PROPOSAL PENELITIAN PEMANFAATAN EKSTRAK KAKAO MENGANDUNG THEOBROMINE DAN POLYPHENOL DALAM PEMULIHAN CEKAMAN AKIBAT TRANSPORTASI SEBELUM PENYEMBELIHAN PADA SAPI BALI
Oleh : HIKMAH M. ALI P0100308032
PROGRAM PASCA SARJANA UNIVERSITAS HASANUDDIN MAKASSAR 2012 PROPOSAL PENELITIAN
PEMANFAATAN EKSTRAK KAKAO MENGANDUNG THEOBROMINE DAN POLYPHENOL DALAM PEMULIHAN CEKAMAN AKIBAT TRANSPORTASI SEBELUM PENYEMBELIHAN PADA SAPI BALI Disusun dan Diajukan oleh HIKMAH M. ALI Nomor Pokok P0100308032 Menyetujui Komisi Penasihat,
Prof. Dr. Ir. H. M.S. Effendi Abustam, M.Sc Promotor
Prof.Dr.Ir.H. Syamsuddin Hasan, M.Sc
Prof. Dr. Ir. Salengke, M.Sc
Kopromotor
Kopromotor
Ketua Program Studi
Direktur Program Pascasarjana
Ilmu Pertanian
Universitas Hasanuddin
Prof. Dr. Ir. Saleh S. Ali, M.Sc
Prof. Dr. Ir. Mursalim, MS
DAFTAR ISI DAFTAR ISI HALAMAN PENGESAHAN ........................................................................
i
DAFTAR ISI ................................................................................................
3
DAFTAR TABEL .........................................................................................
iv
DAFTAR GAMBAR.....................................................................................
v
BAB I. PENDAHULUAN ...........................................................................
1
A. Latar Belakang....................................................................................
1
B. Rumusan Masalah..............................................................................
5
C. Tujuan Penelitian...............................................................................
7
D. Manfaat Penelitian..............................................................................
7
E. Ruang Lingkup Penelitian ...................................................................
8
F. Daftar Istilah.......................................................................................
8
BAB II. TINJAUAN PUSTAKA .................................................................... 11 A. Karakteristik Sapi Bali ........................................................................ 11 B. Kondisi Penerapan Prosedur Baku Penyembelihan di RPH .............. 13
C. Struktur dan Komposisi Daging ..........................................................Error! Bookmark n 1.
Struktur......................................................................................... 14
2.
Komposisi Daging ........................................................................ 16
D. Glikolisis Postmortem......................................................................... 18 E. Kualitas Daging .................................................................................. 24 1.
Keempukan Daging...................................................................... 25
2.
Warna Daging .............................................................................. 26
3.
Daya Mengikat Air ........................................................................ 27
4.
Sifat Sensory Daging.................................................................... 28
F. Faktor-Faktor yang mempengaruhi Kualitas Daging .......................... 29 1.
Pengaruh Umur Terhadap Kualitas Daging.................................. 29
2.
Pengaruh Jenis Kelamin Terhadap Kualitas................................. 30
3.
Penggunaan Senyawa Kimia pada Masa hidup ternak ................ 30
4.
Stress Antemortem....................................................................... 32
G. Tinjauan Hipotetikal Dayaguna Kakao pada Ternak Potong .............. 34
1.
Produksi Daging Berkadar Lemak dan Kolesterol Rendah .......... 34
2.
Identifikasi Daya Guna Kakao ...................................................... 37 a. Tunjauan Umum Kakao (Theobroma cacao L) ....................... 37 b. Struktur dan Komposisi Kimiawi Kakao................................... 38 c. Senyawa Aktif dalam Buah Kakao .......................................... 41
3.
Polyphenol dan Flavonoid ....................................................... Phenylethylamine .................................................................... Anandamide ............................................................................ Theobromin ............................................................................. Serotonin ................................................................................. Ekstrak Biji Kakao dan Penurunan Kadar Lemak dan Cholesterol Daging ......................................................................
41 43 45 47 50 51
4.
Ekstrak Biji Kakao dan Akumulasi ATP Postmortem.................... 56
5.
Ekstrak Biji Kakao dan Pengawetan Daging ................................ 60
H. Kerangka Konseptual ......................................................................... 60 I. Hipotesis ............................................................................................ 64 BAB III. METODE PENELITIAN ............................................................... 65 A. Rancangan Penelitian ........................................................................ 65 B. Waktu dan Tempat ............................................................................. 65 C. Bahan dan Alat................................................................................... 66 D. Populasi dan Sampel ......................................................................... 66 E. Teknik Pengumpulan Data ................................................................. 67 1.
Penelitian Tahap I ........................................................................ 67
2.
Penelitian Tahap II ....................................................................... 67
3.
Penelitian Tahap III ...................................................................... 71
4.
Penelitian Tahap IV ...................................................................... 72
F. Definisi Operasional ........................................................................... 73 G. Teknik Analisis Data........................................................................... 79 DAFTAR PUSTAKA.................................................................................... 80
RINGKASAN Ekstrak limbah kakao mempunyai kandungan bahan aktif berupa theobromine
dan
polifenol.
Bahan
aktif
tersebut
berperan
dalam
metabolisme energi dan metabolisme purin, diketahui mempunyai efek mengembalikan kesegaran tubuh, sehingga dengan demikian berpotensi digunakan dalam upaya mengembalikan kesegaran ternak sapi setelah transportasi. Penelitian ini bertujuan menguji efektifitas pemulihan kesegaran fisiologis sapi Bali yang mengalami cekaman setelah transportasi, mengtahui pengaruh injeksi ekstrak kakao terhadap kulaitas daging berdasar jenis otot, serta pengaruhnya selama penyimpanan dingin. Penelitian menggunakan 60 ekor sapi Bali pada tahap I dan 28 ekor pada tahap II dan III. Penelitian ini akan dilaksanakan di Rumah Potomg Hewan Makassar, sebagai penerapan penyuntikan theobromine pada sapi menjelang penyembelihan, pengambilan sampel darah, penyembelihan ternak dan pengambilan sampel otot.
Analisis kimia sampel darah dan
daging akan dilaksanakan di Laboratorium Terpadu Fakultas Peternakan Universitas Hasanuddin.
Analisis sifat fisik daging dan uji organoleptik
daging dan produk daging serta pembuatan produk akan dilaksanakan di Laboratorium Teknologi Hasil Ternak Fakultas Peternakan Unhas. Penelitian ini mengunakan sapi Bali yang akan dipotong di RPH. Pada tahap pertama digunakan minimal 50 ekor sapi Bali siap potong di RPH Antang Makassar, 90% diantaranya dalam kondisi stress akibat pengangkutan. Tahap kedua menggunakan 20 (duapuluh) ekor sapi Bali dengan kondisi seragam, yakni berjenis kelamin jantan dengan variasi umur, kondisi kegemukan dan bobot yang merupakan rerata hasil survey tahap I. Untuk menjaga variasi antar individu digunakan sapi yang berasal dari wilayah atau jarak angkut dan waktu yang sama, dan dipelihara dengan system dan pakan yang relatif sama.
Penelitian ini dibagi kedalam 4 tahapan yang tidak terpisahkan, tahapan berikut merupakan lanjutan dari penelitian tahap sebelumnya. Setiap tahapan dirancang dengan tujuan khusus.
Penelitian tahap I
bertujuan untuk mengatahui kondisi fisologis sapi yang baru tiba di RPH dan perubahannya akibat penyuntikan ekstrak kakao sebelum penyembelihan. Kondisi fisiologis ternak diukur melalui profil denyut nadi permenit, jumlah nafas permenit, glukosa darah, trigliserdia darah, dan asam lemak bebas darah akibat pengaruh injeksi ekstrak kakao. Penelitian tahap I dilaksanakan menggunakan metode survey. Pendataan dilakukan pada semua ternak sapi Bali yang masuk ke RPH dengan masa istrahat <6 jam. Data-data yang diambil antara lain : bobot badan, jenis kelamin, umur, skor kondisi tubuh, riwayat pemeliharaan, riwayat pengangkutan, kondisi
lingkungan saat pengangkutan.
kondisi pengangkutan dan
Pada ternak sapi ini dilakukan
pemeriksaan jumlah denyut nadi dan suhu tubuh, dilanjutkan dengan pengambilan sampel darah dan penyuntikan ekstrak kakao sebesar 6 mg/kg BB. Pengambilan sampel darah baik sebelum penyuntikan ekstrak kakao, maupun sebelum penyembelihan ditujukan untuk pemeriksaan kadar glukosa darah, kadar asam laktat darah, kadar trigliserida dan asam lemak bebas darah.
Khusus untuk tujuan melihat kinetika kerja theobromine dilakukan
pengambilan sampel setiap 15 menit pada 5 ekor sapi. Penelitian tahap II bertujuan untuk mengatahui pengaruh pemberian ekstrak kakao dan jenis otot terhadap kualitas fisik, kimia dan organoleptik daging sapi Bali.
Rancangan penelitian yang akan digunakan adalah
rancangan acak lengkap pola faktorial 4 x 3 (Steel dan Torrie, 1991). Tiga level perlakuan injeksi ekstrak kakao sebagai faktor pertama, 3 jenis otot (musculus Longissimus Dorsi, musculus Infraspinatus, dan musculus Semitendinosus) sebagai faktor kedua, masing-masing dengan 3 ulangan. Level injeksi yang digunakan adalah Kontrol (injeksi tanpa ekstrak kakao), Injeksi 6 mg/kg BB ekstrak kakao kaya theobromine, Injeksi 6 mg/kg BB
ekstrak kakao kaya poliphenols, dan Injeksi 6 mg ekstrak kakao mengandung theobromine dan polyphenols. Sapi yang digunakan adalah representasi penelitian tahap I, yakni bobot badan, umur dan kondisi tubuh yang merupakan rata-rata
tahap I. Peubah yang diukur pada peneltian tahap II
ini adalah : 1) Sifat fisik : diameter serabut otot, kerapatan serabut otot, panjang sarkomer, keempukan, pH, susut masak, dan daya mengikat air ; 2) Sifat kimia : kadar kolesterol daging, kadar trigliserida daging, kadar gula (glycogen), kadar air, dan kadar asam laktat ; dan 3) sifat organoleptik :, warna dan kekilapan. Penelitian tahap III bertujuan untuk mengatahui pengaruh pemberian ekstrak kakao dan lama penyimpanan dingin (aging) terhadap kualitas fisik, kimia dan organoleptik daging sapi Bali.
Penelitian tahap ini merupakan
lanjutan tahap sebelumnya, dimana sampel daging yang digunakan adalah berasal perlakuan ekstrak kakao pada tahap II. Rancangan penelitian yang digunakan adalah rancangan acak lengkap pola faktorial 4 x 5 (Steel dan Torrie, 1991). Empat level perlakuan injeksi ekstrak kakao sebagai faktor pertama, 5 waktu penyimpanan (aging) sebagai faktor kedua, masing-masing dengan 3 ulangan.
Level injeksi yang digunakan adalah Kontrol (injeksi
tanpa ekstrak kakao), Injeksi 6 mg/kg BB ekstrak kakao kaya theobromine, Injeksi 6 mg/kg BB ekstrak kakao kaya poliphenols, dan Injeksi 6 mg ekstrak kakao mengandung theobromine dan polyphenols. terdiri atas 0, 4, 8, 12 dan 16 hari.
Waktu aging daging
Otot yang digunakan adalah
otot
semitendinosus. Peubah yang diukur pada peneltian tahap III ini adalah : 1) Sifat fisik : keempukan, pH, susut masak, dan daya mengikat air ; dan 2) sifat organoleptik : warna dan kekilapan. Penelitian tahap IV bertujuan untuk mengatahui pengaruh jenis otot dan lama aging terhadap kualitas fisik, kimia dan organoleptik olahan daging sapi Bali. Penelitian tahap IV dirancang menggunakan rancangan factorial 4 x 5 (Steel dan Torrie, 1991). Empat level injeksi sebagai faktor pertama, 5
waktu penyimpanan (aging) sebagai faktor kedua, masing-masing dengan 3 ulangan. Level injeksi yang digunakan adalah Kontrol (injeksi tanpa ekstrak kakao), Injeksi 6 mg/kg BB ekstrak kakao kaya theobromine, Injeksi 6 mg/kg BB ekstrak kakao kaya poliphenols, dan Injeksi 6 mg ekstrak kakao mengandung theobromine dan polyphenols. Waktu aging daging terdiri atas 0, 4, 8, 12 dan 16 hari. Parameter yang diuji pada tahap IV ini adalah peubah organoleptik antara lain : warna, keempukan, cita rasa, aroma, juiceness dan uji hedonic. Analisisi data menggunakan analisis ragam.
DAFTAR PUSTAKA Aberle, E.D., Forrest, J.C., Hedrick, H.B., Judge, M.D., and Merkel, R.A. Principle of Meat Science. Kendall Hunt Publ, Iowa.
2001.
Abustam, E. 1996. The occurrence of dark cutting beef on meat animals in South Sulawesi. BIPP IV (11) : 27-34. Ali, H.M, Yuliati, F.N., Tenrisanna, V., Said, M.I., dan Syamsuddin. 2007. Pengkajian Mutu Daging di Sulawesi Selatan. Balitbangda Propinsi Sulawesi Selatan, Makassar. Ali, H.M. dan Toleng, A. L. 2011. Identifikasi Potensi Pakan dari Kebun Kakao. Laporan Kegiatan Hibah Kompetisi Berbasis Institusi (PHKI) Tema C. Puslitbang SDA-LP2M Unhas, Makassar. Andres, A. H., M. L. Rao, S. Ostrowitzki, W. Entzian. 1993. Human brain cortex and platelet serotonin2 receptor binding properties and their regulation by endogenous serotonin. Life Sci, 52:313–321. Anonim.
2002. Horsemeat as precious http://members.aol.com/showland/pferde1.html. [1 Oktober 2002]
nutrition.
Badan Pusat Statistik. 2011. Laporan Hasil Sensus Sapi dan Kerbau tahun 2011. Badan Pusat Statistik, Jakarta. Badan Standar Nasional Indonesia. 1998 …… Baynes, J., and M. Dominiczak. 2009. Medical Biochemistry. Elsevier Limited; 3th Edition. ISBN 978-0-323-05371-6. Bennett, Alan Weinberg; Bonnie K. Bealer. 2002. The World of Caffeine: The Science and Culture of the World's Most Popular Drug. Routledge, New York. ISBN 0415927234. (note: the book incorrectly states that the name "theobroma" is derived from Latin) Berger A, Crozier G, Bisogno T, Cavaliere P, Innis S, Di Marzo V. 2001. "Anandamide and diet: Inclusion of dietary arachidonate and docosahexaenoate leads to increased brain levels of the corresponding Nacylethanolamines in piglets". Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 98 (11): 6402–6. doi:10.1073/pnas.101119098. Berry E. M., Eisenberg S., Haratz D., Friedlander Y., Norman Y., Kaufmann N. A., and Stein Y., 1991. Effects of diets rich in monounsaturated fatty acids on plasma lipoproteins—the Jerusalem nutrition study: high MUFAs vs high PUFAs. Am. J. Clin. Nutr. 53:899–907. Bonamone A., Pagnan A., Biffanti S., Opportuno A., Sorgato F., Dorella M., Maiorino M., and, Ursini, F., 1992. Effect of dietary monounsaturated and
polyunsaturated fatty acids on the susceptibility of plasma low density lipoprotein to oxidative modification. Arterioscler. Thromb. 12:529–533. Bonanome A, Grundy SM. Effect of dietary stearic acid on plasma cholesterol and lipoprotein levels. N Engl J Med 1988; 318(19):1244-1248. Bonvehy, J. S., and Coll , F. V. 1999. Protein quality assessment in coca husk. Food Research Int. 32: 201-208. Bruschetta, G., Di Pietro, L. Sanzarello, E. Giacoppo and A. M. Ferlazzo. 2010. Plasma serotonin levels in Italian Fresian dairy cows. Vet Res Commun 34 (Suppl 1): S17–S20. Bryans, J.A.; Judd, P.A.; Ellis, P.R. The effect of consuming instant black tea on postprandial plasma glucose and insulin concentrations in healthy humans. J. Am. Coll. Nutr. 2007, 26, 471–477 Burt, C. T., T. Glonek, and M. Barany. 1977. Phosphorus-31 nuclear magnetic resonance of unexpected phosphodiesters in muscle. Science (Wash. D.C.). 195:145-149 Choi, M.S.; Jung, U.J.; Yeo, J.; Kim, M.J.; Lee, M.K. Genistein and daidzein prevent diabetes onset by elevating insulin level and altering hepatic gluconeogenic and lipogenic enzyme activities in non-obese diabetic (NOD) mice. Diabetes Metab. Res. Rev. 2008, 24, 74–81 David L. Nelson, Michael M. Cox (2005). Lehninger Principles of Biochemistry. W.H. Freeman and Company. pp. 435–439. ISBN 0716743396. Davidson S, Prokonov D, Taler M, Maayan R, Harell D, Gil-Ad I, Weizman A (2009). "Effect of exposure to selective serotonin reuptake inhibitors in utero on fetal growth: potential role for the IGF-I and HPA axes". Pediatr. Res. 65 (2): 236–41. Davis, J. M., N. L Alderson, and R. S. Welsh. 2005. Serotonin and central nervous system fatigue: nutritional considerations. Am J Clin Nutr : 72 (suppl):573S– 8 De Petrocellis L, Melck D, Palmisano A, Bisogno T, Laezza C, Bifulco M, Di Marzo V (July 1998). "The endogenous cannabinoid anandamide inhibits human breast cancer cell proliferation". Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 95 (14): 8375– 80. doi:10.1073/pnas.95.14.8375 de Weerth C., R. Zijl, and J. Buitelaar. 2003. Development of cortisol circadian rhythm in infancy. Early Hum Dev 73: 39–52. Deree J, Martins JO, Melbostad H, Loomis WH, Coimbra R. (2008). "Insights into the regulation of TNF-alpha production in human mononuclear cells: the effects of non-specific phosphodiesterase inhibition". Clinics (São Paulo). 63 (3): 321–8. doi:10.1590/S1807-59322008000300006. PMC 2664230. PMID 18568240.
Dieber-Rotheneder , M., Puhl H., Waeg G., Striegl G., and Esterbauer H., 1991. Effect of oral supplementation with D-α-tocopherol on the vitamin E content of human low density lipoproteins and resistance to oxidation. J. Lipid Res. 32:1325–1332. EFSA, 2008. Theobromin as unsaturated substances in the foof chain. The EFSA Journal, 725: 1-66. El-Talatini MR, Taylor AH, Konje JC (April 2010). "The relationship between plasma levels of the endocannabinoid, anandamide, sex steroids, and gonadotrophins during the menstrual cycle". Fertil. Steril. 93 (6): 1989–96 EMC Terlouw, E. M. C., C. Bourguet and V. Deiss. 2012. Stress at slaughter in cattle: role of reactivity profile and environmental factors. Animal Welfare . 21: 43-49. Abstrak. Frantsuzova, S. B. 1975. Effect of methylxanthines (theophylline, theobromine, caffeine) and catecholamines on nicotinamide coenzyme content in the rat myocardium. Bulletin Of Experimental Biology And Medicine. 79 : 418-420, DOI: 10.1007/BF00832714. Frémont, L., M. T. Gozzélino, M. P. Franchi, and Linard, A. 1998. Dietary flavonoids reduce lipid peroxidation in rats fed polyunsaturated or monounsaturated fat diets. J. Nutr. 128: 1495-1502. Galleano, M.; Oteiza, P.I.; Fraga, C.G. Cocoa, chocolate and cardiovascular disease. J. Cardiovasc. Pharmacol. 2009, DOI: 10.1097/FJC.0b013e3181b76787. Gates S, Miners JO (March 1999). "Cytochrome P450 isoform selectivity in human hepatic theobromine metabolism". Br J Clin Pharmacol 47 (3): 299–305. doi:10.1046/j.1365-2125.1999.00890.x. PMC 2014222. PMID 10215755. Gey K. F., Puska P., Jordan P., and Moser U. K., 1991. Inverse correlation between plasma vitamin E and mortality from ischemic heart disease in cross-cultural epidemiology. Am. J. Clin. Nutr. 53:326S–334S. Grandin, T. 1980. The effect of stress on livestock and meat quality prior to and and during slaughter. International Journal for Study of Animal Problems. 1: 313337. Grandin, T. 2000. Livestock Handling and Transport. 2nd Edition. Department of Animal Sciences, Colorado State University, USA [ISBN: 0851994091]. Grassi, D.; Desideri, G.; Necozione, S.; Lippi, C.; Casale, R.; Properzi, G.; Blumberg, J.B.; Ferri, C. Blood pressure is reduced and insulin sensitivity increased in glucose-intolerant, hypertensive subjects after 15 days of consuming highpolyphenol dark chocolate. J. Nutr. 2008, 138, 1671–1676. Gregory, N.G., T. Grandin. 1998. Publishing, New York.
Animal Welfare and Meat Science.
CABI
Hafid, H. dan Rugayah, N. 2010. Pengukuran pertumbuhan sapi Bali dengan ransum berbahan baku lokal. Proc. Sem. Nas. Tek. Pet. Dan Vet. Hal : 151-160. Halaweish, F., S. Kronberg, and Rice, J. A. Rodent and Ruminant Ingestive Response to Flavonoids in Euphorbia esula. J.Chem. Eco. 29: 1073-1082. Hammerstone, J.F.; Lazarus, S.A.; Mitchell, A.E.; Rucker, R.; Schmitz, H.H. Identification of procyanidins in cocoa (Theobroma cacao) and chocolate using high-performance liquid chromatography/mass spectrometry. J. Agric. Food Chem. 1999, 47, 490–496. Hanhineva, K., R, Törrönen, I. Bondia-Pons, J Pekkinen, M. Kolehmainen, H. Mykkänen, and K. Poutanen. Impact of dietary polyphenols on carbohydrate metabolism. Int. J. Mol. Sci. 2010, 11, 1365-1402; doi:10.3390/ijms11041365. Helmenstine, A. M., 2008. What Causes Rigor Mortis? About Chemistry of Muscle Fibers. http://chemistry.about.com/lr/rigor_mortis/44887/1 (September 2008). Hertog M.G.L., Feskens E.J.M., Hollman P.C.H., Katan M. B., and Kromhout D., 1993. Dietary antioxidant flavonoids and risk of coronary heart disease: the Zutphen elderly study. Lancet 342:1007–1011. Huang, Z.L., W. M. Qu., N. Eguchi., J. F. Chen., A. M. Scwarrszchild., B. B. Fredholm., Y. Urade., and O. Hayaisi. 2005. Adeosine A2A, but not A1, receptors mediated arousal effect on caffeine. Nature Neuroscience 8: 858859. Immonen, K., M. Ruusunan, E. Puolanne. 2000. Some effects of residual glycogen concentration on the physical and sensory quality of normal pH beef. Meat Science 55 (2000) : 33 – 38. Immonen, K., M. Ruusunan, K. Hissa, E. Puolanne. 2000. Bovine muscle glycogen concentration in relation to finishing diet, slaughter and pH ultimate. Meat Science 55 (2000) : 25 - 31. Indriana, A. 2004. Pengaruh pemberian Gula dan Waktu Istrahat Sebelum Pemotongan terhadap Sifat Sensori daging Doba. Fakultas Peternakan Institut Pertanian Bogor. Jiang, S. T., 1998. Contribution of muscle proteinases to meat tenderization. Proceedings of the National Science Council, ROC. Part B: Life Science. Vol. 22, No. 3: 97-107. Keli S. O., Hertog M.G.L., Feskens E.J.M., and Kromhout D., 1996. Dietary flavonoids, antioxidant vitamins, and incidence of stroke: the Zutphen study. Arch. Intern. Med. 156:637–642. Kim, H. and P.G. Keeney. 1983. (-) –Epicatechin content in fermented and unfermented cocoa beans. J. Food. Sci., 49: 1090 – 1092.
King DA, Schuehle Pfeiffer CE, Randel RD, Welsh TH Jr, Oliphint RA, Baird BE, Curley KO Jr, Vann RC, Hale DS, Savell JW. 2006. Influence of animal temperament and stress responsiveness on the carcass quality and beef tenderness of feedlot cattle. Meat Sci. 74(3):546-56. Knapp, A. W. and Churcman, A. 1973. Cocoa shell an d its use as an accessory fodder, Chemistry and Indsutry. 9: 29 – 33. Knekt P., Järvinen R., Reunanen A., and Maatela J., 1996. Flavonoid intake and coronary mortality in Finland; a cohort study. Br. Med. J. 312:478–481. Lawrie, R.A. 1995. Ilmu Daging. Ed. ke-5. Terjemahan dari : Meat Science. Penerjemah : A. Parakkasi. Penerbit Universitas Indonesia, Jakarta. Lodish. (2007). Molecular Cell Biology. 6th edition. W. H. Freeman and Company. ISBN 1429203145. Marsh, B. B., 1977. The basis of tenderness in muscle foods. J. Food. Sci., 42: 295297. Masud, S. 1999. Pengaruh Lama Istrahat terhadap Kadar Asam laktat, Glukosa dan Magnesium Darah pada Sapi bali. Tesis. Program Pasca Sarjana, Institut Pertanian Bogor. Mattson F. H., and Grundy S. M., 1985. Comparison of effects of dietary saturated, monounsaturated and polyunsaturated fatty acids on plasma lipids and lipoproteins in man. J. Lipid Res. 26:194–202. Mechoulam R, Fride E (1995). "The unpaved road to the endogenous brain cannabinoid ligands, the anandamides". In Pertwee RG. Cannabinoid receptors. Boston: Academic Press. pp. 233–258. ISBN 0-12-551460-3. Miller, R.K. 1994. Quality characteristic. In Muscle Foods. D.N. Kinsman, A.W. Kotula, and B.C. Breidenstein (Ed). Chapman and Hall, Inc., New York. Hlm 296 - 332. Miller, R.K. 1994. Sensory methods to evaluate muscle foods. In Muscle Foods : Meat, Pultry and Seafood Rechnology. D.N. Kinsman, A.W. Kotula, and B.C. Breidenstein (Ed). Chapman and Hall, Inc., New York. Hlm 296 - 332. Moberg, G. and J. A. Mench. 2000. The Biology of Animal Stress. Basic Principles and Implications for Animal Welfare. University of California, Davis, USA [ISBN: 0851993591]. Moisey, L.L.; Kacker, S.; Bickerton, A.C.; Robinson, L.E.; Graham, T.E. Caffeinated coffee consumption impairs blood glucose homeostasis in response to high and low glycemic index meals in healthy men. Am. J. Clin. Nutr. 2008, 87, 1254–1261. 58.
Nishimura, T., A. Hattori, and K. Takahashi. 1999. Structural changes in intramuscular connective tissue during the fattening of japanese black cattle : Effect of marbling on beef tenderization. J. Anim. Sci 77 : 93 – 104. Niwa K. and Ohgoda., 1988. Synergistic of effect of caffeine and heparin on in vitro fertilization of cattle oocytes natured in culture. Therminology 30: 733-741. Osei-Hyiaman D, DePetrillo M, Pacher P, Liu J, Radaeva S, Bátkai S, Harvey-White J, Mackie K, Offertáler L, Wang L, Kunos G (May 2005). "Endocannabinoid activation at hepatic CB1 receptors stimulates fatty acid synthesis and contributes to diet-induced obesity". J. Clin. Invest. 115 (5): 1298–305. doi:10.1172/JCI23057. Pacher P, Batkai S, Kunos G (2006). "The Endocannabinoid System as an Emerging Target of Pharmacotherapy". Pharmacol Rev. 58 (3): 389–462. doi:10.1124/pr.58.3.2. PMC 2241751. PMID 16968947. Paulmann N, Grohmann M, Voigt JP, Bert B, Vowinckel J, Bader M, Skelin M, Jevsek M, Fink H, Rupnik M, Walther DJ. 2009. O'Rahilly, Steve. ed. "Intracellular serotonin modulates insulin secretion from pancreatic betacells by protein serotonylation". PLoS Biol. 7 (10): e1000229 Pearson, A.M. and R.B. Young. 1989. Muscle and Meat Biochemistry. Academic Press, Inc., London. Piomelli D (January 2004). "THC: moderation during implantation". Nat. Med. 10 (1): 19–20. doi:10.1038/nm0104-19 Piroli, G. G.; Grillo, C. A.; Reznikov, L. R.; Adams, S.; McEwen, B. S.; Charron, M. J.; Reagan, L. P. 2007. Corticosterone Impairs Insulin-Stimulated Translocation of GLUT4 in the Rat Hippocampus. Neuroendocrinology 85 (2): 71–80. PPSDAK-Disnakwan Sulsel, 2010. Kajian Strategi Pencapaian Sejuta Sapi di Sulawesi Selatan. Kerjasama Pusat Penelitian Sumber Daya Aalam dan Kelautan Lembaga Penelitian Unhas dengan Dinas Peternakan dan Kesehatan Provinsi Sulawesi Selatan, Makassar. Puslitbang SDA-LP2M Unhas, 2011. Laporan Akhir Tahun 2011 Program Hibah Kompetisi Berbasis Institusi (PHKI) Tema C Tahun Anggaran 2011. Puslitbang SDA-LP2M Unhas, Makassar. Reaven P., Parthasarathy S., Grasse B. J., Miller E., Steinberg D., and Witztum J. L., 1993. Effects of oleate-rich and linoleate-rich diets on the susceptibility of low density lipoprotein to oxidative modification in mildly hypercholesterolemic subjects. J. Clin. Invest. 91:668–676. Richard P. Schwarz, Jr., H. Ryine , and H. J. William., 2001. Caffeine contracture and iodoacetate rigor in frog skeletal muscle. J. Biophysical 78: 501- 506.
Rutter, G.A. Nutrient-secretion coupling in the pancreatic islet beta-cell: Recent advances. Mol. Aspects Med. 2001, 22, 247–284. Ryu, Y, C, and B. C. Kim. 2005. The relationship between muscle fiber characteristics, postmortem metabolic rate, and meat quality of pig longissimus dorsi muscle. Meat Science 71 : 351–357. Serafini, M., R. Bugianesi, G. Maiani, S. Valtuena, S. De Santis, and A.Crozier. 2003. Plasma antioxidant from chocolate (Abstract). Nature, 424: 1013Smith, H. J., Gaffan E. A., and Rogers P. J. 2004. Methylxanthines are the psychopharmacologically active constituents of chocolate. Psychopharmacol. 176, 412-419. Soeparno. 1992. Ilmu dan Teknologi Daging. Yogyakarta.
Gadjah Mada University Press,
Sonjaya, H. 2000. Fisiologi otot pasca pemotongan. Makalah. Kursus Singkat Penilaian dan Peningkatan Kualitas Karkas dan Daging menggunakan Metode Novel Teknologi. Fakultas peternakan Unhas. Makassar, 31 Juli – 14 Agustus 2000. Stampfer M. J., Hennekens C. H., Manson J. E.,Colditz G. A., Rosner B., and Willett W. C., 1993. Vitamin E consumption and the risk of coronary disease in women. N. Engl. J. Med. 328:1444–1449 Stull, M. A., V. Pai, A. J. Vomachka, A. M. Marshall, G. A. Jacob, and N. D. Horseman. 2007. Mammary gland homeostasis employs serotonergic regulation of epithelial tight junctions. Proc Natl Acad Sci USA, 104 (42):16708–16713. Sun, Y., and J. Cheng, 2002. Hydrolisis of lignocelluloses materials for after ethanol production: a review. Bioresour. Technol. 83: 1- 11. Taubert D, Roesen R, Schömig E. 2007. Effect of cocoa and tea intake on blood pressure: a meta-analysis. Arch. Intern. Med. 167 (7): 626–34. Taubert, D., Roesen, R., Lehmann, C., Jung, N., Schömig, E. 2007. Effects of low habitual cocoa intake on blood pressure and bioactive nitric oxide. The Journal of the American Medical Association 298: 49–60. Visioli, F.; Bernaert, H.; Corti, R.; Ferri, C.; Heptinstall, S.; Molinari, E.; Poli, A.; Serafini, M.; Smit, H.J.; Vinson, J.A.; Violi, F.; Paoletti, R. Chocolate, lifestyle, and health. Crit. Rev. Food Sci. Nutr. 2009, 49, 299–312. 2. Wander R. C., Du S. H., Ketchum S. O., and Rowe K. E., 1996. Effects of interaction of RRR-α-tocopheryl acetate and fish oil on low-densitylipoprotein oxidation in postmenopausal women with and without hormonereplacement therapy. Am. J. Clin. Nutr. 63:184–193. Wang, J.; Ueda, N. (2009). "Biology of endocannabinoid synthesis system". Prostaglandins & Other Lipid Mediators 89 (3–4): 112– 119.doi:10.1016/j.prostaglandins.2008.12.002. PMID 19126434. edit
Wang, J.; Ueda, N. (2009). "Biology of endocannabinoid synthesis system". Prostaglandins & Other Lipid Mediators 89 (3–4): 112–119. Weniger, M. A. Funk, K., and Grosse, F., 1955. Der Futterwert der Kakaoschalen und ihre wirkung auf die milchprodukten. Archiv fur Tierenahrun. 4: 337 – 348 Wilson, N.R.P., E.J. Dyett, R.B. Hughes, and C.R.V. Jones. 1981. Meat and Meat Products, Factors Affecting Quality Control. Applied Science Publishers, London and New Jersey. Wiryawan, G. K. S., E.B. Laconi, amd Mangunwidjaja, D. Performa Kambing yang diberi kulit buah kakao terfermentasi. Media Peternakan, April 2011, hlm. 35-41. Yabu, H. 1963. Effect of caffeine on oxygen consumption of Ca-deficient skeletal muscle. Sapporo Med J. 23: 92-97. Ilham, N dan Yusdja, Y. 2004. Sistem transportasi perdagangan ternak sapi dan implikasi kebijakan di Indonesia. AKP. Volume 2 No. 1, Maret 2004 : 37-53 Young, S. N. 2007. How to increase serotonin in the human brain without drugs. Rev. Psychiatr. Neuro Sci. 32: 394–99.
