo
1
3
39
Concordancia
Concord. negativa: 97%
Concord. negativa: 79%
Concord. positiva: 95%
Concordancia negativa en las muestras verdaderas negativas (sin alcohol): 97% Concordancia negativa en las muestras límite: 79% Concordancia positiva en las muestras positivas: 95%
B. Sensibilidad y rango de detección El límite de detección es 20 mg/dL (0,02 g/dL) El rango de detección es entre 0,02 g/dL y 0,3 g/dL C. Interferencia Las siguientes sustancias pueden interferir con la Prueba Rápida de Alcohol: Oxidantes fuertes
Ácido ascórbico
Ácido tánico
Compuestos polifenólicos
Mercaptans
Ácido úrico
Bilirrubina
Ácido oxálico
Normalmente, estos compuestos no se presentan en una cantidad suficiente en la saliva como para interferir con la prueba. Sin embargo, deben tomarse precauciones para que estos materiales no se introduzcan en la boca durante el período de prueba de 10 minutos antes de proceder con la prueba real. 5243 DCR04-107
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