Download Pendahuluan. Perkembangan teknologi DNA rekombinan sanat dimungkinkan karena penemuan enzim yang dapat memotong molekul DNA pada lokas-loka...
Download Bahan Kuliah Biologi - Tingkat Persiapan Bersama IPB. Teknologi DNA Rekombinan. ENZIM RESTRIKSI. (Endonuklease Restriksi). Nama. Enzim. Sekuens.
Download Bahan Kuliah Biologi - Tingkat Persiapan Bersama IPB. Teknologi DNA Rekombinan. ENZIM RESTRIKSI. (Endonuklease Restriksi). Nama. Enzim. Sekuens. Pengenal. Organisme asal. EcoRI G↓AATTC. Escherichia coli. HindIII A↓AGCTT. Haemophilus in
Download Bahan Kuliah Biologi - Tingkat Persiapan Bersama IPB. Teknologi DNA Rekombinan. ENZIM RESTRIKSI. (Endonuklease Restriksi). Nama. Enzim. Sekuens.
Download enzim yang dapat memotong molekul DNA pada lokas-lokasi yang spesifik yang ... Enzim-enzim tersebut dikenal sebagai enzim restriksi yang ditemukan ...
Download Studi Pemuliaan Tanaman Jurusan BDP-FPUA. 2.2. Enzim Restriksi. Pengamatan terhadap bakteri yang mampu menghalangi pertumbuhan bakteriophage, disebut nuklease , memotong = restriksi, internal = endonuklease . Bioteknologi Tanaman. Aktif
Download Enzim Endonuklease Restriksi: MODAL DASAR REKAYASA GENETIKA. Genetika 4019. Page 2. Enzim Restriksi hanya memotong DNA pada urutan basa.
Download Pemotongan Molekul DNA Menggunakan Enzim Restriksi. Endonuklease dan Pengukuran Besarnya Pasangan Basa dari Fragmen yang Terpotong.
Download Pemotongan Molekul DNA Menggunakan Enzim Restriksi. Endonuklease dan Pengukuran Besarnya Pasangan Basa dari Fragmen yang Terpotong.
Download Pemotongan Molekul DNA Menggunakan Enzim Restriksi. Endonuklease dan Pengukuran Besarnya Pasangan Basa dari Fragmen yang Terpotong. RATNA DWI HIRMA W (B1J006019). HARIYATI (B1J006021). AFRINA YUNIATI ( B1J006023). K04-TD-04. Teknik mani
Download TEKNIK IMOBILISASI ENZIM. DEFINISI (Chibata, 1978). Enzim yang secara fisik ditempatkan di dalam suatu daerah/ruang .... ( Skripsi Sujatmono , T.S, 1992) ...
Download Kinetika Enzim. ▫ Pengukuran jumlah enzim berdasarkan kecepatan reaksi yang dikatalisisnya. ▫ Cara : dibandingkan dengan enzim murni yang diketahui ...
Download 21 Okt 2009 ... enzim transferase: mengkatalisis reaksi pemindahan gugus sehingga makin ... Oksidoreduktase: mengatalisis reaksi oksidasi dan reduksi.
Download Enzim adalah katalisator organik (biokatalisator) yang dihasilkan oleh sel. Enzim ... transfer oksidase, yaitu enzim oksidase, oksigenase, hidroksilase dan ...
Download Kinetika Enzim. ▫ Pengukuran jumlah enzim berdasarkan kecepatan reaksi ... Mengkur Kecepatan Reaksi enzimatik ... Pengaruh Kadar Enzim Terhadap. Reaksi ...
protein artinya sukar terurai dalam larutan yang disebut dengan Prostetik, sedang yang tidak begitu terikat kuat (mudah dipisahkan secara dialisis) disebut dengan Koenzim. Keduanya ini dapat memungkinkan enzim beketja terhadap substrat. B. Pengertian
Download genomik dari tiap sample dipotong dengan enzim restriksi endonuklease ApaI dan atau ... enzim restriksi endonuclease tersebut untuk digesti DNA genonik dan ...
Download Jurnal Ilmu dan Teknologi Kelautan Tropis, Vol. 5, No. 2, Hlm. 353-364, ... enzim, kinetika enzim, dan pengaruh pemberian ion logam. Metode terbaik untuk ...
Download industri makanan untuk meningkatkan sifat rheologi, enkapsulasi bahan yang ... limbah cair surimi dalam produksi enzim transglutaminase, melakukan ...... ini sejalan dengan semakin berkembangnya industri pangan dan non pangan di.
Download Limbah cair surimi adalah limbah organik yang mengandung banyak protein terlarut. ... limbah cair surimi dalam produksi enzim transglutaminase, melakukan .
Download limbah hasil produksi minyak goreng dan santan kelapa sangat meruah dan masih sedikit industri yang ... mannan dan mikroba yang dapat menghasilkan enzim mannanase yang berfungsi .... JURNAL TEKNOLOGI, Edisi No.4 Tahun XX,.
Download Abstrak: Penggunaan ekstrak kasar enzim bromelin untuk aplikasi di bidang ... reaksi enzimatis bromelin dari daging buah nanas matang dicapai pada pH 6,5.
Download Enzim ini memecah ikatan 1-4 yang terdapat dalam amilum dan disebut endo amilase sebab enzim ini memecah bagian dalam atau bagian tengah molekul amilum ... khususnya kerja enzim amilase yang terdapat pada saliva yang dilarutkan pada pa
Download Seminar Nasional Aplikasi Sains dan Teknologi 2008 – IST AKPRIND Yogyakarta. 127 ... susu dengan penambahan enzim papain pada suhu serta konsentrasi ...
[email protected] 1 www.buildnesiafoundation.wordpress.com “LAPORAN PERCOBAAN ENZIM KATALASE” Di Susun Oleh XII IA 2 : 1. Bunga Juliandar Suryarini
Enzim restriksi Diah Kusumawaty, M.Si MK: Praktikum Biologi Molekul Program Studi Biologi Jurusan Pendidikan Biologi UPI
Pendahuluan Perkembangan teknologi DNA rekombinan sanat dimungkinkan karena penemuan enzim yang dapat memotong molekul DNA pada lokas-lokasi yang spesifik yang jumlahnya terbatas. Enzim-enzim tersebut dikenal sebagai enzim restriksi yang ditemukan pertama kali pada bakteri pada akhir tahun 1960-an. Kerja enzim tersebut dalam tubuh inangnya adalah mengenali dan memotong DNA (termasuk DNA faga tertentu) yang asing bagi bakteri tersebut. Maksud dari kegiatan memotong DNA asing tersebut tidak lain sebagai mekanisme perlindungan bakteri terhadap DNA yang menyelinap dari organisme lain seperti virus atau sel bakteri lain. Enzim-enzim ini bekerja dengan memotong-motong DNA pada lokasi-lokasi yang spesifik- mengenali daerah atau urutan DNA pendek dalam molekul DNA dimana urutan DNA yang dikenali tersebut bersifat PALINDROME. Selanjutnya enzim tersebut akan memotong DNA pada titik tertentu di dalam urutan DNA tersebut. Sel bakteri ini melindungi DNA-nya sendiri dari restriksi dengan menambahkan gugus metil (CH3) pada adenine atau sitosin di dalam urutan yang dikenali oleh enzim restriksi tersebut. Enzim-enzim restriksi yang telah ditemukan dan telah tersedia secara komersial telah berjumlah ratusan. Hasil pemotongan enzim restriksi ada dua jenis. Hasil pemotongan yang menghasilkan ujung tumpul atau “Blunt end” dan hasil pemotongan yang menghasilkan ujung lancip/ lengket atau “sticky end”. Dengan memanfaatkan kerja enzim kita dapat membuat peta restriksi dari suatu molekul DNA. Dalam praktikum ini akan dilakukan pemetaan restriksi sederhana pada plasmid pGemT dengan menggunakan beberapa jenis enzim restriksi.
Gambar Peta Restriksi
1
Bahan dan Alat Bahan 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9.
Plasmid pGemT tanpa sisipan (hasil isolasi dari koloni Biru) Plasmid pGemT dengan sisipan (hasil isolasi dari koloni putih) Enzim Eco RI Enzim EcoRV enzim Alw 441 Enzim Pvu II Bufer enzim untuk masing-masing enzim Air deion steril es batu
Alat 1. 2. 3. 4. 5. 6.
Waterbath 37ºC tabung PCR 0.2 ml baru dan steril tips putih, dan kuning baru dan steril tabung 1.5 baru dan steril Mikropipet vorteks.
Cara kerja 1. Buatlah reaksi campuran untuk pemetaan restriksi dan cek sisipan DNA. Karena keterbatasan alat dan bahan maka hanya dibuat masing-masing 1 mix reaksi untuk satu kelas. Komponen reaksi seperti yang tertera pada tabel 1 dan 2 di bawah ini. 2. Inkubasi semua tabung pada sushu 37ºC selama 1 jam 3. Setelah inkubasi selesai tambahkan kedalam masing-masing tabung reaksi 4 µl loading Dye. Kemudian homogenkan. 4. Elektroforesis semua hasil sesuai urutan yang tertera pada tabel 3 pada voltase 100Volt selama 1-1.5 jam 5. Dokumentasikan hasil praktikum dengan baik Tabel 1. Komponen reaksi untuk cek sisipan DNA Komponen
Jumlah reaksi DNA plasmid 2 µl dari koloni putih Enzim Eco RI 1 µl Buffer EcoRI 1 µl Air Deion 6 µl Total volume 10 µl
1
x Reaksi campuran (tergantung jumlah kelompok)
2
Tabel 2. Komponen reaksi untuk Pemetaan restriksi Komponen Reaksi
Reaksi
DNA Plasmid tanpa sisipan Enzim EcoRV Buffer EcoRV Enzim PvuII Buffer PvuII Enzim Alw441 Buffer Alw441 Air deion steril Total volume
P1 2 µl
P2 2 µl
P3 2 µl
P4 2 µl
P5 2 µl
1 µl 1 µl 6 µl 10 µl
1 µl 1 µl 1 µl 1 µl 1 µl 1 µl 2 µl 10 µl
8 µl 10 µl
1 µl 1 µl 1 µl 1 µl
6 µl 10 µl
6 µl 10 µl
Tabel 3. Komponen reaksi untuk elektroforesis Komponen (satuan µl) sumur 1 Plasmid yang dipotong (kelompok) Plasmid yang tidak dipotong dari plasmid berisi DNA sisipan Air deion Loading Dye DNA Lambda 5 Plasmid -