Standar Mikrobiologi dan Uji untuk Bahan dan Produk Farmasi

Sterilisasi dan Jaminan Sterilitas Bahan Kompendia • Mengingat kemungkinan hasil positif dapat disebabkan oleh...

70 downloads 569 Views 488KB Size
Standar Mikrobiologi dan Uji  Mikrobiologi untuk Bahan  dan Produk Farmasi Marlia Singgih Wibowo

Bahan Farmasi • • • •

Bahan baku Air murni (Purified Water) Produk Farmasi Steril (Sterile  Pharmaceuticals) Produk Farmasi Non‐Steril (Non‐Sterile  Pharmaceuticals)

BAHAN BAKU FARMASI • Bahan baku untuk produk farmasi dapat  berupa bahan kimia atau bahan yang berasal  dari alam • Bahan yang berasal dari alam lebih cenderung  terkontaminasi mikroorganisme lebih berat  dibandingkan bahan sintetik kimia

Kategori Bahan Baku Alam (Grigo, 1976) 1. Bahan baku hasil sintesis atau ekstrak bahan alam  yang sudah dimurnikan (rata‐rata 10 cfu/g atau mL) 2. Bahan baku hasil sintesis dan dari bahan alam  (rata‐rata 102 cfu/g atau mL) 3. Ekstrak tanaman (rata‐rata 103 cfu/g atau mL) 4. Produk hewan atau tanaman yang sedikit  mengalami proses (rata‐rata 104 cfu/g atau mL) 5. Produk hewan atau tanaman yang tidak mengalami  proses (rata‐rata 105 cfu/g atau mL)

Mikroorganisme kontaminan yang sering  dijumpai dalam bahan baku alam • • • • • • •

Bacillus  Enterobacteriaceae Staphylococcus Aspergillus Penicillium  Mucor Rhizopus

E.coli

Salmonella

AIR • •

Air minum (potable water) : tidak boleh ada  Coliform bacilli per 100 ml Air untuk injeksi :  – – –



< 0,25 endotoksin unit (EU) per ml. Batas mikroba < 10 cfu per 100 ml Tidak ada Pseudomonas

Air untuk sediaan non‐steril : 

o Kisaran dari <10 sampai < 100 cfu per 100 ml o Tidak ada Pseudomonas

Produk Farmasi Steril • Untuk produk parenteral, sediaan obat mata, termasuk  larutan lensa kontak , dan produk‐produk yang diberikan  pada luka terbuka atau untuk proses irigasi rongga tubuh. • Uji sterilitas perlu dilakukan  • Syarat Steril : Sterility Assurance Level dengan  probabilitas sama atau lebih baik dari 10 ‐6, artinya dalam  satu juta sediaan steril hanya boleh maksimum 1 yang  tidak steril. • Analisis sterilitas adalah berdasarkan tidak adanya  pertumbuhan mikroba pada media Fluid Thioglycollate (FTM) dan Soyabean Casein Digest (SCD)pada 30‐35°C  (bakteri) dan 20‐25°C (fungi) selama 7 dan 14 hari.

Produk Farmasi Non‐Steril • Tidak ada aturan tunggal yang mengatur, tergantung  pada farmakope negara masing‐masing • Tidak mengandung mikroba yang dapat  menyebabkan infeksi akibat penggunaan obat  tersebut (medication‐borne infection) • TVC (Total Viable Count) dalam jumlah tertentu dan  tidak adanya patogen enterik dalam bahan baku nya.

Persyaratan Kualitas Mikrobiologi  Sediaan Farmasi versi FIP (1976) Gol. Jenis Sediaan

Persyaratan

1a 1b

Injeksi Steril – Farmakope Obat mata, sed.utk bgn tubuh Bebas mikroba yang memp.daya hidup/g atau yg bebas mikroba, sed.utk luka mL bakar, tukak berat

2

Sed. topikal pada lesi kulit, hidung, tenggorokan (resiko tinggi)

Mikroba yg memp.daya hidup maks 102 /g atau mL, dan tidak mengandung Enterobacteriaceae, P.aeruginosa, S.aureus

3

Sediaan lain

Mikroba yg memp.daya hidup maks 103 – 104 bakteri anaerob, 102 ragi dan kapang /g atau mL, Batas mikroba spesifik : tdk ada E.coli, dan tidak mengandung Salmonella, P.aeruginosa, S.aureus, Enterobacteriaceae lain maks. 102 /g atau mL

Batas kontaminan mikroba pada bahan dan sediaan  obat asal tanaman (versi UNIDO,1990) Bahan/ Sediaan

Bakteri

Ragi dan kapang

Sediaan obat asal tanaman

< 104 /g

< 102 /g

Bahan obat asal tanaman

< 107 /g

< 104 /g

Baketri coliform

Salmonella

Staphylococcus

-

-

-

-

-

-

Ket.: (-) tidak boleh ada UNIDO (United Nation Industrial Development Organization)

Uji Mikrobiologi yang Tercantum pada  Farmakope Indonesia edisi IV • Uji secara Mikrobiologi <51> Uji Batas Mikroba <61> Uji Efektivitas Pengawet <71> Uji Sterilitas

• Uji dan Penetapan secara Biologi <91> Penetapan Aktivitas Vitamin B12 <121> Penetapan Kadar Kalsium Pantotenat <131> Penetapan Potensi Antibiotik secara  Mikrobiologi

<51> Uji Batas Mikroba • Dilakukan untuk memperkirakan jumlah mikroba aerob  viabel di dalam semua jenia perbekalan farmasi, mulai  dari bahan baku hinga sediaan jadi • Untuk menyatakan bahwa perbekalan farmasi tersebut  bebas dari spesies mikroba tertentu • Pengerjaan harus dilakukan secara aseptik • Jika tidak dinyatakan lain, “inkubasi” adalah  menempatkan wadah di dalam ruang terkendali secara  termostatik pada suhu antara 30 – 35°C selama 24 – 48  jam • Istilah “tumbuh” ditujukan untuk pengertian adanya dan  kemungkinan adanya perkembangan mikroba viabel

<61> Uji Efektivitas Pengawet • Pengertian Pengawet Antimikroba : zat yang ditambahkan  pada sediaan obat untuk melindungi sediaan terhadap  kontaminasi mikroba. • Pengawet terutama digunakan pada wadah dosis ganda • Pengawet tidak boleh digunakan semata‐mata untuk  menurunkan jumlah mikroba viabel sebagai pengganti cara  produksi yang tidak baik • Kadar yang digunakan harus serendah mungkin • Pengujian dalam farmakope dimaksudkan untuk menguji  efektivitas pengawet yang ditambahkan pada sediaan dosis  ganda yang dibuat dengan dasar atau bahan pembawa cairan • Pengujian dan persyaratan hanya berlaku pada produk di  dalam wadah asli yang belum dibuka , yang didistribusikan  oleh produsen

<71> Uji Sterilitas • Digunakan untuk menetapkan apakah bahan atau produk  farmasi yang harus steril memenuhi syarat berkenaan  dengan uji sterilitas seperti yang tertera pada masing‐ masing monografi bahan atau produk • Untuk penggunaan prosedur uji sterilitas sebagai bagian  dari pengawasan mutu di industri, tertera pada <1371>  Sterilisasi dan Jaminan Sterilitas Bahan Kompendia • Mengingat kemungkinan hasil positif dapat disebabkan  oleh pengerjaan yang salah atau kontaminasi lingkungan,  diberlakukan pengujian 2 tahap seperti yang tertera pada  bagian :  Penafsiran Hasil Uji Sterilitas

• Prosedur alternatif dapat digunakan asal hasil yang  diperoleh sekurang‐kurangnya setara keandalannya → Lihat Prosedur pada Uji dan Penetapan dalam  Ketentuan Umum • Jika timbul perbedaan, dan adanya kontaminasi terdapat  pada hasil dari prosedur Farmakope, maka hasil harus  dinyatakan sebagai tidak memenuhi syarat. 

<91> Penetapan Aktivitas Vitamin B12 • Dilakukan menggunakan bakteri uji Lactobacillus  leichmanii dengan metode turbidimetri • Pembanding larutan baku Sianokobalamin BPFI berkisar antara 0,01 – 0,04 ng per mL. Blanko  menggunakan air. • Metode spektrofotometri pada panjang gelombang  530 nm. • Penetapan kadar dihitung melalui kurva baku

<121> Penetapan Kadar Kalsium Pantotenat

• Dilakukan menggunakan bakteri uji Lactobacillus  plantarum dengan metode turbidimetri • Pembanding larutan baku Kalsium pantotenat BPFI berkisar antara 0,01 – 0,04 µg per mL. Blanko  menggunakan air. • Metode spektrofotometri pada panjang gelombang  660 nm. • Penetapan kadar dihitung melalui kurva baku

<131> Penetapan Potensi Antibiotik secara Mikrobiologi • Aktivitas (potensi) suatu antibiotik dapat ditunjukkan  pada kondisi sesuai dengan efek daya hambatnya  terhadap mikroba uji • Perbedaan kadar dan potensi • Dua metode umum : cara lempeng dan cara tabung • Cara lempeng : menggunakan kertas cakram atau  selinder baja, efek difusi antibiotik pada medium  agar. • Cara tabung : turbidimetri, efek larutan antibiotik  terhadap turbiditas mikroba

TUGAS • Membuat rangkuman uji mikrobiologi yang  terdapat dalam Farmakope Indonesia IV