FARMAKA

Farmaka 151

Suplemen Volume 14 Nomor 2

METODE SPE (SOLID PHASE EXTRACTION) SEBAGAI ALTERNATIF TERBARU DALAM ANALISIS DAN PEMURNIAN SENYAWA OBAT Tri Ulfa Rahmatia Fakultas Farmasi Universitas Padjadjaran ABSTRAK SPE (Solid Phase Extraction) merupakan metode ekstraksi fase padat yang dapat digunakan untuk analisis, pemisahan, purifikasi sampel dalam bidang industri farmasi, maupun analisis toksikologi seperti darah, serum, cairan dan makanan. SPE memiliki keunggulan yaitu proses ekstraksi menjadi lebih sempurna, pemisahan analit dari matriks menjadi lebih efisien, mengurangi pelarut organik yang digunakan. Untuk meningkatkan sensitivitas dan selektivitas dalam analisis sampel, metode SPE dapat digabungkan dengan metode lain seperti Kromatografi (GC-MS) Spektrofotometer UV-Vis, dan HPLC. Menjadi solusi untuk menggantikan teknik lain sebagai teknik terbaru yang bekerja lebih efisien. Kata kunci : SPE, Kromatografi (GC-MS) Spektrofotometer UV-Vis, HPLC ABSTRACT SPE (Solid Phase Extraction) is a solid phase extraction method that can be used for analysis, isolation, sample purification on pharmaceutical industry, and toxicology analysis such as blood, serum, liquid and food. SPE has superiority in processing the extraction even better, isolating analyte even more efficient, and reducing the used organic solvent. To increase the sensitivity and selectivity in sample analysis, SPE method can be adjoined with other methods such as chromatography (GC-MS), Spectrophotometer UV-Vis, and HPLC. This method has been a solution to substitute other techniques as a recent technique that works more efficient. Keywords: SPE, Chromatography (GC-MS) UV-Vis spectrophotometer, HPLC atau obat diperlukan teknik analisis dengan

PENDAHULUAN Banyaknya senyawa yang tersebar

waktu yang cepat, mudah dan efisien.

baik didalam tubuh maupun di alam seperti

Saat

ini

banyak

para peneliti

radioaktif dalam jumlah yang banyak dapat

menggunakan suatu metode terbaru yaitu

mempengaruhi

SPE (Solid Phase Extraction). SPE (Solid

keberlangsungan

hidup

manusia. Tidak hanya senyawa-senyawa

Phase

seperti

ekstraksi fase padat yang dapat digunakan

radioaktif,

tetapi

obat

jika

Extraction)

untuk

kesehatan. Untuk mengetahui jumlah kadar

sampel dalam bidang industri, farmasi,

senyawa

tubuh

maupun analisis toksikologi. SPE (Solid

dan untuk mempermudah analisis senyawa

Phase Extraction) dapat mempermudah

dalam

pemisahan,

metode

disalahgunakan dapat berpengaruh bagi

di

analisis,

merupakan

purifikasi

Farmaka 152


analisis suatu senyawa dari materi biologis seperti

darah,

urin,

air,

dll

yang

mengandung banyak matriks.

ketika

menjadi

lebih

sempurna,

pemisahan analit dari matriks menjadi

namun

lebih efisien, mengurangi pelarut organic

bersifat sangat kompleks dan mengandung

yang digunakan. SPE merupakan proses

begitu banyak komponen kimia berbentuk

pemisahan yang efisien sehingga recovery

cairan dan terdapatnya partikel padat yang

yang tinggi (>99%) lebih mudah dicapai

mengembang

jika dibandingkan dengan ekstraksi cair-

diperlukan

tidak

sampel

ekstraksi

yang

komposisinya

ada

dibandingkan dengan ekstraksi cair-cair yaitu dengan menggunakan SPE proses

Permasalahan yang sering muncul adalah

SPE memiliki keunggulan jika

diketahui

didalamnya.

suatu

teknik

Sehingga yang

dapat

cair.

Pada

ekstraksi

cair-cair

masih

menganalisis senyawa yang spesifik yang

diperlukan ekstraksi beberapa kali untuk

terdapat didalam suatu sampel tersebut1.

memperoleh

Menurut

tinggi,

sedangkan dengan SPE hanya dibutuhkan

Phase Extraction) merupakan salah satu

satu tahap saja2. Menurut Royle et al, SPE

variasi dari teknik analisis yang tersedia

memiliki keunggulan dan telah banyak

untuk memperbaiki kesenjangan yang ada

digunakan karena bisa menggunakan fase

antara sampel dengan tahap-tahap analisis.

diam yang beragam, prosedur yang cepat

Filtrasi, homogenisasi, presipitasi, reaksi

dan sederhana serta throughput yang

kimia, pertukaran pelarut, konsentrasi,

tinggi3. Menurut Ferenc et al dalam

penghapusan

Berthod, keuntungan utama dari SPE

matrix,

solubilisasi dapat

adalah penggunaannya yang mudah, waktu

digunakan secara tunggal atau kombinasi

cepat dan umunya hanya dibutuhkan

untuk mendapatkan sampel dengan bentuk

pelarut ekstraksi dengan volume yang

yang kompatibel dengan alat analisis yang

kecil4.

diperlukan1.

komponen

SPE

yang

(Solid

merupakan

Simpson,

recovery

yang

Selain

itu,

teknik

SPE

telah

dimodifikasi menjadi SPME (Solid Phase

Farmaka 153


Microextraction) yang memiliki serat silica

menganalisis

dilapisi dengan fase diam. Beberapa

dengan menggunakan teknik kromatografi

keuntungan dari SPME adalah dapat

yang berbeda. Sehingga diharapkan dapat

mengurangi

untuk

mengetahui bahwa SPE memiliki banyak

dibandingkan

keunggulan yang dapat dijadikan solusi

dengan metode ekstraksi konvensional

untuk menggantikan teknik lain sebagai

seperti ekstraksi cair-cair5. Dalam SPME

teknik terbaru yang bekerja lebih efisien.

senyawa

METODE

biaya

mempersiapkan

dan

waktu

sampel

yang

lebih

kecil

dapat

dipertahankan dalam pori-pori dari fase polimer dan senyawa yang lebih besar mungkin menyebar baik ke fase murni6.

berbagai

macam

sampel

Pencarian dan Strategi Pencarian Strategi

pencarian

data

yang

dijadikan acuan dalam review article ini

Untuk meningkatkan sensitivitas

adalah dengan menelusuri melalui internet

dan selektivitas dalam analisis sampel, saat

menggunakan browser google chrome

ini metode SPE dapat digabungkan dengan

pada situs google.com. Keyword yang

metode lain seperti kromatografi (GC-MS)

digunakan

Spektrofotometer

Extraction”,“The advantages of SPE”,

UV-Vis,

HPLC,

yaitu

“Solid

Phase

Kromatografi Gas dan Massa. Menurut

“Analysis

Barnes

antara

Kemudian diperoleh jurnal dan artikel

kromatografi dan SPE dapat digunakan

dalam bentuk pdf dan text book sebagai

secara lebih sederhana dan efektif dalam

sumber dan pustaka-pustaka primer untuk

sampel7.

review article ini. Jurnal yang digunakan

Keuntungannya jika dibandingkan dengan

dapat di akses di beberapa situs seperti

metode lain seperti HPLC, NMR, dan MS

ncbi, elshiviere, google scholar, dan

adalah biaya yang murah, kemampuan dan

beberapa situs lainnya.

et

pemurnian,

al,

kombinasi

analisis

analisis sampel cukup bagus7. Tujuan penulisan artikel ini adalah untuk mengetahui kegunaan SPE dalam

of

compounds

with

SPE”.

Farmaka 154


Kriteria

seleksi

data

(ekslusi

dan

HPLC.

Sedangkan

untuk

kriteria

ekslusinya yaitu jurnal yang diterbitkan

inklusi) Dari beberapa sumber jurnal yang didapatkan,

dilakukan

penyeleksian.

skrining

Penyeleksian

dan

tersebut

didasarkan atas kriteria inklusi dan ekslusi

dibawah tahun 2006, dimana sumber yang digunakan setidaknya berada pada 10 tahun terakhir. HASIL

yang sudah ditentukan. Kriteria inklusi

Metode

SPE

Extraction)

Extraction) dalam analisis dan pemurnian

menganalisis

analit

sampel.

berbagai sampel seperti darah, serum, air

dapat

limbah, air tanah, air laut dan daging.

Metode

berbagai SPE

dikombinasikan

macam tersebut

dengan

Kromatografi

(GC-MS) Spektrofotometer UV-Vis, dan

Berikut penelitian

hasil

digunakan

Phase

berupa cara metode SPE (Solid Phase

dari

dapat

(Solid

senyawa-senyawa

dari yang

beberapa didapatkan

untuk dari

jurnal :

Gambar 1. Kromatogram LC-MS-MS pada sampel darah dengan 49 obat dan diekstraksi dengan F-SPE8

Farmaka Suplemen Volume 14 Nomor 2

155

Tabel 1. Aplikasi SPE pada analisis berbagai macam senyawa dari sampel yang berbeda baik dalam darah, serum, air dan makanan No. Analit Sampel Kemasan SPE Referensi 1 THC dan karboksi-THC Darah Florinated-SPE 8 C10H4F17 coloumn 2 Derivat oligosakarida Serum DPA-6S, MCC, DSC- 9 Si, DSC-Diol, DSCCN, DSCNH2 and ZIC-HILIC 3 Asam asetilsalisilat, ibuprofen, Air limbah Supelco LC-18 dan 10 gemfibrozil, fenoprofen, HLB Oasis naproxen, ketoprofen, diklofenak, dan kafein 4 Radioaktif ion Thorium Air (iso)polyoxometalates 11 5 2,6-dinitrotoluene (2,6-DNT), Air FICONSICA 12 trinitrotoluena (TNT) (octyltriethoxysilane dan pentaeritritol tetranitrate (C8(PETN) TEOS 6 Parasetamol Daging Zorbax C-18 13 bebek 7 alprazolam, amfetamin, Darah Resin penukar kation 14 benzoylecgonine, polimer Strata-X-C SPE BROMAZEPAM, Cathine, cathinone, chlordiazepoxide, kokain, kodein, clonazepam, 7aminoclonazepam, diazepam, nordiazepam, flunitrazepam, 7aminoflunitrazepam, ketamine, ketobemidone, 3,4Methylenedioxyamphetamine (MDA) , 3,4methylenedioxymethamphetamine (MDMA), methamphetamine, metadon, morfin, 6monoacetylmorphine, nitrazepam, 7-aminonitrazepam, oxazepam, temazepam, tramadol, Odesmethyltramadol, dan zolpidem. 8 Ion aluminium (III) Air tanah nanoemulsi kitosan 15 9 Senyawa volatile (Kloroform, Air laut polidimetilsiloksan 16 toluene, tetraklorida, xylene, (PDMS) benzena 10 Nitrosan Air MCS 17

Farmaka 156


Gambar 2. Recovery dan standar deviasi relatif pada setiap catridge SPE menunjukkan efek pemurnian yang berbeda9 Kromatogram ini mengindikasikan

terendah

yaitu

30,6%

dan

5.0%.

bahwa dengan menggunakan novel F-SPE

Sedangkan DSC-CN, DSC-Si dan DSC-

untuk analisis THC, THC-d3, karboksi-

NH2 menghasilkan recovery dari 67,3%,

THC, karboksi-THC-d3 pada campuran

62,8% dan 61,6%. Untuk catridge DSC-

obat , telah terbukti secara signifikan

NH2 merupakan kolom yang tidak stabil,

mengurangi efek matriks tanpa adanya

menunjukkan standar deviasi relativ yang

pengurangan

tinggi lebih dari 15%, sedangkan untuk

kadar analit

yang akan

dianalisis8.

semua jenis catridge memberikan standar

Berdasarkan

grafik

diatas

deviasi relativ sekitar 6% atau lebig

menunjukkan bahwa DPA-6S dan MCC

rendah. Sehingga jika membandingkan

masing-masing

recovery

recovery dan reprodusibitas dari ketujuh

tertinggi dibanding catridge yang lain yaitu

catridge menunjukkan bahwa DPA-6S dan

79,6% dan 73,3%. Sedangkan untuk DSC-

MCC

diol dan ZICHILIC menghasilkan recovery

pemurnian

memperoleh

memiliki

keunggulan

derivatisasi

dalam

oligosakarida9.

Farmaka 157


Tabel 2. Parameter Identifikasi dan validasi, LOD, LOQ, dari preparasi kolom SPE Resin penukar kation polimer Strata-X-C SPE14

Berdasarkan

tabel

tersebut,

clonazepam,

flunitrazepam

dan

diperoleh bahwa rentang kalibrasi semua

nitrazepam, yang dimulai pada 0,05 mg /

analit dalam darah dimulai pada 0,02

kg. Rentang kalibrasi untuk semua analit

mg/kg kecuali amfetamine dan cathine

diperpanjang sampai 1,0 mg / kg, kecuali

yang dimulai pada 0.005 mg/kg. Dan 7-

untuk 7- aminoclonazepam, alprazolam,

aminonitrazepam,

diazepam,

chlordiazepoxide,

ketobemidone,

MDA,

Farmaka 158


nordiazepam, temazepam dan zolpidem, di

standar internal. LOQ sebagai konsentrasi

mana 0,5 mg / kg adalah batas atas. Efek

terendah menghasilkan presisi ≤20% dan

matiks dan recovery untuk 30 analit, ME

bias pada ± 20%. Presisi dan akurasi

yang lebih tinggi untuk senyawa elusi awal

maksimal 15% (LOQ 20%). Semua analit

(RT <3 menit) berada

memenuhi kriteria presisi pada tingkat

sehingga

dapat

signifikansi

kecil

dalam ± 50%

disimpulkan karena

bahwa

konsentrasi14.

penggunaan

Tabel 3. Ketelitian metode SPME16

Berdasarkan tabel tersebut dilihat bahwa

metode

mempunyai

standar

berturut-turut

ketelitian yang cukup tinggi. Hal ini dapat

84,29%

dan

dilihat

yang

menunjukkan

yang

dikembangkan juga ternyata mempunyai

ditetapkan oleh The Association of Official

recovery yang cukup tinggi. Hal ini sesuai

analytical Chemistry (AOAC) yaitu 15%,

dengan persyaratan AOAC untuk metode

sehingga masih memenuhi persyaratan

yang baik sampai batas konsentrasi standar

sebagai metode yang baik. Nilai recovery

yang dispiked 100 Hg adalah antara 80 -

untuk benzen, toluen dan pada ekstraksi

110%16

pada

diperoleh

tidak

SPME

sampel yang di spiked dengan larutan

rata-rata

%RSD

melebihi

nilai

adalah

87.54%,

80,56%.

Nilai

tersebut

bahwa

metode

Tabel 4. Analisa hasil perolehan pada penentuan ion Thorium dalam air tanah15 No

Penambahan ion Al (µg/L)

1 2 3 4

0 50 75 100

Perolehan (III) (µg/L) 52 100 116 154

Al RSD 0.8 1.2 1.1 1.2

Perolehan kembali 92 90 100

yang

Farmaka 159


Hasil

percobaan

menunjukkan

polar dan fase gerak bersifat polar yaitu

bahwa hasil perolehan kembali lebih

campuran aquabides, methanol dan asam

kurang 94% yang bermakna bahwa metode

asetat (71:26:3) dengan laju alir 1,5

SPE yang digunakan memberikan hasil

ml/menit

yang akurat15.

spektrofotometri UV . Dari penelitian

Selanjutnya

penelitian

yang

tersebut

kemudian

didapatkan

dideteksi

batas

pada

kuantifikasi

dilakukan oleh ahmad et al, dalam analisis

0,092 ppm, akurasi 83,489%, presisi

bahan peledak (PETN, 2,4-DNT, 2,6-DNT

1,511% dan linearitas 0,99813.

dan TNT) dalam sampel air dapat dideteksi

Menurut

Musa

et

al,

analisis

dan dipisahkan oleh GC-ECD. Diperoleh

sampel berupa nitrosamine dari sampel air

adsorpsi analit selama 30 menit, waktu

menggunakan

desorpsi 3 menit dan desorpsi suhu 230°C

membrane

yang merupakan kondisi SPME optimal

menggunakan

untuk bahan peledak . Dari ketiga serat

liniearitas yang baik kisaran 10-100 mg / L

tersebut CAR/PDMS merupakan serat

dengan koefisien determinasi, r2 ≥ 0,9984.

terbaik untuk mendeteksi bahan peledak

Metode

yang akan diteliti.

Parameter yang

reproduktifitas baik dengan nilai% RSDs

digunakan yaitu waktu adsorpsi, waktu

mulai 2,2-8,9 (n = 3). Batas deteksi (LOD)

desorpsi

dan

dan

temperatur,

jenis

serat

SPME12.

ekstraksi tip

ini

batas

fase

(SPME) (MCS).

juga

kuantifikasi

padat dengan

Didapatkan

menunjukkan

(LOQ)

untuk

metode berkisar 3,2-4,8 mg / L dan 10,9-

Penelitian yang dilakukan oleh

15,9 mg / L masing-masing. Recovery

arum et al, analisis PCT dari daging dapat

untuk kedua air keran dan air danau pada

dianalisis

yang

10 ug / L berada di kisaran 83,2-107,5%.

dikombinasikan dengan KCKT agilent

Dengan parameter ekstraksi yaitu pelarut

1220. Sistem yang digunakan yaitu fase

organik, waktu ekstraksi, perubahan pH,

terbalik dan fase diam berupak kolom

waktu desorpsi, desorpsi pelarut dan

Zorbax C-18 (250 x 4,6 mm) bersifat non

sampel

menggunakan

SPE

volume.

MCS,

telah

banyak

Farmaka 160


digunakan dalam teknik microextraction

delapan kali, dengan recovery sekitar

yang disebut MCS-SPMTE pada analisis

87,56%11.

kuantitatif

nitrosamin

matriks

Penelitian menurut Verenitch et al,

berair. Metode yang dikembangkan telah

dilakukan analisis terhadap obat asam

menunjukkan

seperti

presisi

dalam

yang

baik

dan

asam

asetilsalisilat,

recovery yang memuaskan dalam analisis

ibuprofen,gemfibrozil,

nitrosamin. Sifat yang ramah lingkungan

naproxen, ketoprofen, dan diklofenak,

dan penggunaan sejumlah kecil adsorben

serta

dan pelarut telah membuat MCS-SPMTE

menggunakan ekstraksi fase pada (SPE)

menjadi metode alternatif yang baik untuk

dengan catridge masing-masing Supelco

analisis nitrosamin di dalam air17.

LC-18 dan Oasis-HLB SPE kemudian

kafein

fenoprofen,

dalam

air

limbah

Menurut penelitian yang dilakukan

dianalisis dengan spektrofotometri massa.

oleh Olariu et al, analisis suatu ion yaitu

Parameter yang diuji yaitu collision-

ion

induced dissociation (CID) voltage, isolasi

thorium

dalam

air

dengan

menggunakan SPE dapat dilakukan dan di

waktu,

analisis

spektrofotometri.

penyimpanan eksitasi, dan energi electron

Diperoleh parameter retensi optimal untuk

untuk mengoptimalkan kinerja instrument.

fase padat sekitar 0.2g /cartridge, 2 ml

Setelah optimasi didapatkan LOD sebesar

HNO3 (2M) untuk pengkondisian stasioner

0.5–20 pg/µL dengan signal-to-noise (S/N)

pada daya alir 1,5 ml / menit, penambahan

tidak kurang dari 5 untuk semua analit10.

2 ml air suling. pH optimal 4 ÷ 6 unit

PEMBAHASAN

untuk

dengan

laju

aliran

1,5

ml

/

waktu

eksitasi,

tingkat

menit.

Metode yang sederhana dan masih

Radionuklida dengan rentang konsentrasi

sering digunakan oleh peneliti adalah

yang dapat dianalisis adalah 10-4 ÷ 10-7M.

ekstraksi cair-cair (LLE). Ketika sampel

Dari hasil tersebut dapat disimpulkan

atau campuran pelarut telah bercampur,

bahwa cartridge dapat digunakan sampai

dua lapisan akan terbentuk dan salah satunya mengandung banyak komponen

Farmaka 161


yang akan diekstraksi. Lapisan yang

2. Elusi

terbentuk dipisahkan kemudian salah satu

Selanjutnya

lapisan yang mengandung komponen yang

menghilangkan senyawa yang

akan diambil dikeringkan menggunakan

tidak dibutuhkan dari sorben

rotary evaporator1.

dan untuk menampung analit

Tahap-tahap

solid

phase

extraction1

teknik

untuk

pada sorben. 3. Pencucian

1. Retensi

Selama

waktu

retensi,

Ketika campuran terdistribusi

campuran pada sampel yang

antara sampel larutan dengan

kompleks akan tertahan pada

permukaan padat baik dengan

permukaan

observasi

ke

mengurangi interferensi selama

melalui

proses pencucian, kita harus

sederhana

permukaan penetrasi molekul

atau lapisan

luar

dari

di

permukaan,

kesetimbangan

akan

padat.

Untuk

menambahkan satu langkah lagi diantara step retensi dan elusi.

didapatkan.

Gambar 1. Tahap solid phase extraction setelah pengkondisian sorben1.

Farmaka 162


Skema menunjukkan apa yang terjadi

selama

sampel

dilewatkan,

1. Konsentrasi Untuk

menghitung

kuantitas

secara

akurat,

pencucian sorben, dan elusi analit. Pada

campuran

setiap langkah beberapa campuran akan

dibutuhkan konsentrasi. Hal ini

tertahan dan yang lain akan terelusi1.

bertujuan agar didapatkan respon

Dalam teknik SPE (Solid phase

dari system yang dideteksi dan

Extraction), biasanya terdapat beberapa

akan

reagen yang dapat sebagai matriks seperti

kesalahan karena adanya matriks.

garam, reagen derivatisasi, dan pelarut

mengurangi

error

atau

2. Clean-Up

sehingga diperlukan prosedur washing dan

Tujuan clean-up selama preparasi

elution untuk menghilangkan kelebihan

sampel, kromatogram yang terlihat

reagen yang sering menjadi matriks atau

sebelum dan sesudah clean-up pada

pengganggu dalam mendeteksi analit18.

SPE

The Objectives of Solid-Phase Extraction 1

3. Sample

Matrix

Removal/Solvent

spesifik1.

Exchange Banyak instrumen seperti kromatografi cair

dan

spektrofotometer

digunakan untuk analisis sampel secara

infrared

Berdasarkan

jurnal

yang

didapatkan, terdapat beberapa penelitian

Farmaka 163


mengenai analisis suatu senyawa dari

untuk mengisolasi dan pemurnian. Pada

berbagai macam sampel seperti pada

hasil analisis kadar THC pada darah

darah, serum, air, dan makanan dengan

diperoleh

menggunakan metode SPE (Solid Phase

sebagai ukuran untuk menentukan akurasi

Extraction) yang bisa dikombinasikan

atau ketidak tepatan pada range kurva

dengan metode lain yaitu Spektrofotometer

kalibrasi. Nilai LOD sebagai tingkat rasio

UV-Vis, HPLC, Kromatografi Gas dan

antara signal to noise untuk analit tertentu

Massa.

≥ 3: 1. Batas kuantifikasi (LOQ) untuk Berdasarkan

penelitian

nilai-nilai

yang

digunakan

yang

metode adalah tingkat di mana rasio

dilakukan oleh Elian & Hackett, analisis

signal-to-noise untuk analit tertentu adalah

suatu senyawa yaitu THC dari sampel

≥ 10: 1. Nilai recovery yang diperoleh

darah

yaitu 85 ± 2% (THC) dan 89 ± 2%

dapat

dilakukan

dengan


(karboksi-THC),

Extraction) dengan penambahan florin

linier karena diperoleh r ≥ 0,995 pada

sebagai sorben yang dapat meningkatkan

kisaran 0,25 ng / mL untuk 50 ng / mL.

polaritas ikatan silica8. THC merupakan

Berdasarkan

bahan aktif utama yang terdapat pada ganja

dilakukan oleh Elian & Hackett, SPE

20

hanya

terbukti secara signifikan menurangi efek

menyebabkan kecanduan, tapi penggunaan

matriks (karena lebih 94% dari matriks

jangka

mengganggu

telah

terganggunya

pengurangan kadar analit

dalam

19

.

Ganja

panjang

kesehatan

dapat

seperti

tidak

konektivitas pada syaraf otak21 dalam

19

.

kurva

hasil

dihilangkan)

kalibrasi

penelitian

tanpa

yang

yang

adanya

yang akan

dianalisis8.

Pada remaja efek negatif akan terus

Selanjutnya terdapat penelitian juga

bertambah hingga dewasa karena dapat

yang dilakukan terhadap analisis berbagai

terjadinya efek penurunan yang signifikan

macam obat dari sampel darah yang ditulis

pada IQ

22

dalam

19

. F-SPE telah banyak

oleh Dalsgaard et al, menjelaskan bahwa

digunakan dalam bidang kimia farmasi

analisis secara kuantitatif dari obat pada

Farmaka 164


sampel darah dapat dilakukan dengan

laju aliran dan gangguan kimia. untuk

metode

(Ultra-High

menganalisis gugus fungsi dari matriks

Pressure Liquid Chromatography Time-of-

digunakan spektroskopi FTIR. Dari hasil

Flight Mass Spectrometry). Metode ini

uji parameter dapat disimpulkan bahwa

untuk skrining dan kuantifikasi obat umum

cartridge dapat digunakan sampai delapan

dan penyalahgunaan obat. Berdasarkan

kali, dengan recovery sekitar 87,56% dan

parameter identifikasi dan validasi, LOD,

metode SPE dapat digunakan secara efektif

dan LOQ, efek matriks dan recovery yang

untuk menganalisis ion thorium11.

UHPLC-TOF-MS

diperoleh,

dapat

bahwa

Penelitian lain yang dilakukan oleh

analit

Erdawati, analisis senyawa ion dari air

memnuhi kriteria presisi pada tingkat

tanah menggunakan metode ekstraksi fase

konsentrasi14.

padat (SPE). Adsorben yang digunakan

signifikansi

kecil

Berdasarkan

disimpulkan dan

semua

penelitian

yang

yaitu

nanoemulsi

kitosan

dilakukan oleh Olariu et al. Analisis suatu

dianalisis

senyawa dari sampel air dilakukan dengan

spektrofotometer UV. Parameter yang


digunakan

Extraction). Digunakan SiO2 K8[SiW11O39]

optimum proses pemekatan seperti pH,

sebagai fase padat untuk preconcentration

volume, berat adsorben dan laju alir

dan pemisahan senyawa dari sampel air,

sampel divariasikan pada berbagai kondisi.

digunakan larutan Arsenazo (III) sebagai

Untuk menguji kesensitifan dan selektifitas

reagen kromogenik. Untuk sorben yang

kolum C18, larutan komplek kobalt-5-

digunakan yaitu (Iso) polyoxometalates

(2benzothiazolylazo)-8hydroxyquinolin

yang merupakan modifikasi dari silica

(Co-BTAHQ)

SPE,

isopentilalkohol.

dan

untuk

analisis

digunakan

dengan

kemudian

untuk

menentukan

dan

tersebut

menggunakan

elusi

Berdasarkan didapatkan

kondisi

dengan hasil

spektrofotometri UV-Vis. Parameter yang

penelitian

hasil

berkaitan dengan penelitian ini yaitu

perolehan kembali lebih kurang 94% yang

jumlah sorben, jenis dan jumlah eluen, pH,

menyimpulkan bahwa metode SPE yang

Farmaka 165


digunakan

memberikan

hasil

yang

akurat15.

MCS-SPMTE (Karbon mikroporos dengan membrane tip pada metode SPE) dengan

Penelitian

selanjutnya

juga

parameter pelarut yang digunakan, waktu

dilakukan oleh Rinawati et al, dengan

ekstraksi,

memonitoring sampel air yaitu air laut

perubahan pH, waktu desorpsi, desorpsi

untuk

senyawa-senyawa

pelarut dan sampel volume. Berdasarkan

yang terkandung didalam air laut tersebut.

parameter uji yang dilakukan menunjukkan

Pada penelitian digunakan metode SPME

bahwa metode ini telah menunjukkan

(Solid

presisi

menganalisis

Phase

Microextraction)yang

efek

yang

samping

baik

garam

recovery

dan

yang

merupakan modifikasi dari teknik SPE

memuaskan serta dengan metode SPMTE

selanjutnya

dihubungkan

ini

kromatografi

gas

spektrofotometri

dengan

dengan

detektor

massa

(Gas

Chromatography Mass Spektrofotometer, GC-MS).

Faktor

yang

pelarut

yang

digunakan

sedikit

sehingga menjadi alternative baik untuk analisis nitrosamine17. Penelitian lain juga dilakukan oleh

mempengaruhi

Ahmad & Heng, menganalisis bahan

seperti jenis serat yang dipilih, bentuk alat,

peledak yang terdapat dalam sampel air

waktu dan suhu ekstraksi, cara ekstraksi,

dengan parameter waktu adsorpsi, waktu

pengadukan, pH dan volume sampel. Dari

desorpsi dan temperatur, jenis serat SPME.

hasil uji parameter dan didapatkan nilai

Berdasarkan parameter uji yang dilakukan,

%RSD dan recovery tidak melebihi nilai

dapat dismpulkan bahwa teknik SPME dan

yang diterapkan oleh The Association of

GC-ECD ini merupakan teknik yang baik

Official analytical Chemistry (AOAC)

untuk menganalisis bahan peledak dari

yaitu 15%, sehingga masih memenuhi

sampel air12.

persyaratan sebagai metode yang baik16. Penelitian lain dilakukan oleh Musa et

al,

menganalisis

sampel

Berdasarkan

penelitian

yang

dilakukan oleh Verenitch et al, analisis

berupa

obat seperti obat yang bersifat asam dan

nitrosamine dari air menggunakan metode

basa dalam permukaan air limbah dapat

Farmaka 166


disaring

dan

diperoleh

target

analit

Zorbax C-18 (250 x 4,6 mm) sebagai fase

Digunakan

diam dan fase gerak campuran eluen

Supelco LC-18 dan Oasis catridge HLB

aquabidest : methanol : asam asetat glasial

SPE.

(71 : 26 : 3), sistem isokratik, dan detektor

menggunakan metode SPE.

Selanjutnya

analisis

dilakukan

dengan menggunakan Kromatografi ion-

UV.

Spektrofotometri

bahwa

Massa

(IT-MS/MS).

Dari hasil penelitian menunjukkan metode

analisis

memenuhi

Parameter yang digunakan pada analisis ini

persyaratan validasi untuk menganalisis

seperti waktu isolasi, waktu eksitasi,

kadar PCT dalam sampel13. Menurut

tingkat penyimpanan eksitasi dan energi

BPOM 2013, kombinasi metode ekstraksi

elektron untuk mengoptimalkan kinerja

cair-cair (ECC), ekstraksi fase padat atau

analitik instrumen. Dari hasil uji parameter

Solid

yang dilakukan

menunjukkan bahwa

Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT)

metode SPE memiliki linearitas yang baik

dapat memberikan hasil analisis PCT yang

antara 10–2000 pg/µL10.

memenuhi kaidah validasi23. Prinsip kerja

Phase

Extraction

(SPE)

dan

Berdasarkan penelitian Arum et al,

KCKT adalah dengan bantuan pompa fase

analisis obat seperti parasetamol dalam

gerak cair dialirkan melalui kolom ke

produk makanan dapat dipisahkan dengan

detektor. Cuplikan dimasukkan kedalam

menggunakan teknik ekstraksi fase padat

aliran fase gerak dengan cara penyuntikan.

(SPE). Preparasi sampel dilakukan dengan

Didalam

menggunakan asam trikloroasetat 1% ,

komponen-komponen campuran. Karena

asetonitril

dan

kolom

terjadi

pemisahan

ekstraksi

cair-cair

perbedaan kekuatan interaksi antara solute-

n-heksana.

Kolom

solut terhadap fase diam. Solut-solut yang

dilewatkan dengan metanol, dibilas dengan

kurang kuat interaksinya dengan fase diam

aquades

etanol.

akan keluar dari kolom terlebih dahulu.

dengan

Sebaliknya,

menggunakan

Analisis

dan

dielusi

sampel

dengan

dilakukan

solute-solut

yang

kuat

menggunakan KCKT (Kromatografi Cair

berinteraksi dengan fase diam maka solute-

Kinerja

solut tersebut akan keluar dari kolom lebih

Tinggi)

menggunakan

kolom

Farmaka 167


lama. Setiap komponen campuran yang

memiliki efektivitas dan selektivitas yang

keluar kolom dideteksi oleh detektor

tinggi serta tidak membutuhkan pelarut

kemudian

yang terlalu banyak seperti pada ekstraksi

direkam

dalam

bentuk

kromatogram24.

cair-cair. Waktu yang diperlukan lebih

Menurut penelitian Zhang et al,

cepat dan sederhana sehingga metode ini

untuk analisis karbohidrat yaitu pemurnian

sangat menarik untuk digunakan dalam

derivatisasi

berbagai

oligosakarida

dibutuhkan

analisis

sampel

sensitivitas deteksi dan derivatisasi kimia

darah,serum,air

yang tinggi.

dijadikan sebagai solusi untuk teknik

Diperlukan metode yang

dan

makanan

seperti

efisien seperti SPE dengan tujuh jenis

terbaru yang lebih efisien.

catridge dengan kondisi optimal. Secara

UCAPAN TERIMA KASIH

dan

sistematis

catridge

dibandingkan

Penulis mengucapkan rasa syukur

kemudian

didapatkan

mikrokristalin

kepada Allah SWT yang telah memberikan

selulosa sebagai catridge SPE yang paling

rahmat dan karunia-Nya sehingga penulis

tepat untuk pemurnian oligosakarida ini.

dapat menyelesaikan review article ini.

Untuk tahapan analisis dibantu oleh alat

Dan tidak lupa penulis mengucapkan

HPLC dengan fase normal. Sehingga jika

terimakasih kepada kedua orang tua yang

membandingkan

senantiasa mendukung, mendoakan dan

reprodusibitas

dari

recovery

dan

ketujuh

catridge

memotivasi,

dan

ucapan

terimakasih

menunjukkan bahwa DPA-6S dan MCC

kepada dosen mata kuliah metodologi

memiliki keunggulan dalam pemurnian

penelitian yang telah memberikan arahan,

derivatisasi oligosakarida9.

petunjuk dan ilmu yang bermanfaat bagi

SIMPULAN

penulis, serta kepada dosen pembimbing

Berdasarkan dan

parameter

uji

penelitian-penelitian yang

ibu Keri Lestari Dandan yang telah

dilakukan,

meluangkan waktunya untuk membimbing

didapatkan kesimpulan bahwa metode

penulis dan telah memberikan saran serta

analisis SPE (Solid Phase Extraction) yang

Farmaka 168


perbaikan dalam penulisan review article

Pharmaceutical Analysis. 2014 :

ini.

4(2) : 117-124. 5. Calderara S, G Gardebas, and F

KONFLIK KEPENTINGAN Tidak

terdapat

potensi

kepentingan

dengan

kepenulisan

(authorship),

konflik

penelitian, dan

atau

publikasi artikel ini.

Martinez.

Solid-phase

Microextraction Coupled with oncolumn GC/ECD for the Post-blast Analysis of Organic Explosives. Forensic Sci. Int. 2003:137: 6-12.

DAFTAR PUSTAKA 1. Simpson, Nigel J.K. Solid-Phase

6. Polo M, M Llompart, C Garcia-

Extraction: Principles, Techniques,

Jares,

and Applications. New York : CRC

Bollain, and R Cela. Development

Press ; 2000.

of a Solid-phase Microextraction

2. Rohman, A. Kromatografi untuk Analisis

Obat.

Yogyakarta

:

Pustaka Graha Ilmu ; 2009.

G

Method

Gomez-Noya,

for

Phenolic

the

Flame

M

H

Analysis

of

Retardants

in

Water Samples. J. Chromatogr. A.

3. Royle L, Campbell MP, Radcliffe

2006 : 1124(1-2): 11-21.

CM, White DM, Harvey DJ, et al.

7. Barnes J, Tian L, Lotfis J, Hiznay

HPLC-based analysis of serum N-

J, Comhair S, Lauer M, Dweik R.

glycans on a 96-well plate platform

Isolation and analysis of sugar

with dedicated database software.

nucleotides

Anal Biochem . 2008 : 376: 1–12.

extraction and fluorophore assisted

4. Berthod L, Roberts G, Mills G.A.

carbohydrate

using

solid

electrophoresis.

A solid-phase extraction approach

Barnesetal./MethodsX3.

for

251–260

the

identification

of

pharmaceutical–sludge adsorption mechanisms.

Journal

of

phase

2016

J. :

8. Elian AA & Hackett Jeffery. SolidPhase Extraction and Analysis of THC

and

Carboxy-THC

from

Farmaka 169


Whole Blood

Using a Novel

WATER SAMPLES. International

Fluorinated Solid-Phase Extraction

Journal of Criminal Investigation.

Sorbent

2007 : Vol. 1,Issue 1, 25-30.

and

Fast

Liquid

Chromatography–Tandem

Mass

12. Ahmad UK & Heng KK. SOLID

Spectrometry. Journal of Analytical

PHASE

Toxicology. 2009 Vol (33).

GAS CHROMATOGRAPHY FOR

9. Zhang

Q,

Xiaojun,

Li

Henghui,

Liu

Purification

BF, of

Liu

Feng X.

Derivatized

MICROEXTRACTION-

THE

ANALYSIS

OF

EXPLOSIVES IN POST BLAST WATER

SAMPLES.

Jurnal

Oligosaccharides by Solid Phase

Teknologi. 2007 : 46(C): 59–74

Extraction for Glycomic Analysis.

13. Arum IPS, Effendi DH, Hamdani

PLOS ONE. 2014 Volume (9),

S. Pengembangan Metode Analisis

Issue 4.

Parasetamol dalam Daging Bebek

10. Verenitch SS, Lowe CJ, Mazumder

Menggunakan Kromatografi Cair

A. Determination of acidic drugs

Kinerja

Tinggi.

Prosiding

and

Penelitian

Sivitas

Akademika

caffeine

in

municipal

wastewaters and receiving waters by gas chromatography–ion trap

Unisba. 2015 14. Dalsgaard

PW,

Rode

AJ.,

BS,

Bjork

MK.,

tandem mass spectrometry. Journal

Rasmussen

of Chromatography A. 2006 : 1116:

Madsen K.A, Gammelgaard B,

193–203.

Simonsen

11. Olariu RI, Arsene C, Humelnicu D, Vasilache

V.

SOLID-PHASE

EXTRACTION

AND

KW,

Linnert

K.

Quantitative Analysis of 30 Drugs in Whole Blood by SPE and UHPLC-TOF-MS.

Journal

of

SPECTROPHOTOMETRIC

Forensic Science & Criminology.

DETERMINATION OF ULTRA

2013 : Vol (1), No(1)

TRACE

THORIUM

(IV)

IN

Farmaka 170


15. Erdawati.

Penentuan

Ion

Aluminium (III) Dalam Air Tanah

quantification. Anal Bioanal Chem. 2010 : 397: 3457–3481.

Dengan Metode Ekstraksi Fasa

19. Nora D. Volkow M.D, Ruben D.

Padat. Jurnal Riset Sains dan

Baler, Wilson M Compton M.D,

Kimia Terapan, Vol. 2 No, ISSN:

and Susan RB Weiss. Adverse

2302-8467, Juni 2012.

Health Effects of Marijuana Use.

16. Rinawati., Utami, N., Simanjuntak, W.

SOLID-PHASE

MICROEXTRACTION MONITORING PELABUHAN

The new england journal o f medicine, 2014 : 370;23

UNTUK

20. Dinieri JA, Hurd YL. Rat models

LAUT

of prenatal and adolescent cannabis

AIR

PANJANG.

J.

Sains MIPA. 2008 : Vol. (14,) No (2) : 101 - 106

exposure. Methods Mol Biol. 2012 : 829: 231-42. 21. Zalesky A, Solowij N, Yucel M, et

17. Musa M.S, Snagi MM, Nur H,

al. Effect of long-term cannabis use

Ibrahim WAW. MICROPOROUS

on axonal fibre connectivity. Brain

CARBON

. 2012;135: 2245-55.

PHASE

SPHERES MEMBRANE

SOLID TIP

22. Meier MH, Caspi A, Ambler A, et

THE

al. Persistent cannabis users show

ANALYSIS OF NITROSAMINES

neuropsychological decline from

IN WATER SAMPLES. Malaysian

childhood to midlife. Proc Natl

Journal of Analytical Sciences.

Acad Sci U S A . 2012;109(40)

EXTRACTION

FOR

2015 : Vol (19) No (2): 325 – 337 18. Ruhaak LR, Zauner G, Huhn C,

23. Badan Makanan

Pengawas Republik

Obat

dan

Indonesia.

Bruggink C, Deelder AM, et al.

2013. Peraturan Kepala Badan

Glycan labeling strategies and their

Pengawasan Obat dan Makanan

use

Republik Indonesia No.37 2013.

in

identification

and

Farmaka 171


Batas

maksimum

penggunaan

Bahan Tambahan Pangan Pewarna. 24. Hendrayana S. Kimia Pemisahan Metode

Kromatografi

dan

elektroforesis Modern. Bandung : PT Remaja Rosdakarya : 2006.

FARMAKA

Recommend Documents