ISOLASI DAN UJI BSLT EKSTRAK ETIL ASETAT DAUN

Jurnal Sains Farmasi & Klinis, 1(2), 184-194

ARTIKEL PENELITIAN

Isolasi dan Uji BSLT Ekstrak Etil Asetat Daun Meranti Sabut (Shore Ovalis (Korth.))

Isolation and BSLT test of ethyl acetate extract of Shorea ovalis [Kort.] leaves Enda Mora , Musyirna Rahma Nst, Emma Susanti & Arfan Zasliadi

Keywords: Isolation, characterization, ethyl acetate extract of Shorea ovalis (Kort.) leaves, BSLT test.

ABSTRACT: Isolation and test of Brine Shrimp Lethality Test (BSLT) of ethyl acetate extract of Shorea ovalis [Kort.]) leaves have been done. The isolation method used was column chromatography by Step Gradient Polarity (SGP). The aim of this research was to isolate the metabolite secondary compound and examine the activity test of Brine Shrimp Lethality Test (BSLT) from ethyl acetate extract of Shorea ovalis [Kort.]) leaves. The result showed that pure compound was I¬A which characterized by spectrum of IR, H-NMR, C-NMR, HSQC, HMBC and colour reaction of Liebermann-Burchard test. The characterization of the isolate was phytosterol with estimated molecular formula C27H48O. Result of BSLT test revealed that of ethyl acetat extract of meranti sabut leaves at 100, 10, and 1 ppm had value of LC50= 40.45 ppm with death of larva of Artemia salina equal to 56,6 % and was considered as very toxic.

Kata Kunci: Isolasi, karakterisasi, ekstraks etil asetat daun meranti sabut, uji BSLT.

ABSTRAK: Telah dilakukan isolasi dan uji BSLT ekstrak etil asetat daun meranti sabut (Shorea ovalis [Kort.]). Isolasi menggunakan metode kromatografi kolom dengan cara Step Gradient Polarity (SGP). Penelitian ini bertujuan mengisolasi senyawa metabolit skunder dan uji BSLT ekstraks etil asetat daun meranti sabut (Shorea ovalis [Kort.]). Dari hasil penelitian didapatkan senyawa murni IA dan dikarakterisasi dengan spektrum IR, H-NMR, C-NMR, HSQC dan HMBC serta reaksi warna menggunakan pereaksi Liebermann-burchard. Hasil karakterisasi senyawa IA disimpulkan adalah senyawa golongan fitosterol dengan perkiraan rumus molekul C27H48O. Hasil uji BSLT ekstrak etil asetat daun meranti sabut pada konsentrai 100, 10 dan 1 ppm diperoleh nilai LC50= 40.45 ppm dengan persen kematian larva Artemia salina sebesar 56,6 %, tergolong sangat toksik.

Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Riau Korespondensi: Enda Mora ([email protected])

184

Jurnal Sains Farmasi & Klinis (e-ISSN: 2442-5435) | Vol. 01 No. 02 | Mei 2015

Isolasi dan Uji BSLT Ekstrak Etil Asetat Daun...

PENDAHULUAN Shorea

adalah

Dipterocarpaceae kelompok

Class

: Magnoliopsida

Ordo

: Theales

famili

Famili

: Dipterocarpaceae

merupakan

Genus

: Shorea

tumbuhan yang

tumbuhan

| Mora, dkk.

tingkat

tinggi

Spesies : Shorea ovalis (Kort)

penghuni hutan tropis yang tersebar di sebagian wilayah Indonesia terutama hutan

Pada bagian batang, daun, dan biji

Kalimantan dan Sumatera (1). Beberapa

tumbuhan Shorea mengandung metabolit

spesies dari genus Shorea adalah penghasil

sekunder seperti alfa viniferin suatu trimer

buah tengkawang yang merupakan komoditi

stilbenoid dan Hopeaphenol suatu tetramer

ekspor dimana kulit kayunya mengeluarkan

stilbenoid yang berfungsi sebagai antioksidan

getah damar yang dapat digunakan untuk

(4,2,5).

berbagai keperluan, seperti dalam industri

diketahui berbagai jenis senyawa metabolit

obat-obatan dan kosmetika (2). Buah Shorea

sekunder dengan bioaktivitas yang sangat

telah lama dimanfaatkan oleh masyarakat

menarik diantaranya: senyawa baru turunan

pedesaan sebagai obat tradisional dalam

oligostilbenoid dari ekstrak metanol kulit

menyembuhkan berbagai macam penyakit,

batang Shorea gibbosa yang diberi nama

seperti: diare, luka bakar, obat sariawan

diptoindonesin F sebagai antibakteri, antiviral

dan

terhadap sel P-388 (6).

dapat

memperlancar

peredaran

Hasil

penelitian

sebelumnya,

darah. Minyak hasil perasan dari biji buah

Jenis-jenis Dipterocarpaceae tersebar

tengkawang ini digunakan sebagai pengawet

luas terutama di Asia tenggara hingga ke

nasi dan minyak tradisional (1).

arah barat Srilanka, India utara, dan ke arah

Tumbuhan Shorea ovalis (Kort) dapat diklasifikasikan sebagai berikut (3):

timur Filipina dan Indonesia. Di Indonesia sendiri tanaman ini tumbuh alami di daerah

Kingdom : Plantae

Kalimantan, Sumatera, Jawa, Nusa Tenggara,

Phylum

Bali, Sulawesi dan Maluku. Jumlah spesies

: Tracheophyta

Gambar 1. Daun meranti sabut (Shorea ovalis Kort.)


185


| Mora, dkk.

yang terdapat di daerah Riau merupakan

sekunder dilakukan terhadap daun meranti

terbanyak di Sumatera. Berdasarkan hal di

sabut Shorea ovalis. (Kort). Sebanyak

atas maka peneliti melakukan isolasi dan uji

5 g sampel dipotong sampai halus, lalu

aktivitas BSLT dari ekstrak etil asetat daun

diekstraksi dengan etanol, pada ekstrak

meranti sabut (Shorea ovalis (Kort).

ini ditambahkan masing-masing 5 ml air suling dan kloroform lalu dikocok kuat dan

METODE PENELITIAN

dibiarkan beberapa saat sampai terbentuk dua lapisan. Lapisan air digunakan untuk

Alat dan Bahan

uji senyawa flavonoid, fenolik, dan saponin. Lapisan kloroform digunakan untuk uji

Alat yang digunakan dalam penelitian

senyawa terpenoid, dan steroid.

ini adalah alat destilasi, rotary evaporator, neraca analitik, kolom kromatografi, plat

Uji Flavonoid

KLT GF254, chamber, lampu UV penampak

Beberapa tetes lapisan air pada plat

noda, vial, pipa kapiler, alat penentu titik leleh

tetes ditambah 1-2 butir logam magnesium

melting point apparatus, spektrofotometer

dan beberapa tetes asam klorida pekat

UV-VIS, spektrofotometer IR, NMR dan

hingga

peralatan gelas yang umum digunakan.

muda sampai merah menandakan adanya

Sampel yang digunakan dalam penelitian

terbentuk

warna

jingga,

merah

senyawa flavonoid.

ini adalah daun meranti sabut (Shorea ovalis. (Korth)). Bahan yang digunakan adalah

Uji Fenolik

n-heksana, etil asetat, metanol, aquadest,

Beberapa tetes lapisan air pada plat

asam asetat anhidrat, kloroform, kloroform

tetes ditambah 1–2 tetes larutan besi (III)

amoniak, logam magnesium, larutan FeCl3,

klorida 1%. Bila terbentuk warna biru/ungu,

HCl 1%, H2SO42N, pereaksi Liebermann-

berarti terdapat senyawa fenolik.

Burchard, pereaksi Meyer, dan silika gel 60. Uji Saponin Cara Kerja

Lapisan air dalam tabung reaksi dikocok. Apabila terbentuk busa yang bertahan

Pengambilan dan Pengolahan Sampel Sampel yang akan digunakan adalah

selama 5 menit, berarti positif adanya saponin.

daun dari tumbuhan meranti sabut (Shorea ovalis. (Korth) yang diambil di Bukit Suligi

Uji Terpenoid dan Steroid

Kecamatan Tandun, Kabupaten Rokan Hulu.

Lapisan kloroform disaring melalui pipet

Daun dari tumbuhan meranti sabut (Shorea

yang berisi norit. Hasil saringan di pipet 2–3

ovalis (Korth) terlebih dahulu dibersihkan dari

tetes dan dibiarkan mengering pada plat

kotoran yang melekat. Kemudian dikering

tetes. Setelah kering ditambahkan pereaksi

anginkan dan dirajang.

Liebermann-Burchard (2 tetes asam asetat anhidrat dan 1 tetes asam sulfat pekat).

Uji Fitokimia (7)

Terbentuknya warna merah berarti positif

Uji pendahuluan kandungan metabolit

186

adanya terpenoid dan warna hijau-biru



berarti positif adanya steroid.

| Mora, dkk.

dimasukkan dalam kolom. Kemudian dielusi secara bergradien menggunakan pelarut n-heksan, etil asetat, kemudian dengan

Uji Alkaloid Sampel daun meranti sabut Shorea

metanol. Hasil pemisahan ditampung dalam

ovalis (Korth)sebanyak 5 g dalam bentuk

vial 15 ml dan diberi nomor 1 sampai 279.

serbuk,

Hasil kolom dibagi dalam beberapa fraksi dan

ditambahkan

10

kemudian

ditambahkan

kloroform

beramoniak

ml

kloroform,

10

ml

larutan

berdasarkan hasil KLT di peroleh 15 fraksi,

0,05

M,

diaduk

hasil fraksi I digabung vial 30 sampai 39.

kemudian disaring. Kedalam tabung reaksi

Selanjutnya direksristalisasi, dan diperoleh

tambahkan 10 tets asam sulfat 2 N, kocok

17, 8 mg.

selama 2 menit, biarkan hingga terbentuk dua lapisan dan terjadi pemisahan. Ambil

Pengujian

lapisan asam (atas) dan tambahkan 1-2

Dengan KLT

tetes pereaksi Meyer jika terbentuk endapan

Hasil

Hasil

Kromatografi

pemisahan

Kolom

kromatografi

putih menunjukkan hasil yang positif untuk

kolom dilakukan uji KLT. Vial-vial yang

alkaloid (8).

akan diuji ini diambil secara acak setiap 5 vial, selanjutnya plat KLT dielusi dengan

Ekstraksi Sampel

eluen yang sesuai sampai batas atas plat

Sampel dimaserasi secara bertingkat

KLT, lalu plat di keluarkan dan dikeringkan.

yang dimulai dri n-Heksana, setelah itu

Untuk

dimaserasi

asetat

dapat dilakukan memakai plat KLT GF 255

dengan 3 kali pengulangan, kemudian di

dengan penyinaran lampu UV. Selanjutnya

saring sehingga diperoleh maserat. Maserat

ditentukan Rf dari masing-masing bercak.

dipekatkan dengan rotary evaporator hingga

Vial yang mempunyai harga Rf yang sama

diperoleh ektrak kental etil asetat (9).

dapat digabungkan menjadi satu fraksi.

Pemisahan Dengan Kromatografi Kolom

Rekristalisasi

dengan

pelarut

etil

Pemisahan senyawa-senyawa yang

melihat

bercak

yang

dihasilkan

Senyawa hasil kolom direkristalisasi

ada di dalam ekstrak dilakukan dengan

dengan menggunakan dua macam pelarut

kromatografi kolom dengan diameter ukuran

yang berbeda kelarutannya. Pelarut yang

kolom 3 cm, panjang kolom 40 cm dengan

pertama ditambahkan dengan pelarut yang

sistem gradien mulai dari n-heksanan 100

dapat melarutkan hasil isolasi yang jumlahnya

%, n-heksanan : etil asetat 1 berbanding10

sedikit dan selanjutnya ditambahkan pelarut

hingga metanol 100 % dengan memakai

yang tidak melarutkan hasil isolasi, sehingga

silika gel 60. Pengisian kolom dilakukan

terjadi rekristalisasi dan pelarut diuapkan

dengan

(10).

membuat

bubur

silika

terlebih

dahulu, lalu dimasukkan ke dalam kolom dengan menggunakan corong, kemudian dielusi sampai kerapatan silika di dalam kolom

maksimum.

dipisahkan

Ekstrak

dilakukan

yang

preadsorpsi

Karakterisasi Kemurnian

senyawa

yangdiperoleh

akan

sebanyak 12 mg ditentukan dengan KLT

dan

dan pengujian titik leleh menggunakan


187


| Mora, dkk.

alat melting point apparatus, selanjutnya

air laut beberapa tetes hingga mencapai

dilakukan elusidasi struktur menggunakan

kalibrasi (13).

spektrofotometer (UV-Vis), IR,

Ultraviolet

dan

Visibel

dan spektroskopi resonansi

HASIL DAN DISKUSI

magnetik inti (NMR). Proses ekstraksi sampel dilakukan Uji Sitotoksik Ekstrak Etil Asetat Daun

dengan

metoda

maserasi.

Pemilihan

Meranti sabut (Shorea ovalis (Kort.)) dengan

metoda

maserasi

ini

Metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT)

menghindari terjadinya penguraian zat aktif

bertujuan

untuk

Kista udang Artemia salina ditetaskan

yang tidak tahan terhadap pemanasan

dalam wadah pembiakan yang berisi air laut

(9). Hasil maserasi dipekatkan dengan

dan telah dilengkapi dengan aerasi oksigen

rotary evaporator, ekstrak kental etil asetat

dan lampu, digunakan 48 jam setelah

yang diperoleh berjumlah 78 gram dengan

pembentukan

larva.

sebanyak

mL.

uji

dikalibrasi

rendemen

Pengujian

dilakukan

dan berbau khas. Komponen-komponen

dengan konsentrasi 100, 10,dan 1µg/mL.

senyawa kimia yang terkandung didalamnya

Sebanyak 40 mg sampel uji dilarutkan

dipisahkan menggunakan kromatografi lapis

dalam 4 mL etanol dan didapatkan larutan

tipis (KLT). Pengamatan dilakukan dibawah

induk sampel uji dengan konsentrasi 10.000

lampu UV 254 nm dan UV 366 nm (14,15).

5

Vial

(3%)

berwarna

hijau

pekat

μg/mL. Dari larutan induk tersebut dipipet

Pemisahan atau isolasi ekstrak etil

sebanyak 0,5 mL dan ditambahkan pelarut

asetat daun Shorea ovalis (Kort) dilakukan

etanol sampai 5 mL hingga diperoleh larutan

dengan kromatografi kolom sebanyak 3

dengan

Dari

g menggunakan silika gel sebagai fase

larutan konsentrasi 1000 µg/mL, kemudian

diamnya. Ekstrak kemudian dipreabsorsi

diencerkan hingga diperoleh konsentrasi

bersama silika gel hingga kering berbentuk

100 µg/mL, 10 μg/mL, 1 μg/mL (11,12).

serbuk dan mudah dituangkan ke dalam

konsentrasi

1000

µg/mL.

Dari masing-masing konsentrasi dipipet

kolom yang sudah berisi silika. Elusi yang

0,5 mL, dibiarkan pelarut menguap, dilarutkan

digunakan

kembali dengan 50 µl DMSO, selanjutnya

bertingkat atau Step Gradient Polarity (SGP).

ditambahkan

sampai

Dari hasil kromatografi kolom ditampung

Dimasukkan

dalam vial dan dibiarkan menguap. Diperoleh

masing-masing

sebanyak 279 vial, kemudian dimonitor

vial sebanyak 10 ekor. Kemudian masing-

dengan KLT yang dilakukan penotolan dari

masing dibuat dalam 3 vial. Kematian larva

setiap vial dengan jarak 3-5. Pola nodanya

udang diamati setelah 24 jam. Dari data yang

diamati dibawah lampu UV. Fraksi yang

dihasilkan dihitung LC50 dengan metode

memilki Rf atau pola noda yang sama

kurva dan menggunakan tabel probit (11,12).

digabung sehingga didapatkan 15 fraksi

Untuk kontrol, 50 μl DMSO dipipet

gabungan yang hasilnya ini dimonitoring

kedalam vial uji, ditambahkan air laut sampai

kembali dengan KLT, 15 fraksi gabungan

mencapai batas kalibrasi, dimasukkan larva

tersebut diberi label F A hingga F O.

mencapai

dengan

batas

air

laut

kalibrasi.

larva Artemia salina

ke

Artemia salina 10 ekor. Ditambahkan lagi

188

adalah

dengan

kepolaran

Dari pola KLT masing-masing fraksi



| Mora, dkk.

yang diperoleh, memperlihatkan adanya

selanjutnya senyawa murni IA dilakukan

senyawa yang memberikan pemisahan pola

pengujian dengan KLT memakai beberapa

noktah yang bagus. Fraksi I (vial 30-39)

sistem eluen dan didapatkan satu noktah

memperlihatkan pola noda yang terpisah

maka senyawa tersebut bisa dikatakan

sempurna pada KLT, dimana terdapat noktah

sudah murni.

utama yang bulat, yang terpisah baik, dan

Senyawa

murni

IA

dilakukan

uji

memiliki Rf yang ideal, dan juga memperlihat

spektrofotometer UV-Vis namun senyawa

adanya butiran-butiran kristal pada dinding

tidak

vial sehingga pengerjaan difokuskan pada

maksimum, hal ini dimungkinkan karena tidak

fraksi I. Kristal pada fraksi I ini kemudian

adanya gugus kromofor yang terkandung

dimurnikan

rekristalisasi

pada senyawa ini. Selanjutnya dilakukan

menggunakan pelarut n-heksana dan etil

karakterisasi dengan spektrum infra merah

asetat agar terpisah dari pengotornya.

memperlihatkan adanya regangan O-H dan

dengan

cara

memberikan

spektrum

serapan

Hasil rekristalisasi didapatkan senyawa

muncul pada daerah 3344 cm-1 berupa peak

murni IA sebanyak 17,8 mg. Senyawa

yang khas untuk regangan gugus hidroksil.

murni IA dilakukakn pengujian titik leleh

Adanya atom O yang terikat dengan atom

dan pengujian KLT dengan beberapa eluen

H didukung oleh peak pada bilangan

yang berbeda. Selanjutnya senyawa murni

gelombang 1040 cm-1 yang merupakan

IA dikarakterisasi secara organoleptis dan

gugus C-O. Bilangan gelombang 3086

spektrofotometri UV, IR dan NMR. Senyawa

cm-1 menunjukkan intensitas peak sedang

murni IA yang diperoleh dilakukan uji titik

yang berasal dari regangan =CH alkena,

leleh dengan menggunakan alat Melting

sedangkan pada bilangan gelombang 2963-

point apparatus diperoleh nilai titik leleh

2848 cm-1 merupakan CH alifatis (16,17).

135-137oC.

Suatu

senyawa

dikatakan

Karakterisasi

senyawa

murni

IA

murni salah satunya apabila selisih harga

menggunakan spektroskopi NMR meliputi

titik lelehnya kecil atau sama dengan 2 C

1H-NMR, 13C-NMR, HSQC dan HMBC.

o

Gambar 2. Hasil KLT kristal senyawa IA dengan pereaksi Lieberman-Bourchard


189


| Mora, dkk.

Dari Spektrum 1H-NMR senyawa IA, terlihat

sama lainnya yang merupakan spesifik dan

bahwa pada pergeseran kimia 5,35 (d)

ciri khas dari senyawa golongan terpenoid.

memiliki intensitas 1H yang merupakan H

Analisa spektrofotometri 13C-NMR dari

dari metin(CH) Dan δH 3,52(s) memiliki 1H

senyawa IA memperlihatkan adanya 27

dari (C-OH), δH 2,30(m) memiliki 2H dari

puncak dari atom karbon yang muncul pada

metilen (CH2); δH 2,02(m) 4H dari 2(CH2);

pergeseran kimia 140,8; 121,7; 71,8; 56,8;

δH 1,86(m) 6H dari 3(CH2); δH 1,68 (m)

56,1; 50,1; 45,9; 42,3; 39,8; 37,3; 36,5; 36,2;

1H dari (CH); δH 1,56(s) 2H dari (CH2);

34,0; 31,9; 31,7; 29,2; 28,3; 26,1; 24,3; 23,1;

δH 1,49(dtd) 2H dari (CH2); δH 1,35(m) 5H

21,1; 19,8; 19,4; 199,0; 18,8; 12,0 dan 11,9

dari 2(CH2 dan CH); δH 1,25(m) 2H dari

ppm. 27 atom karbon ini terdiri dari satu

(CH2); δH 1,11(m) 1H dari (CH); δH 1,01(s)

atom karbon kuartener jenuh, satu karbon

4H dari (CH3 dan CH); δH 0,92(d) 5H dari

kuartener rangkap dua dan satu karbon

(CH3 dan 2-CH); δH 0,86(m) 9H dari 3

alkena (18,19).

gugus metil (CH3) dan δH 0,86(s) 3H dari

Dari spektrum 13C-NMR senyawa IA

gugus metil (CH3). Pada spektrum 1H-NMR

ini hanya menunjukkan 27 puncak dan

dari senyawa IA memperlihatkan adanya

memberikan pergeseran kimia dari 11,9-

beberapa puncak yang merupakan ciri khas

140,8 ppm. Hal ini kemungkinan disebabkan

dari suatu golongan senyawa seperti: lupeol,

adanya puncak-puncak yang tidak terbaca

lupenon, simiarenol, β-amyrin, β-sitosterol,

ataupun adanya beberapa puncak yang

stigmasterol dan campesterol. Terlihat pada

muncul saling berhimpitan satu sama lain

pergeseran kimia δH 0,0-1,5 ppm memberikan

atau simetris. Oleh karena itu, dilakukan

pola pemisahan puncak yang tidak terpisah

perbandingan-perbandingan analisa data

sempurna dan hampir berdempetan satu

dengan

senyawa

yang

telah

diisolasi

Gambar 3. Spektrum Spektrofotometri Infra Merah Senyawa Murni IA

190



| Mora, dkk.

Dari hasil pengamatan dan analisa pada

sebelumnya. Korelasi antara karbon dan proton

spektrum HSQC senyawa IA, diperoleh data

dari

yang menyatakan bahwa senyawa ini memiliki

pergeseran kimia karbon δC 19,8 ppm

6 atom C primer, 11 atom C-sekunder, 8 atom

dengan δH (0,86/N); δC 19,4 ppm dengan δH

C-tersier dan 2 atom C-kuartener. Sehingga

(1,01/L); δC 19,0 ppm dengan δH (0,86/N);

dapat

δC 18,8 ppm dengan δH (0,92/M); δC 12,0

senyawa ini berjumlah 48 proton. Sedangkan

ppm dengan δH (0,86/N) dan δC 11,9 ppm

spektrum HMBC memperlihatkan hubungan

dengan δH (0,68/O) adalah perpotongan

proton dengan atom karbon tetangga dengan

antara karbon dan proton dari jenis karbon

jarak maksimum 4 ikatan. Berdasarkan

metil (CH3) (20,17).

spektrum senyawa IA dapat dilihat korelasi

selanjutnya

juga

dapat

dianalisa

disimpulkan

jumlah

proton

dari

Gambar 4. Spektrum 1H-NMR Senyawa Murni IA.

Gambar 5. Spektrum 13C-NMR Senyawa Murni IA.


191


| Mora, dkk.

(δH5,35) dengan δC 31,7; 31,9; 36,2; 36,5

dikorelasikan antara atom karbon dengan

dan 42,3. Korelasi selajutnya (δH3,52) tidak

atom proton yang dimiliki oleh atom karbon

menunjukkan hubungan dengan δC. Korelasi

tetangga. Korelasi antara masing-masing

lainnya pada (δH2,30) dengan δC 31,7; 36,5;

tetangga atom karbon dapat dengan mudah

71,8; 121,7 dan 140,8. Selanjutnya (δH2,02)

diinterpretasikan dengan melihat berbagai

tidak menunjukkan Korelasi dengan δC¬.

perpotongan yang terjadi (20). Dilihat dari

Kemudian (δH1,86) dengan δC 71,8 dan

pergeseran kimia δC 140,8 ppm bertetangga

140,8. (δH 1,68) dengan δC 19,0. (δH1,56)

dengan atom karbon yang memiliki proton

memperlihatkan tanpa hubungan dengan

(δH C/ 2,30; E/1,86; L/1,01 ppm). δC

δC. δH 1,49 dengan δC 31,9 .

121,7 bertetangga dengan (δH C/ 2,30);

Hasil

spektrum

HMBC

juga

dapat

δC 71,8 bertetangga dengan (δH C/ 2,30

Gambar 6. HSQC Senyawa Murni IA

Gambar 7. HMBC Senyawa Murni

192



| Mora, dkk.

dan E/1,68); δC 56,8 bertetangga dengan

kematian hewan percobaan sebesar 56,6%,

(δH O/ 0,68); δC 56,1 bertetangga dengan

10 ppm sebesar 40% dan 1 ppm sebesar

(δH M/0,92; O/0,68); δC 50,1 bertetangga

23,3%. Konsentrasi yang menyebabkan

dengan (δH L/ 1,01); δC 45,9 bertetangga

50% kematian hewan percobaan diperoleh

dengan (δH N/ 0,86); δC 42,3 bertetangga

pada nilai Lethal konsentrasi (LC50) sebesar

dengan (δH A/5,35; O/0,68); δC 39,8

40,45ppm. Suatu ekstrak dianggap memiliki

bertetangga dengan (δH O/0,68); δC 37,3

efek positif terhadap kematian larva Artemia

bertetangga dengan (δH L/ 1,01); δC 36,5

salina jika harga LC50 nya <1000 ppm (11).

bertetangga dengan (δH L/1,01; A/5,35;

Disini terlihat bahwa ekstrak etil asetat kulit

C/2,30); δC 36,2 bertetangga dengan (δH

batang meranti sabut (Shorea ovalis Kort.)

K/1,11; M/0,92; A/5,35); δC 34,0 bertetangga

positif sitotoksik terhadap larva Artemia

dengan (δH M/0,92); δC 31,9 bertetangga

salina.

dengan (δH L/1,11; A/5,35; H/1,49); δC 31,7 bertetangga dengan (δH K/1,11; A/5,35; C/ 2,30); δC 29,2

KESIMPULAN

bertetangga dengan (δH

N/0,86; I/1,35; M/0,92); δC 28,3 bertetangga

1. Hasil isolasi fraksi

etil asetat daun


Shorea ovalis (Kort) diperoleh senyawa

dengan (δH I/1,35); δC 24,3 bertetangga

murni IA sebanyak 17.8 mg berupa


kristal jarum berwarna putih, mudah

dengan (δH J/1,25; M/0,92; N/0,86); δC 21,1

larut dalam etil asetat, tidak larut dalam

bertetangga dengan (δH M/0,92; J/1,25);

n-heksan, agak sukar

δC 19,8 bertetangga dengan (δH N/0,86);

metanol, memiliki titik leleh 135-137˚C,

δC 19,4 bertetangga dengan (δH K/1,11);

memberikan perubahan warna merah

δC 19,0 bertetangga dengan (δH M/0,92;

muda

N/0,86; F1,68); δC 12,0 bertetangga dengan

Bourchard,

(δH I/1,35) dan δC 11,9 bertetangga dengan

golongan fitosterol, dan hasil analisa

(δH I/1,35; J/1,25; K/1,11; M/0,92).

spektrofotometri IR, 1H-NMR, 13C-NMR,

Dari analisa data spektro 1H-NMR,

HSQC

dengan

dan

larut dalam

pereaksi

Lieberman-

merupakan

HMBC

senyawa

telah

diperoleh

13C-NMR, HSQC, HMBC dan perbandingan

data yang menyatakan

interpretasi data dengan senyawa hasil

dari ekstrak Etil Asetat meranti Sabut

isolasi yang telah dilaporkan, senyawa

Shorea Ovalis (korth) adalah senyawa

ini memiliki 29 atom carbon dan 48 atom

phytosterol yang memiliki 29 atom

proton dan 1 atom O yang dapat diduga

karbon 48 proton dan 1 atom O.

sebagai

namun

2. Ekstrak etil asetat daun meranti sabut

senyawa

(Shorea ovalis (Kort.) dengan uji BSLT

murni IA secara keseluruhan belum dapat

pada konsentrai 100, 10, dan 1 ppm

disimpulkan struktur lengkapnya, karena

diperoleh nilai LC50 = 40.45 ppm dengan

masih diperlukan data-data penunjang dari

persen kematian hewan uji larva Artemia

spektrum Massa senyawa IA.

salina sebesar 56,6 % dan tergolong

dari

senyawa

hasil

β-sitosterol,

senyawa IA

pembacaan

NMR

Sedangkan dari hasil uji sitotoksik pada

sangat toksik.

konsentrasi uji 100 ppm terjadi persen


193


DAFTAR PUSTAKA

10. Iskandar,

A.,

1990, 1. Ismarti.,

2.

2011,

Isolasi

Triterpenoid

Industri.

Press,Bandung L,B., Jacobsen. D.E., Nicholas, and

(Shorea Singkawang(Miq).Miq), Tesis

Laughin,JL., 1982, Brine Shrimp : A

Pascasarjana

Convenient

Universitas

Andalas,

General

Bioassay

For

Padang.

Active Plant Constituen. J. Of Medical

Hakim, E.H., 2002, Oligostilbenoid dari

Plant Medica. 45, 31-34. 12. Harefa,

F.,

1987,

Pembudidayaan

of the Indonesian Socienty of Natural

Artemia salina untuk Pakar Udang dan

Product Chemistry.2. 1-19.

Ikan, Penerbit Swadaya, Jakarta.

Cronquist, A., 1981, An Integrated

13. Priyanto, 2009, Toksikologi Mekanisme,

System of Classification of Flowering

Terapi Antidotum, dan Penilaian resiko,

Plants, Columbia, University Press,

Penerbit Lembaga Studi dan Konsultasi

New York, 316-318.

Farmakologi (Leskonfi,) Depok.

and

Sutopo

Hadi,

2009,

14. Stahl,

E.,

and

Michigan.,

1985,

The Isolation of α- Viniferin, a Trimer

Analisis Obat Secara Kromatografi dan

Stilbene from Shorea ovalis Blume,

Mikroskopi,Terjemahan Padmawinata,

Modern Apll.Scie., 3(4); 2009.

K, ITB Press, Bandung. 15. Darwis, D., 2000, Teknik

Dasar

Isolation of Hopeaphenol, a Tetramer

Laboratorium

Stilbene from Shorea ovalis Blume,

Senyawa Bahan Alam Hayati, FMIPA,

Advances, in Nat. Apll.Scie., 3(1); 107-

Universitas Andalas, Padang.

6. Sarayobudiyono,

Dalam

Penelitian

16. Sastrohamidjojo, H, 1992, Spektroskopi

112. et

all,

2008,

Oligostilbenoids from Shorea gibbosa andtheir cytotoxic properties agains

Infra

Merah,

Liberty

Yogyakarta,

Yogyakarta. 17. Silverstein, M.R., 1991, Penyidikan

P-388 cells. J. Nat Med. 62. 195-198.

Spektrofotometrik Senyawa Organik.

Harborne, J.B., 1987, Metode Fitokimia

Edisi

Penentuan Cara Modern Menganalisis

Erlangga, Jakarta.

IV,

Terjemahan

Hartomo.

Tumbuhan. Edisi Ke-2. Terjemahan K.

18. Mohrig, R.J., Hammond, N.C., Schatz.,

Padmawinata dan I. Soediro, Penerbit

F.P., and Morrill. C.T. 2003. Techniques

ITB, Bandung.

in Organik Chemistry. W.H. Freeman

Farnsworth, N. R., 1966, Biological and

Company.

Phytochemical Screening of Plants,J. Pharm Sci. 55, 225-276.

19. Pavia., Lampman., and Kriz. 1996. Introduction to Spectroscophy. Second

9. Anonim, 2000, Standarisasi Ekstrak,

194

Kristalisasi,Argo

T.,

Asetat Kulit Batang Meranti Merah

5. Sutopo Hadi dan Noviany, 2009, The

8.

Bantacut,

11. Meyer, B.N.R., Ferrigni, J.E., Putnam

4. Noviany

7.

dan

Dan Uji Antioksidan Dari Fraksi Etil

tumbuhan Dipterocarpaceae. Buletin

3.

| Mora, dkk.

edition. W. B. Saunder, Philadelphia.

Direktorat Jenderal Pengawasan Obat

20. Crews, P., Rodriguez, J. and Jaspars,

dan Makanan, Departemen Kesehatan

M. 1998. Organic Structure Analysis.

Republik Indonesia. Jakarta.

University of California, Santa Cruz.


ISOLASI DAN UJI BSLT EKSTRAK ETIL ASETAT DAUN

Recommend Documents