SKRIPSI STUDI FARMAKOGNOSI RIMPANG DAN UJI AKTIVITAS

ADLN - Perpustakaan Universitas Airlangga

SKRIPSI

STUDI FARMAKOGNOSI RIMPANG dan UJI AKTIVITAS ANTIMIKROBA MINYAK ATSIRI RIMPANG LENGKUAS ( Alpinia galanga L )

UTAMI KHOERUNNISA

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS AIRLANGGA DEPARTEMEN FARMAKOGNOSI DAN FITOKIMIA SURABAYA 2015

SKRIPSI

STUDI FARMAKOGNOSI RIMPANG... UTAMI KHOERUNNISA


SKRIPSI



SKRIPSI


UTAMI KHOERUNNISA 051111229

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS AIRLANGGA DEPARTEMEN FARMAKOGNOSI DAN FITOKIMIA SURABAYA 2015

i SKRIPSI



LEMBAR PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH

Untuk perkembangan ilmu pengetahuan, dengan ini saya menyetujui skripsi/karya ilmiah saya, dengan judul: STUDI FARMAKOGNOSI RIMPANG dan UJI AKTIVITAS ANTIMIKROBA MINYAK ATSIRI RIMPANG LENGKUAS ( Alpinia galanga L ) Untuk dipublikasikan atau ditampilkan di internet atau media lain yaitu

digital

library

Perpustakaan

Universitas

Airlangga

untuk

kepentingan akademik sebatas sesuai dengan Undang-Undang Hak cipta. Demikian pernyataan persetujuan publikasi skripsi/karya ilmiah ini saya buat dengan sebenarnya.

Surabaya, 14 Agustus 2015

Utami Khoerunnisa NIM 051111229

ii SKRIPSI



LEMBAR PERNYATAAN

Saya yang bertanda tangan dibawah ini, Nama

: Utami Khoerunnisa

NIM

: 051111229

Fakultas : Farmasi Dengan ini menyatakan dengan sesungguhnya bahwa hasil skripsi/ tugas akhir yang saya tulis dengan judul : STUDI FARMAKOGNOSI RIMPANG dan UJI AKTIVITAS ANTIMIKROBA MINYAK ATSIRI RIMPANG LENGKUAS ( Alpinia galanga L ) Adalah benar merupakan hasil karya saya sendiri. Apabila dikemudian hari diketahui bahwa skrpsi ini menggunakan data fiktif atau hasil dari plagiarisme, maka saya bersedia menerima sanksi berupa pembatalan kelulusan dan atau pencabutan gelar yang saya peroleh. Demikian surat pernyatan ini saya buat untuk dipergunakan sebagaimana semestinya. Surabaya, 14 Agustus 2015

Utami Khoerunnisa

iii SKRIPSI



Lembar pengesahan


SKRIPSI Dibuat untuk Memenuhi Syarat Mencapai Gelar Sarjana Farmasi Pada Fakultas Farmasi Universitas Airlannga 2015

Oleh : UTAMI KHOERUNNISA NIM : 051111229

Disetujui Oleh :

Pembimbing Utama

Pembimbing serta

Prof. Dr. Mangestuti Agil, Apt.,MS

Neny Purwitasari, S. Farm., M.Sc

NIP. 19500422 198002 2 001

NIP. 19800419 200604 2 001

iv SKRIPSI



KATA PENGANTAR Puji syukur ke hadirat Allah SWT karena dengan rahmat dan ridho Nya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “STUDI FARMAKOGNOSI ANTIMIKROBA

RIMPANG MINYAK

dan

ATSIRI

UJI

RIMPANG

AKTIVITAS LENGKUAS

( Alpinia galanga L )”, untuk memenuhi syarat memperoleh gelar sarjana farmasi pada fakultas farmasi Universitas Airlannga. Dalam penyusunan naskah penulis telah memperoleh bantuan dari berbagai

pihak.

Sehingga,

pada

kesempatan

ini

penulis

ingin

menyampaikan rasa terima kasih yang tak terhingga atas kesempatan, bimbingan, doa, dukungan, kerjasama, bantuan dan ilmu yang telah dibagikan kepada : 1.

Prof. Dr. Mangestuti Agil, Apt., M.S., selaku pembimbing utama

2.

Neny Purwitasari, S. Farm., M.Sc, selaku pembimbing serta

3.

Yuni Priyandani, S.Si., Apt., Sp.FRS, selaku dosen wali

4.

Dr. Achmad Fuad H., M.S. Dan Dr. Aty Widyawaruyanti, M.Si., selaku dosen penguji

5.

Dekan Fakultas Farmasi Universitas Airlangga

6.

Ketua Departemen Farmakognosi dan Fitokimia Fakultas Farmasi Universitas Airlangga

7.

Staf pengajar Fakultas Farmasi Universitas Airlangga

8.

Staf Unit Layanan Pengujian Fakultas Farmasi Universitas Airlangga

9.

Seluruh staf laboratorium di Departemen Farmakognosi dan Fitokimia Fakultas Farmasi Universitas Airlangga

10. Seluruh staf laboratorium di Departemen Kimia Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Airlangga v SKRIPSI



11. Ibunda Rohimah, Ayahanda Tarjudin dan keluarga besar 12. Rekan mahasiswa angkatan 2011 13. Semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi pengembangan ilmu pengetahuan khususnya pada bidang kefarmasian. Surabaya, 14 Agustus 2015

vi SKRIPSI



RINGKASAN STUDI FARMAKOGNOSI RIMPANG dan UJI AKTIVITAS ANTIMIKROBA MINYAK ATSIRI RIMPANG LENGKUAS ( Alpinia galanga L ) Utami Khoerunnisa Alpinia galanga berasal dari Famili Zingiberaceae. Famili ini tersebar luas pada daerah tropis khususnya daerah Asia Tenggara (Habsah, 1999). Tumbuhan ini mudah ditemukan di hutan, (Paliwal, 2014). Pada pengobatan tradisional Cina tumbuhan ini digunakan untuk menghilangkan sakit perut, mengobati flu (Srividya et al., 2010). Rimpang dan bunga dari tumbuhan ini juga digunakan untuk penambah rasa pada masakan Asia. Rimpang muda dari tumbuhan ini sering digunakan untuk masakan Thailand (Wei et al., 2010). Minyak atsiri dan ekstrak dari rimpang ini telah dipelajari secara luas dan terbukti sebagai antijamur, antimikroba, antiamoeba, antioksidan (Wei et al., 2010). Berdasarkan beberapa penelitian tersebut sehingga dilakukan penelitian ini yang bertujuan untuk membantu memastikan kualitas, keamanan, mutu. Studi farmakognosi meliputi anatomi dan morfologi, skrining fitokimia, dan parameter fisikokimia. Selain itu dilakukan penelitian mengenai uji aktivitas antimikroba dari minyak atsiri. Untuk mendapatkan data anatomi dan morfologi dilakukan pemeriksaan berupa studi makroskopik dan mikroskopik. Skrining fitokimia dilakukan untuk mengetahui golongan senyawa yang terkandung dalam tumbuhan ini. Parameter fisiko-kimia meliputi parameter sari larut dalam pelarut tertentu, penetapan kadar minyak atsiri, susut pengeringan, penetapan kadar air, dan parameter kadar abu. Uji aktivitas bertujuan untuk menguji kemampuan minyak atsiri tersebut dilakukan dengan melihat daya hambat minyak atsiri terhadap Staphylococcus aureus, Eschericia coli dan jamur Candida albicans. Hasil yang didapat dari pengamatan makroskopis adalah rimpang mempunyai panjang hingga 12 cm, dengan lebar dapat mencapai 2 cm, berbentuk silindris, mempunyai bentuk rimpang yang bermacam-macam. Pada pengamatan irisan melintang secara mikroskopis didapatkan epidermis, parenkim korteks, sel sekresi berisi minyak atsiri, endodermis, butir pati, serabut sklerenkim dan berkas pembuluh tipe kolateral. Pada hasil skrining didapatkan senyawa golongan flavonoid dan terpenoid. Untuk nilai fisikokimia didapatkan pada penetapan kadar sari yang larut dalam air (33,1228± 0.6608) %, kadar sari yang larut dalam etanol (16,9611± 0.3599) %, penetapan kadar minyak atsiri 0,35%v/b, vii SKRIPSI



penetapan susut pengeringan (14,3990 ± 0,1720) %, penetapan kadar abu (7,5285± 0,1623) %, penetapan kadar abu larut tidak larut asam (2,9255± 0,1157) %, penetapan kadar abu larut air (2.9720± 0.0328) %. Uji aktivitas antimikroba didapatkan bahwa minyak atsiri dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan jamur Candida albicans.

viii SKRIPSI



ABSTRACT PHARMACOGNOSTIC STUDY OF RHIZOME AND ANTIMICROBIAL ACTIVITY FROM ESSENTIAL OIL Alpinia galanga L RHIZOME Utami Khoerunnisa Alpinia galanga belongs to Family Zingiberaceae. The Zingiberaceae is among are widely distributed throughout the tropics particulary southeast Asia. The rhizome has been used as a traditional medicine in China for relieving stomach ache, treating cold. In addition, its rhizome and flowers are popular additions to Asian cuisine. The young rhizome of galangal are often used in Thai cooking for their pungently sweet, peppery, ginger-like flavor. The essential oils and extracts of greater galangal rhizome have been studied extensively and have been proven to exhibit antifungal, antimicrobial, antiamoebic and antioxidant activities. Morphology and anatomy data were obtained through macroscopic and microscopic characteristic observation. The result showed macroscopic dimension, length 7-12 cm(s); weight 2-3 cm(s); shape cylindrical; present rootlets and then microscopic they are epidermis; cortex; starch; vascular bundle, endodermis, sclerenchym bundle; secretion cell consist of essential oil. The phytochemical screening shows the presence of flavonoid and terpenoid in Alpinia galanga L. The physicochemical value are water soluble substances (33.1228± 0.6608) %, alcohol soluble substances (16.9611± 0.3599) %, the yield of essential oil 0.35 %v/b, loss on drying (14.3990 ± 0.1720) %, ash value (7.5285± 0.1623) %, ash insoluble acid (2.9255± 0.1157) %, ash soluble water (2.9720± 0.0328) %. Antimicrobial activity of essential oil showed to inhibit Staphylococcus aureus and Candida albican with MIC value 0.06% v/v and 0.093% v/v. Keyword (s) : Alpinia galanga L, morphology & anatomy, phytochemical screening, physicochemical constant, antimicrobial activity.

ix SKRIPSI



DAFTAR ISI HALAMAN JUDUL.................................................................................................

i

LEMBAR PERSETUJUAN PUBLIKASI ILMIAH................................................

ii

LEMBAR PERNYATAAN.......................................................................................

iii

LEMBAR PENGESAHAN......................................................................................

iv

KATA PENGANTAR...............................................................................................

v

RINGKASAN...........................................................................................................

vii

ABSTRACT..............................................................................................................

ix

DAFTAR ISI.............................................................................................................

x

DAFTAR TABEL.....................................................................................................

xiv

DAFTAR GAMBAR................................................................................................

xv

DAFTAR LAMPIRAN............................................................................................

xvi

BAB I PENDAHULUAN........................................................................................

1

1.1 Latar Belakang...........................................................................................

1

1.2 Rumusan Masalah......................................................................................

3

1.3 Tujuan Penelitian........................................................................................

3

1.4 Manfaat Penelitian......................................................................................

4

BAB II TINJAUAN PUSTAKA...............................................................................

5

2.1 Tinjauan tentang Alpinia galanga L. Willd.................................................

5

2.1.1 Klasifikasi...........................................................................................

5

2.1.2 Nama Daerah.........................................................................................

6

2.1.3 Morfologi Tanaman..............................................................................

6

2.1.4 Ekologi dan Penyebaran........................................................................

6

2.1.5 Kandungan Metabolit............................................................................

6

2.1.6 Kegunaan Tanaman...............................................................................

7

2.2 Tinjauan tentang Pengamatan Maksroskopis...............................................

8

2.3 Tinjauan tentang Pengamatan Mikroskopis.................................................

8

2.4 Tinjauan tentang Pengamatan Simplisia......................................................

8

SKRIPSI

x



2.5 Tinjauan tentang Ekstrak..............................................................................

9

2.5.1 Definisi Ekstrak.....................................................................................

9

2.5.2 Proses Pembuatan Ekstrak....................................................................

9

2.5.3 Metode Ekstraksi...................................................................................

10

2.6 Tinjauan tentang Maserasi........................................................................

12

2.7 Tinjauan tentang Skrining Fitokimia.........................................................

12

2.8 Tinjauan tentang Fisikokimia....................................................................

13

2.9 Tinjauan tentang Destilasi.........................................................................

14

2.10 Tinjauan tentang Minyak Atsiri..................................................................

14

2.11 Tinjauan tentang GC-MS...........................................................................

14

2.12 Tinjauan tentang Mikroba..........................................................................

15

2.13 Tinjauan tentang Cara Penentuan Efek Antimikroba.................................

17

2.14 Tinjauan tentang Antibiotik........................................................................

18

BAB III KERANGKA KONSEPTUAL....................................................................

19

BAB IV METODE PENELITIAN............................................................................

21

4.1 Bahan Penelitian.......................................................................................

21

4.1.1 Tanaman................................................................................................

21

4.1.2 Bahan....................................................................................................

21

4.2 Alat Penelitian...........................................................................................

21

4.3 Pengamatan Morfologi..............................................................................

22

4.4 Pengamatan Anatomi ...............................................................................

22

4.5 Pengamatan Organoleptis..........................................................................

22

4.6 Skrining Fitokimia Ekstrak.......................................................................

22

4.6.1 Pemeriksaan Alkaloid...........................................................................

22

4.6.2 Pemeriksaan Saponin............................................................................

23

4.6.3 Pemeriksaan Flavonoid.........................................................................

25

4.6.4 Pemeriksaan Tanin................................................................................

26

4.6.5 Pemeriksaan Glikosida Jantung............................................................

27

SKRIPSI

xi



4.6.5 Pemeriksaan Glikosida Antrakuinon.....................................................

27

4.7 Parameter Fisiko-Kimia............................................................................

28

4.7.1 Penentuan Parameter Sari Larut dalam Pelarut Tertentu......................

28

4.7.2 Kadar Total Golongan Kandungan Kimia.............................................

29

4.7.3 Susut Pengeringan.................................................................................

30

4.7.4 Parameter Kadar Abu............................................................................

31

4.8 Destilasi dan Sifat Fisika Minyak Atsiri...................................................

31

4.9 Uji Aktivitas Antimikroba.........................................................................

32

4.10 Kerangka Penelitian.................................................................................

37

BAB V HASIL PENELITIAN...................................................................................

39

5.1 Pemeriksaan Morfologi.............................................................................

39

5.2 Pemeriksaan Anatomi...............................................................................

42

5.2.1 Pengamatan Irisan Melintang..................................................................

42

5.2.2 Pengamatan Fragmen Serbuk..................................................................

44

5.3 Pengamatan Organoleptis..........................................................................

48

5.4 Skrining Fitokimia....................................................................................

48

5.5 Parameter Fisiko-Kimia............................................................................

52

5.5.1 Penetapan Kadar Sari Yang Larut Dalam Air..........................................

52

5.5.2 Penetapan Kadar Sari Yang Larut Dalam Etanol....................................

53

5.5.3 Penetapan Kadar Minyak Atsiri..............................................................

53

5.5.4 Penetapan Susut Pengeringan.................................................................

54

5.5.5 Penetapan Kadar Abu..............................................................................

55

5.5.6 Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Asam................................................

56

5.5.7 Penetapan Kadar Abu Larut Dalam Air...................................................

56

5.6 Destilasi Minyak atsiri..............................................................................

57

5.7 Uji Kandungan Minyak Atsiri menggunakan GC-MS..............................

58

5.8 Uji Aktivitas Antimikroba.........................................................................

61

BAB VI PEMBAHASAN..........................................................................................

64

SKRIPSI

xii



BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN..................................................................

73

DAFTAR PUSTAKA.................................................................................................

75

LAMPIRAN...............................................................................................................

80

SKRIPSI

xiii



DAFTAR TABEL

5.1 pengamatan morfologi secara makroskopis .................................................

39

5.2 pengamatan organoleptis...............................................................................

48

5.3 berat bahan dan ekstrak rimpang laos............................................................

48

5.4 skrining fitokimia ekstrak etanol 96% rimpang Alpinia galanga...................

51

5.5 Penetapan kadar sari yang larut dalam air......................................................

52

5.6 penetapan kadar sari yang larut dalam etanol.................................................

53

5.7 penetapan kadar minyak atsiri........................................................................

54

5.8 penetapan susut pengeringan..........................................................................

54

5.9 penetapan kadar abu.......................................................................................

55

5.10 penetapan kadar abu tidak larut asam..........................................................

56

5.11 penetapan kadar abu larut air.......................................................................

57

5.12 komponen minyak atsiri Alpinia galanga....................................................

59

5.13 aktivitas antijamur C.albicans......................................................................

62

5.14 aktivitas antibakteri E.coli...........................................................................

62

5.15 aktivitas antibakteri S.aureus.....................................................................

63

SKRIPSI

xiv



DAFTAR GAMBAR Gambar 2.1 Rimpang Alpinia galanga...............................................................

5

Gambar 3.1 Skema kerangka konsep..................................................................

20

Gambar 4.1 Skema pembuatan larutan uji..........................................................

35

Gambar 4.2 Skema kerangka penelitian...........................................................

38

Gambar 5.1 Rimpang Alpinia galanga................................................................

39

Gambar 5.2 Lebar Rimpang saat dipotong Melintang........................................

40

Gambar 5.3 rimpang saat dipotong melintang....................................................

40

Gambar 5.4 serabut kasar pada rimpang.............................................................

40

Gambar 5.5 simplisia rimpang............................................................................

41

Gambar 5.6 serbuk rimpang................................................................................

41

Gambar 5.7 pengamatan mikroskopis................................................................

42


43


43

Gambar 5.10 pengamatan mikroskopis..............................................................

44

Gambar 5.11 epidermis dan jaringan gabus........................................................

45

Gambar 5.12 parenkim dengan sel minyak.......................................................

45

Gambar 5.13 butir amilum..................................................................................

46

Gambar 5.14 korteks dengan butir amilum........................................................

46

Gambar 5.15 fragmen serabut sklerenkim..........................................................

47

Gambar 5.16 fragmen xylem dengan penebalan tangga.....................................

47

Gambar 5.17 pemeriksaan Flavonoid dengan reaksi warna...............................

49

Gambar 5.18 kromatogram golongan flavonoid.................................................

50

Gambar 5.19 kromatogram golongan terpenoid.................................................

50

Gambar 5.20 profil kromatogram GC-MS minyak atsiri...................................

58

SKRIPSI

xv



DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1. Surat identifikasi ...........................................................................

81

Lampiran 2. Sertifikat bakteri E.coli...................................................................

82

Lampiran 3. Sertifikat bakteri S.aureus...............................................................

83

Lampiran 4. Sertifikat jamur C. albicans.............................................................

84

Lampiran 5. Skema pembuatan larutan uji terhadap C.albicans..........................

85

Lampiran 6. Skema pembuatan larutan uji terhadap E.coli..................................

86

Lampiran 7. Skema pembuatan larutan uji terhadap S.aureus .............................

87

Lampiran 8. Foto hasil uji aktivitas......................................................................

88

Lampiran 9. Hasil GC-MS minyak atsiri.............................................................

97

SKRIPSI

xvi



1

BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang Indonesia

merupakan

negara

kepulauan

yang

memiliki

kekayaan alam yang sangat melimpah, salah satu contoh adalah keanekaragaman tanaman berkhasiat yang digunakan sebagai preventif dan kuratif oleh masyarakat Indonesia berdasarkan pengalaman yang diwariskan secara turun temurun, sehingga tanaman berkhasiat tersebut memiliki potensi yang cukup besar untuk dimanfaatkan terutama dalam bidang kesehatan. Salah satu yang biasa dipakai oleh masyarakat adalah Alpinia galanga (L) atau biasa disebut dengan sebutan lengkuas. Alpinia galanga berasal dari Famili Zingiberaceae. Famili ini tersebar luas pada daerah tropis khususnya daerah Asia Tenggara (Habsah, 1999). Tumbuhan ini mudah di hutan, (Paliwal, 2014). Pada pengobatan tradisional Cina tumbuhan ini digunakan untuk menghilangkan sakit perut, mengobati flu (Srividya et al., 2010). Rimpang dan bunga dari tumbuhan ini juga digunakan untuk penambah rasa pada masakan Asia. Rimpang muda dari tumbuhan ini sering digunakan untuk masakanan Thailand (Wei et al., 2010) di Indonesia sendiri rimpang ini juga digunakan sebagai bumbu dapur. Minyak atsiri dan ekstrak dari rimpang ini telah dipelajari secara luas dan terbukti sebagai antijamur, antimikroba, antiamoeba, antioksidan (Wei et al., 2010). Berbagai penelitian telah dilakukan untuk mengungkapkan sisi ilmiah dari tumbuhan ini meskipun secara empiris tumbuhan ini memiliki banyak khasiat. Rimpang Alpinia galanga (A. galanga) mempunyai aktivitas antibakteri terhadap Staphylococcus aureus (Aree et al., 2005 ; Chan et al., 2011). Ekstrak etanol A. galanga secara signifikan sebagai antioksidan dan antidiabet pada model in vitro dan in vivo (Srividya et al., SKRIPSI



2

2010). Biji A. galanga mengandung senyawa-senyawa diterpen yang bersifat sitotoksik dan antifungal (Morita & Itokawa, 1988). Dengan berbagai khasiat dan penelitian yang telah diuraikan diatas rimpang A. galanga mempunyai potensi untuk dikembangkan menjadi produk herbal. Dalam pengembangan produk herbal harus memenuhi

persyaratan

yang

telah

ditetapkan

oleh

Pemerintah.

Persyaratan tersebut ditetapkan untuk menjamin dari segi keamanan, mutu, dan kualitas. Famili Zingiberaceae merupakan primadona untuk diteliti karena mudah dibudidayakan dan mudah tumbuh, di Indonesia sendiri Suku Zingiberaceae banyak ditemukan serta banyak khasiat yang terkandung didalamnya. Juga merupakan ciri dari Famili Zingiberaceae adalah dari minyak atsiri sehingga dilakukan juga uji aktivitas antimikroba minyak atsiri dari rimpang A. galanga. Tahun 2015 akan dilaksanakan Masyarakat Ekonomi ASEAN (MEA) yang berdampak pada aliran bebas barang bagi negara-negara ASEAN, dampak arus bebas jasa, dampak arus bebas investasi, dampak arus tenaga kerja terampil, dan dampak arus bebas modal. Dari fakta-fakta yang telah di uraikan di atas diperlukan studi farmakognosi dari rimpang A. galanga dan uji aktivitas antimikroba dari minyak atsiri rimpang A. galanga karena minyak atsiri merupakan ciri khas dari famili Zingiberaceae seperti yang telah dipaparkan diatas. Hasil yang didapat dari penelitian ini dapat dijadikan evaluasi apakah rimpang A. galanga memenuhi standar seperti yang telah ditetapkan oleh Pemerintah dalam buku resmi nya yaitu Farmakope Herbal Indonesia dan Materia Medika Indonesia, juga dapat dijadikan peluang oleh industri besar maupun kecil untuk mengembangkan produk herbal dari rimpang A. galanga. Studi farmakognosi meliputi data anatomi dan morfologi untuk menjamin keaslian bahan baku dan untuk mengidentifikasi kebenaran dari SKRIPSI



3

serbuk simplisia agar terhidar dari pemalsuan. Untuk mendapatkan data anatomi dan morfologi dilakukan penelitian berupa studi makroskopik dan mikroskopik. Fitokimia dilakukan untuk mengetahui golongan senyawa yang terkandung dalam tumbuhan ini. Juga parameter fisiko-kimia yang meliputi parameter sari larut dalam pelarut tertentu, penetapan kadar minyak atsiri, susut pengeringan, penetapan kadar air, dan parameter kadar abu, dan uji aktivitas antimikroba. Uji aktivitas ini dilakukan dengan menggunakan minyak atsiri yang telah didestilasi dari rimpang A. galanga, untuk menguji kemampuan minyak atsiri tersebut dilakukan dengan melihat daya hambat minyak atsiri terhadap bakteri gram positif, gram negatif dan jamur. Penelitian ini diharapkan dapat dijadikan ukuran dalam kontrol kualitas dari produk herbal untuk menjamin kualitas juga untuk mengetahui aktivitas antimikroba minyak atsiri dari rimpang lengkuas. 1.2 Rumusan Masalah 1.

Apakah rimpang dari A. galanga pada penelitian ini memenuhi standar kualitas

2.

yang ditetapkan oleh MMI

Apakah minyak atsiri dari rimpang A. galanga mempunyai kemampuan untuk menghambat S. aureus, E. Coli dan Candida albican

1.3 Tujuan Penelitian 1.

Tujuan umum

A.

Mendapatkan nilai dari parameter yang terdapat dalam studi farmakognosi yang dapat digunakan sebagai kontrol kualitas bahan baku untuk menjamin keaslian dan standar dari bahan baku.

B.

Melakukan uji aktivitas minyak atsiri rimpang A. galanga terhadap daya hambat bakteri S. aureus, E. coli dan jamur Candida albican. SKRIPSI



4

2.

Tujuan Khusus

A.

Melakukan pengamatan anatomi rimpang A. galanga

B.

Menetapkan kadar abu total, kadar abu tidak larut asam, kadar abu larut air, susut pengeringan, kadar sari yang larut air dan etanol, kadar (% rendemen) minyak atsiri dari serbuk simplisia rimpang A. galanga

C.

Melakukan skrining fitokimia ekstrak etanol 96% dari rimpang A. galanga dengan reaksi warna dan kromatografi lapis tipis (KLT).

D.

Melakukan analisis komponen minyak atsiri dari rimpang A. galanga menggunakan kromatografi gas – spektrofotometri massa (GC-MS).

E.

Menentukan konsentrasi hambat minimal minyak atsiri rimpang A. galanga

terhadap

Candida

albicans,

Eschericia

coli,

dan

Staphylococcus aureus. 1.4 Manfaat Penelitian Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi mengenai studi farmakognosi yang terdiri dari ciri-ciri anatomi dan morfologi, golongan senyawa yang terkandung, nilai fisiko-kimia, dan juga aktivitas minyak atsiri sebagai antimikroba pada rimpang Alpinia galanga sebagai langkah dalam pemanfaatannya di bidang kesehatan.

SKRIPSI



5

BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Tinjauan tentang Alpinia galanga L. Willd 2.1.1. Klasifikasi Divisi

:

Spermatophyta

Sub Divisi

:

Angiospermae

Kelas

:

Monocotyledonae

Bangsa

:

Zingiberales

Suku

:

Zingiberaceae

Marga

:

Alpinia

Jenis

:

Alpinia galanga L. Willd

Sinonim

:

Languas galanga L. Merr, Alpinia pyramidata BI, Alpinia officinarum Hance, Languas galanga L. Stunz, Languas vulgare Koenig, Maranta galanga L., Amomum galanga L. Lour, Amomum medium ( Heyne,1987 ;Backer,1968;Sinaga,2005)

Gambar 2.1 Rimpang Alpinia galanga

SKRIPSI



6

2.1.2. Nama daerah Lengkueus

(Gayo),Langkueueh

(Aceh),Kelawas

(Karo),

Halawas (Simalungun), Lakuwe (Nias), Lengkuas (Melayu), Langkuweh (Minang), Lawas (Lampung), Laja (Sunda), lengkuas (Jawa, Madura), Langkuwas, Laus ( Banjar), Laja, Langkuwasan, Lahwas, Isem (Bali), Laja, Langkuwasa (Makassar), Aliku (Bugis), Lingkuwas ( Menado), Likui, Lingkuboto (Gorontalo), Laawasi lawasi (Ambon), Lawase, Lakwase,

Kourola

(Seram),

Galiasa,

Galiaha,

Waliasa

(Ternate,Halmahera), Langkwas (Roti), Hingkuase (Sangihe), Langkuwas ( Basemah), Laawasi, Lawasi (Alfuru), Lauwasel (Saparua), Langoase (Buru) (Depkes RI, 1978). 2.1.3. Morfologi Tanaman Tinggi tanaman dapat tumbuh sampai 3 meter. Rimpangnya (diameter 2-4 cm) adalah bercabang, kuning cerah, berserabut dan harum. Daunnya berseling, berbentuk lanset, bundar memanjang, ujung tajam, berambut sangat halus atau kadang-kadang tidak berambut. Bunga terdapat diujung batang, berwarna putih dang harum (Depkes RI, 1978 ; Chan et al, 2011). 2.1.4. Ekologi dan Penyebaran Tumbuh di seluruh Indonesia, Asia Tenggara, di bawah kaki pegunungan Himalaya sebelah timur hingga laut Cina dan India barat daya di antara Chats dan Lautan Indonesia. Di Jawa tumbuh liar di hutan, semak belukar, umumnya di tanam d itempat yang terbuka. Tumbuh pada ketinggian tempat sampai 1.200 m diatas permukaan laut (Depkes RI, 1978). 2.1.5. Kandungan Metabolit Rimpang lengkuas mengandung lebih kurang 1% minyak atsiri berwarna kuning kehijauan yang terutama terdiri dari metil-sinamat 48%, sineol 20%-30%, eugenol, kamfer 1%, seskuiterpen, δ-pinen, galangin, SKRIPSI



7

dan lain-lain. Selain itu rimpang juga mengandung resin yang disebut galangol, kristal berwarna kuning yang disebut kaemferida dan galangin, kadinen, heksabidrokadalen hidrat, kuersetin, amilum, beberapa senyawa flavonoid, dan lain-lain. Penelitian yang lebih intensif menemukan bahwa rimpang lengkuas mengandung zat-zat yang dapat menghambat enzim xanthin

oksidase

sehingga

bersifat

sebagai

antitumor,

yaitu

trans-p-kumari diasetat, transkoniferil diasetat, asetoksi chavikol asetat, asetoksi eugenol asetat, dan 4-hidroksi benzaidehida (Norro et al.,1988). Juga dinamakan

mengandung

suatu

senyawa

diarilheptanoid

1-(4-hidroksifenil)-7-fenilheptan-3,5-diol.

Buah

yang

lengkuas

mengandung asetoksichavikol asetat dan asetoksieugenol asetat yang bersifat antiradang dan antitumor (Yu et al.,1988). Juga mengandung kariofilen oksida, kario-filenol, kuersetin-3-metil eter, isoramnetin, kaemferida,

galangin,

galangin-3-metil

eter,

ramnositrin,

dan

7-hidroksi-3,5-dimetoksiflavon. Biji lengkuas mengandung senyawa-senyawa diterpen yang bersifat sitotoksis dan antifungal, yaitu galanal A, galanal B, galanolakton,12-labdiena-15,16-dial,dan 17-epoksilabd-12-ena-15,16-dial (Morita & Itokawa,1988). 2.1.6. Kegunaan Tanaman Pada pengobatan tradisonal Cina tumbuhan ini digunakan untuk menghilangkan sakit perut, mengobati flu (Srividya et al., 2010). Rimpang dan bunga dari tumbuhan ini juga digunakan untuk penambah rasa pada masakan Asia. Rimpang muda dari tumbuhan ini sering digunakan untuk masakanan Thailand (Wei et al., 2010) di Indonesia sendiri rimpang ini juga digunakan sebagai bumbu dapur. Minyak atsiri dan ekstrak dari rimpang ini telah dipelajari secara luas dan terbukti sebagai antijamur, antimikroba, antiamoeba, antioksidan (Wei et al., 2010). Rimpang Alpinia galanga (A. galanga) mempunyai aktivitas SKRIPSI



8

antibakteri terhadap Staphylococcus aureus, (Oonmetta-aree et al., 2005 ; Chan et al., 2011). Ekstrak etanol A. galanga secara signifikan sebagai antioksidan dan antidiabet pada model in vitro dan in vivo (Srividya et al., 2010). 2.2 Tinjauan tentang Pengamatan Makroskopis Pemeriksaan makroskopis adalah pemeriksaan yang dilakukan dengan menggunakan kaca pembesar atau mikroskop binokuler. Cara ini digunakan untuk mencari kekhususan morfologi, ukuran, yang akan diperiksa (Depkes RI, 1987). 2.3 Tinjauan tentang Pengamatan Mikroskopis Pemeriksaan mikroskopis adalah pemeriksaan yang dilakukan dengan menggunakan mikroskop yang derajat pembesarannya diatur sesuai keperluan dan dilengkapi dengan kamera. Pada pemeriksaan mikroskopis dicari unsur-unsur anatomi yang khas. Dari pemeriksaan ini akan diketahui jenis simplisia berdasarkan fragmen pengenal yang spesifik bagi masing-masing simplisia (Depkes RI, 1987). 2.4 Tinjauan tentang Pengamatan Simplisia Simplisia adalah bahan alamiah yang digunakan sebagai obat yang belum mengalami pengolahan apapun juga kecuali dinyatakan lain simplisia merupakan bahan yang telah dikeringkan. Simplisia terdiri dari tiga jenis yaitu simplisia nabati, simplisia hewani, dan simplisia pelikan (mineral) (Depkes RI, 2000). Simplisia nabati adalah simplisia yang berupa tanaman utuh, bagian tanaman atau eksudat tanaman. Yang dimaksud dengan eksudat tanaman yaitu isi sel yang secara spontan keluar dari tanaman atau isi sel yang dengan cara tertentu dikeluarkan dari selnya, atau senyawa nabati lainnya yang dengan cara tertentu dipisahkan dari tanamannya dan belum berupa senyawa kimia murni (Depkes RI, 2000).

SKRIPSI



9

2.5 Tinjauan tentang Ekstrak 2.5.1 Definisi Ekstrak Ekstrak mengekstraksi

adalah

zat aktif

sediaan simplisia

pekat

yang

nabati

diperoleh

dengan

atau simplisia

hewani

menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang tersisa diperlakukan sedemikian hingga memenuhi baku yang telah ditetapkan (Depkes RI, 1995). 2.5.2 Proses Pembuatan Ekstrak Pembuatan ekstrak dilakukan melalui beberapa tahap,yaitu : 1.

Pembuatan serbuk simplisia dan klasifikasinya Proses awal pembuatan simplisia adalah tahapan pembuatan serbuk simplisia kering. Dari simplisia dibuat serbuk simplisia dengan peralatan tertentu sampai derajat kehalusan tertentu (Depkes RI, 2000).

2.

Cairan pelarut Cairan pengekstraksi dalam pembuatan ekstrak adalah pelarut yang baik (optimal) untuk senyawa kandungan yang berkhasiat atau yang aktif, dengan demikian senyawa tersebut dapat dipisahkan dari bahan dan dari senyawa kandungan lainnya, serta ekstrak hanya mengandung sebesar senyawa kandungan yang

diinginkan.

Dalam

hal

metabolit

sekunder

yang

terkandung. Faktor utama untuk pertimbangan dalam pemilihan cairan pengekstraksi adalah selektifitas, kemudahan bekerja dan

proses

dengan

cairan

tersebut,

ekonomis,

ramah

lingkungan dan keamanan (Depkes RI, 2000). 3.

Separasi dan pemurnian Tujuan dari tahapan ini adalah menghilangkan (memisahkan) senyawa yang tidak dikehendaki semaksimal mungkin tanpa

SKRIPSI



10

berpengaruh pada senyawa kandungan yang dikehendaki, sehingga diperoleh ekstrak yang lebih murni. Proses-proses pada tahapan ini adalah pengendapan, pemisahan dua cairan tidak saling campur,sentrifugasi,dekantasi,filtrasi serta proses adsorpsi dan penukaran ion (Depkes RI,2000). 4.

Pemekatan dan penguapan Pemekatan berarti peningkatan jumlah partikel solut (senyawa terlarut) secara penguapan pelarut tanpa sampai menjadi kondisi kering,ekstrak hanya menjadi kental/pekat (Depkes RI,2000)

5.

Pengeringan ekstrak Pengeringan berarti menghilangkan pelarut dari bahan sehingga menghasilkan serbuk, massa kering rapuh, tergantung proses dan peralatan yang digunakan (Depkes RI, 2000).

6.

Rendemen Rendemen adalah perbandingan antara ekstrak yang diperoleh dengan simplisia awal (Depkes RI, 2000).

2.5.3 Metode Ekstraksi 1. Cara Dingin a. Maserasi Maserasi adalah proses pengekstrakan simplisia dengan menggunakan pelarut dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada temperatur ruangan ( kamar ). Secara teknologi termasuk ekstraksi dengan pinsip metode pencapaian konsentrasi pada keseimbangan. Maserasi kinetik berarti dilakuakn

pengadukan

yang

kontinu

(terus-menerus).

Remaserasi berarti dilakukan pengulangan penambahan pelarut setelah

dilakukan

penyaringan

maserat

pertama,

seterusnya. SKRIPSI


dan


b.

11

Perkolasi Perkolasi adalah ekstrak dengan pelarut yang selalu baru sampai sempurna (exhaustive extraction) yng umumnya dilakukan pada temperatur ruangan. Proses terdiri dari tahapan pengembangan bahan, tahap maserasi antara, tahap perkolasi

sebenarnya

(penetapan/penampungan

ekstrak), terus menerus sampai diperoleh ekstrak (perkolat) yang jumlahnya 1-5 kali bahan. 2. Cara Panas a.

Refluks Refluks adalah ekstraksi dengan pelarut pada temperatur titik didihnya, selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif konstan dengan adanya pendingin balik. Umumnya dilakukan pengulangan proses pada residu pertama sampai 3-5 kali sehingga dapat termasuk proses ekstraksi sempurna.

b.

Ekstraksi dengan Soxhlet Soxhlet adalah ekstraksi menggunakan pelarut yang selalu baru yang umumnya dilakukan dengan alat khusus sehingga terjadi ekstraksi kontinu dengan jumlah pelarut relatif konstan dengan adanya pendingin balik.

c.

Digesti Digesti adalah maserasi kinetik (dengan pengaduk kontinu) pada temperatur yang lebih tinggi dari temperatur ruangan (kamar), yaitu secara umum dilakukan pada temperatur 40-50oC.

d.

Pembuatan Infus Infus adalah ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur penangas air (bejana infus tercelup dalam penangas air

SKRIPSI



12

mendidih, temperatur terukur 96-98oC) selama waktu tertentu (15-20 menit). e.

Pembuatan Dekok Dekok adalah infus pada waktu yang lebih lama (≥30oC) dan temperatur sampai titik didih air.

2.6 Tinjauan tentang Maserasi Penelitian ini menggunakan metode ekstraksi cara maserasi dengan pelarut etanol. Maserasi adalah suatu ekstraksi dengan beberapa kali pengocokan atau pemutaran pada suhu kamar, dimana intensitas gerakan sangat lambat sehingga akan terjadi kesetimbangan antara pelarut dengan bahan terlarut. Pada maserasi dilakukan pengadukan karena berat jenis pelarut berbeda dengan berat jenis bahan yang diekstraksi, juga karena adanya pengaruh gaya gravitasi yang akan menyebabkan terjadinya pengendapan. Untuk itu pada maserasi selalu menggunakan pelarut yang baru karena pelarut yang lama sudah setimbang atau jenuh. Maserasi kinetik merupakan maserasi yang dilakukan pada suhu kamar, tetapi bahan berada pada pengadukan yang konstan. Tipe dan intesitas gerakan yang digunakan dalam maserasi kinetik merupakan faktor penting. Maserasi merupakan metode ekstraksi yang paling banyak digunakan dibanding metode ekstraksi lainnya. Keuntungan metode maserasi yaitu hanya menggunakan sedikit sampel. Bahan-bahan obat tertentu mempunyai kandungan lendir yang lebih tinggi, hasilnya akan lebih optimal apabila diekstraksi dengan maserasi. 2.7 Tinjauan tentang Skrining Fitokimia Skrining

fitokimia adalah penelitian

pendahuluan yang

mempunyai tujuan mengetahui golongan senyawa kimia yang terkandung dalam tanaman, biasanya punya aktifitas biologis, secara tepat dan teliti. Metode yang digunakan dalam skrining fitokimia harus memiliki SKRIPSI



13

persyaratan yaitu sederhana, cepat, dan selektif dalam mengidentifikasi golongan senyawa kimia tertentu. Golongan senyawa kimia dapat ditentukan dengan cara reaksi warna, reaksi pengendapan dan metode kromatografi lapis tipis (KLT) (Fong, Tinwa, & Fransworth, 1990). 2.8 Tinjauan tentang Fisiko-Kimia Berdasarkan Farmakope Herbal Indonesia tinjauan mengenai fisiko-kimia meliputi : 1.

Susut Pengeringan Penentuan susut pengeringan adalah pengukuran sisa zat setelah pengeringan pada temperatur 1050C selama 30 menit atau berat konstan, yang dinyatakan sebagai persen. Dalam hal khusus (jika bahan tidak mengandung minyak menguap/atsiri sisa pelarut organik menguap) identik dengan kadar air karena berada di atmosfer/lingkungan udara terbuka. Tujuan dari penentuan ini adalah memberikan batasan maksimal (rentang) tentang besarnya senyawa yang hilang pada proses pengeringan (Depkes RI,2000).

2.

Kadar Abu Bahan dipanaskan pada temperatur dimana senyawa organik dan turunannya terdestruksi dan menguap sehingga tinggal unsur mineral dan anorganik. Tujuan penetuan ini adalah untuk memberikan gambaran kandungan mineral internal dan eksternal yang berasal dari proses awal sampai terbentuknya ekstrak (Depkes RI,2000)

3.

Sari Terlarut dalam Pelarut Tertentu Pengertian dan prinsip : melarutkan ekstrak dengan pelarut ( alkohol atau air) untuk ditentukan jumlah solut yang identik dengan jumlah senyawa kandungan secara gravimetri. Dalam hal ini tertentu dapat diukur senyawa terlarut dalam pelarut lain misalnya heksana,diklorometan,metanol. SKRIPSI



14

Tujuan : memberikan gambaran awal senyawa kandungan.( Depkes RI,2000) 2.9 Tinjauan tentang Destilasi Metode yang digunakan untuk memisahkan minyak atsiri dari rimpang adalah menggunakan destilasi. Destilasi atau penyulingan dapat didefinisikan sebagai “pemisahan komponen-komponen suatu campuran dari dua jenis cairan atau lebih berdasarkan perbedaan tekanan uap dari masing-masing zat tersebut”(Stephen Miall, 1940). Proses penyulingan dengan demikian merupakan proses penting bagi produsen minyak atsiri. Secara umum ada dua macam sistem penyulingan campuran cairan yang perlu dikemukakan: a.

Penyulingan dari campuran cairan yang saling tidak melarut dan selanjutnya membentuk dua fase.

b.

Penyulingan dari campuran cairan yang saling melarut secara sempurna dan hanya membentuk satu fase

(Guenther, 1988).

2.10 Tinjauan tentang Minyak Atsiri Minyak atsiri atau minyak menguap adalah massa yang berbau khas, yang berasal dari tanaman dan sifatnya mudah menguap pada suhu kamar tanpa mengalami peruraian. Minyak atsiri sering dikenal dengan nama volatile oil, ethereal oil, atau essential oil. Dalam Farmakope Indonesia III dikenal dengan nama Olea volatilia . Pada umumnya minyak atsiri dalam keadaan segar tidak berwarna atau berwarna pucat, bila dibiarkan akan berwarna lebih gelap, berbau sesuai dengan bau tanaman penghasilnya. Umumnya larut dalam pelarut organik dan sukar larut dalam air (Midian, 1983) 2.11 Tinjauan tentang GC-MS Untuk menganalis suatu sampel dengan matriks yang kompleks digunakan analisis dengan proses pemisahan campuran zat-zat kimia. Cara pemisahan, metode analisis, dan kecermatan penelitian akan sangat SKRIPSI



15

berpengaruh terhadap hasil akhir analisis. Salah satu metode analisis adalah dengan proses pemisahan kromatografi. Kromatografi adalah teknik pemisahan fisik suatu campuran berdasarkan perbedaan migrasi dari masing-masing komponen campuran pada fase diam dibawah pengaruh fase gerak. (Mulja, 1995) Sistem kromatografi gas mempunyai resolusi tinggi sehingga optimal untuk pemisahan komponen yang stabil dengan pemanasan. Umumnya dibuat profil kandungan minyak atsiri atau metabolit sekunder tertentu lainnya seperti jenis fitosterol. Jenis kolom umumnya ada 3 jenis sesuai dengan urutan kepolaritasannya, yaitu OV-1,OV-% dan carbowax 2oM. Pemisahan dilakukan dengan menggunakan program temperatur, dari temperatur rendah sampai temperatur maksimal kolom. Detektor yang digunakan umumnya hanya FID karena metabolit sekunder tumbuhan umumnya senyawa organik hidrokabon.(Depkes RI, 2000) Kromatografi gas cairan merupakan cara pemisahan minyak atsiri paling lazim. Pemisahan terjadi pada fase diam berdasarkan kelarutan cuplikan. Senyawa yang kelarutannya rendah keluar lebih dulu (Boyer, 1990; Gritter dkk., 1991). Keunggulan metode ini adalah cepat setimbang, gas pembawa kecepatan tinggi, memisahkan pada titik didih kecil, analisis kualitatif dan kuantitatif bersamaan, konsentrasi 0,01%, mudah dijalankan dan dipahami (Harbone, 1984; McNair & Bonelli, 1968). 2.12 Tinjauan tentang Mikroba 1.

Staphylococcus aureus Staphylococcus aureus mempunyai sifat non-motil, non-spora,

anaerob fakultatif, katalase positif dan oksidase negatif. Bakteri ini tumbuh pada suhu 6,5-460C dan pada pH 4,2-9,3 (Todar, 1998 ; Nurwantoro, 2001 ; Paryati, 2000). Koloni tumbuh dalam waktu 24 jam dengan diameter mencapai 4 mm. Koloni pada perbenihan padat SKRIPSI



16

berbentuk bundar, halus, menonjol dan berkilau. Koloni yang dibentuk dari bakteri ini adalah berwarna abu-abu sampai kuning emas tua. Bakteri ini membentuk pigmen lipochrom yang menyebabkan koloni tampak berwarna kuning keemasan dan kuning jeruk, pigmen tersebut yang membedakannya dengan Staphylococcus epidermidis yang menghasilkan pigmen putih (Todar, 2002). Staphylococcus mengandung polisakarida dan protein yang bersifat antigenik dan merupakan substansi penting didalam struktur sel. Peptidoglikan merupakan suatu polimer polisakarida yang mengandung subunit-subunit yang tergabung, merupakan eksoskeleton yang kaku pada dinding sel. Peptidoglikan dirusak oleh asam kuat atau lisozim (Jawetz et al, 2005). 2.

Eschericia coli Eschericia coli adalah bakteri gram negatif, bentuk batang,

bergerak, tidak berspora, kadang-kadang berkapsul dengan luas sekitar 0,7 µm dan panjang 1-4 µm. Bakteri ini tumbuh baik pada media bakteriologik dalam suasana aerob maupun anaerob dengan kebutuhan nutrien yang relatif sederhana. Bakteri ini mampu mengadakan fermentasi dan banyak memecahkan karbohidrat dalam bentuk asam, gas seperti H2S, O2 dan H2 yang kira-kira jumlahnya sama dengan dextrosa. Salah satu bakteri coliform, flora normal bagian percernaan dan saluran utama flora jasad renik aerob normal dalam tubuh, dimana salah satunya adalah Eschericia coli (Lennette, 1975). Pada dasarnya bakteri ini tidak patogen, namun beberapa galur menghasilkan toksin yang dapat menyebabkan hiperseksresi dalam usus halus (Jawetz et al, 1991). 3.

Candida albicans Candida albicans merupakan suatu jamur lonjong yang

menghasilkan pseudomiselium, baik dalam biakan maupun dalamm aringan eksudat. Candida albican merupakan flora normal selaput lendir SKRIPSI



17

saluran pernafasan, saluran percernaan dan genetalia wanita, pada tempat ini jamur ini menjadi dominan. Kulit yang terinfeksi akan mengalami lesi yang disertai peradangan. Kadang-kadang ditemukan Candida dalam jumlah besar dalam saluran cerna setelah pemberian antibiotik oral, tetapi biasanya tidak terjadi gejala (Jawetz et al, 1991). 2.13 Tinjauan tentang Cara Penentuan Efek Antimikroba Metode-metode

yang

lazim

digunakan

adalah

metode

penyebaran, metode ini dilakukan dengan cara menanam mikroba pada media agar padat yang sesuai, selanjutnya diletakkan dalam cakram atau silinder yang telah ditetesi dengan bahan uji lalu dimasukkan dalam lubang atau cangkir agar yang telah dibuat pada media. Aktivitas antimikroba dilihat dengan mengukur daerah sekitar cakram, lubang atau cangkir agar yang tidak ditumbuhi bakteri. Metode pengenceran dilakukan dengan pengenceran dalam tabung maupun dengan pengenceran agar. Metode ini lebih kuantitatif karena dapat menunjukkan konsentrasi hambat minimum dari suatu bahan uji meskipun juga dapat digunakan untuk pemeriksaan pendahuluan skrining aktivitas secara kualitatif. Selanjutnya metode bioautografi, metode ini sangat berguna untuk mengetahui senyawa baru atau yang belum diketahui aktivitas antimikrobanya. Metode ini menggunakan prinsip difusi senyawa yang terpisah dengan kromatografi lapis tipis atau kromatografi kertas. Pada bioautografi langsung zona hambatan diamati secara langsung pada lempeng kromatografi yang telah disemprot suspensi bakteri dalam media cair dan diinkubasi pada suhu dan waktu yang sesuai, sedangkan metode bioautografi pencelupan dilakukan dengan cara mencelupkan lempeng kromatografi kedalam media dan biakan media mengeras, dan dilakukan pengamatan daerah hambatan (Dey & Harbone, 1991)

SKRIPSI



18

Metode yang terpilih dalam penelitian ini adalah metode pengenceran dalam agar (agar dillution method) alasannya fleksibilitas karena semua bahan yang berbentuk serbuk dapat digunakan dengan dilarutkan dengan pelarut yang sesuai lalu diencerkan dengan air steril. Metode ini memungkinkan digunakan dalam studi antimikroba bagi senyawa yang mudah larut maupun yang tidak mudah larut seperti minyak atsiri, keuntungan yang lainnya adalah hasil dari metode ini bersifat

kuantitatif. Untuk sampel

yang bersifat

lipofilik dapat

ditambahkan tween 20 atau tween 80 berfungsi untuk membantu menjaga kestabilan minyak atsiri didalam media (Rios et al, 1988). 2.14 Tinjauan tentang Antibiotika 1.

Streptomycin Merupakan golongan antibiotik aminoglikosida, yang bekerja

menghentikan

produksi

protein

esensial

yang

dibutuhkan bakteri untuk hidup. Serbuk; putih atau praktis tidak berbau atau hampir tidak berbau. Mudah larut dalam air, sangat sukar larut dalam etanol, praktis tidak larut dalam kloroform. (Kementrian kesehatan, 2014) 2.

Ketokonazol Antijamur golongan azol, Ketokonazol adalah suatu derivat imidazole-dioxolane sintetis yang memiliki aktivitas antimikotik yang poten terhadap dermatofit dan ragi, misalnya Tricophyton Sp, Epidermophyton floccosum, Pityrosporum Sp, Candida Sp. Ketokonazol bekerja dengan menghambat enzim sitokrom jamur sehingga mengganggu sintesis ergosterol yang merupakan komponen penting dari membran sel jamur.

SKRIPSI



19

BAB III KERANGKA KONSEPTUAL Alpinia galanga berasal dari Famili Zingiberaceae mempunyai berbagai khasiat salah satunya yaitu minyak atsiri dan ekstrak dari rimpang terbukti sebagai antijamur, antimikroba, antiamoeba, antioksidan (Wei et al., 2010). Sehingga dapat berpotensi untuk dikembangkan menjadi produk herbal yang sesuai dengan persyaratan yang ditetapkan oleh pemerintah untuk menjamin dari segi keamanan, mutu, kualitas. Studi farmakognosi dilakukan pada rimpang Alpinia galanga dan uji aktivitas antimikroba dari minyak atsiri rimpang Alpinia galanga. Parameter

farmakognosi

meliputi

studi

morfologi,

anatomi

dan

organoleptis yang bertujuan menghindari kesalahan dalam pengambilan sample tanaman dan mengidentifikasi kebenaran dari serbuk simplisia agar terhindar dari pemalsuan. Parameter fitokimia untuk mengetahui golongan senyawa yang terkandung didalam tanaman tersebut yang dalam penelitian ini yang digunakan adalah rimpang Alpinia galanga. Parameter

fisikokimia

untuk

mendapatkan

nilai

dari

parameter

fisikokimia dan nilai tersebut diharapkan tidak melebihi dari yang telah ditetapkan oleh buku monografi. Uji aktivitas antimikroba minyak atsiri menggunakan bakteri S. Epidermidis, E. Coli dan jamur Candida albicans. Hasil yang didapat dari penelitian ini dapat digunakan untuk mengevaluasi apakah sesuai dengan monografi dan dapat dijadikan peluang untuk pemanfaatan dibidang kesehatan.

SKRIPSI



20

Alpinia galanga mempunyai berbagai khasiat salah satunya yaitu minyak atsiri dan ekstrak dari rimpang ini terbukti sebagai antijamur, antimikroba, antiamoeba dan antioksidan (Wei et al., 2010)

Dapat berpotensi dikembangkan menjadi produk herbal yang sesuai seperti persyaratan yang ditetapkan oleh Pemerintah untuk menjamin dari segi keamanan, mutu, kualitas.

Studi farmakognosi rimpang Alpinia galanga

pengujian aktivitas antimikroba dari minyak atsiri rimpang Alpinia galanga

Ciri Morfologi dan anatomi

Skrining fitokimia

Nilai fisikokimia

Didapatkan karakteristik rimpang Alpinia galanga secara makroskopis dan mikroskopis, golongan senyawa yang terkandung, nilai fisikokimia yang memenuhi standar monografi , serta kemampuan minyak atsiri rimpang alpinia galanga menghambat bakteri S. Epidermidis, E. Coli dan jamur Candida albicans

Skema 3.1 Kerangka Konseptual

SKRIPSI



21

BAB IV METODE PENELITIAN 4.1 Bahan Penelitian 4.1.1 Tanaman Tanaman yang digunakan adalah rimpang Alpinia galanga ( lengkuas ) yang diperoleh dari Desa Sambilawang Kecamatan Dlanggu Kabupaten Mojokerto, rimpang ini dipanen pada bulan Maret- April dengan umur panen adalah 1 tahun. Determinasi tanaman ini dilakukan di UPT Balai Konservasi Tumbuhan Kebun Raya Purwodadi , Pasuruan hasil determinasi terlampir. 4.1.2 Bahan n-heksan teknis; Etanol 96% teknis; Etil asetat teknis; Kloroform teknis; Wagner; Meyer; Bouchardat; Dragendorf; Asam asetat anhidrat; Asam sulfat pekat; Asam sulfat encer; NaOH; NaSO4 anhidrat; NaCl; 10% alkohol soln dari α naphtol soln; Toluen; FeCl3; Agar Mueller Hinton; Agar Saboraud Dextrose; Streptomycin; Ketokonazol micronized AllCl48; bakteri Escherichia coli; bakteri Staphylococcus aureus; jamur Candida albicans; kertas saring; kertas saring bebas abu Whatman; tween 80; DMSO; larutan salin NaCl 0,9%; plat KLT; aquadest; kloralhidrat; air kloroform p; asam sulfat encer 10%. 4.2 Alat Penelitian Minyak atsiri yang didapatkan dari destilasi dilarutkan dengan n-heksana dengan perbandingan 1:1, analisis GC-MS menggunakan alat GC Hewlett-Packard (HP) Agilent 6890, detector MSD Agilent 19091S-433 dengan kondisi analisis sebagai berikut : spesifikasi kolom HP. 5MS 5% Phenyil Methyl Siloxane, gas pembawa Helium dengan kecepatan 50.0 ml/menit, split rasio 50:1, hasil didapatkan dari laboratorium PT. Gelora Djaja; Kamera digital; Mikroskop trinokuler

SKRIPSI



22

BXA41TF Olympus; Alat-alat gelas; Corong Buchner; Buchi rotavapor R-114; labu alas bulat; cawan petri; STAHL; kapas, cawan petri; micropipet; timbangan analitik Metler AB 204-S; deksikator; oven venticell Mmm medcenter; Furnice barnstead thermolyne; kurs porselen; botol timbang; cawan porselen; penangas udara. 4.3 Pengamatan Morfologi Pemeriksaan makroskopis terhadap rimpang segar dapat dilihat dari tanda-tanda berikut :panjang, lebar, bentuk, ada tidaknya akar, bentuk, dan daging rimpang. Juga melihat tanaman Alpinia galanga secara keseluruhan (Chitral dan Thoppil, 2008) 4.4 Pengamatan Anatomi Pengamatan anatomi secara mikroskopis meliputi pengamatan irisan melintang dan pengamatan fragmen spesifik pada serbuk simplisia dibuat dalam sediaan kloralhidrat yang dipanaskan. 4.5 Pengamatan Organoleptis Pengamatan organoleptis terhadap rimpang segar dan serbuk simplisia rimpang lengkuas yang meliputi warna, bau, rasa 4.6 Skrining Fitokimia Ekstrak Skrining fitokimia bertujuan untuk mengetahui golongan senyawa yang terkandung pada rimpang lengkuas. Rimpang lengkuas segar dikeringkan kemudian dilakukan pengecilan ukuran partikel sampai diperoleh serbuk simplisia yang halus. Kemudian diekstraksi dengan cara maserasi. 4.6.1 Pemeriksaan Alkaloid 1.

Reaksi Pengendapan Ekstrak yang setara dengan 20 gram bahan dipanaskan diatas penangas air sampai seperti sirup. Setelah dingin ditambahkan 10 ml HCl 2N kemudian dipanaskan di atas penangas air selama 3-5

SKRIPSI



23

menit. Setelah dingin ditambahkan 0,5 gram NaCl untuk mengendapkan protein yang dapat memberikan reaksi positif palsu, lalu disaring, kemudian filtrat ditambahkan HCl 2N sampai 10 ml. Filtrat yang digunakan untuk petunjuk alkaloid dengan penambahan pereaksi pengendapan. Pereaksi yang digunakan antara lain Wagner, Meyer, dan Bouchardat. Ekstrak mengandung alkaloid timbul endapan setelah ditambah dengna perekasi tersebut. 2.

Kromatografi Lapis Tipis Filtrat

ditambahkan

NH4OH

28%

sampai

alkalis,

diekstraksi dengan 10 ml CHCl3, fase CHCl3 ditambahkan NaSO4 eksikatus, disaring, kemudian diuapkan sampai kering. Ekstrak CHCl3 dilarutkan dalam metanol dengan uji KLT. Fase gerak

: aseton : air : amoniak (40 : 7 : 3 )

Penampak noda

: pereaksi dragendorf

Positif jika terjadi noda merah jingga (Fong, Tin-Wa, & Fransworth, 1990 ;

Harborne, 1973).

4.6.2 Pemeriksaan Glikosida Saponin 1.

Uji Buih Sekitar 5 ml ekstrak dimasukkan kedalam tabung reaksi kemudian dikocok kuat dengan air suling 20 ml. Buih yang timbul diukur. Positif jika terjadi buih stinggi 3 cm diatas cairran, stabil selama 30 menit. Sebagai pembanding digunakan daging buah Sapindus rarak (Zaini & Indrayanto, 1978 ; Fong, Tin-Wa, & Fransworth, 1990 ; Thokcrom et al, 2014).

2.

Reaksi warna Ekstrak yang setara dengan 10 gram bahan, diuapkan diatas penangas air sampai kering. Setelah dingin, dikocok dengan 10 ml n-heksan atau petroleum eter. Kemudian didekantir dan filtrat

SKRIPSI



24

dibuang. Diulang sampai n-heksan atau petroleum eter tidak berwarna. Residu ditambah 10 ml CHCl3, kemudian di gojok selama 5 menit, didekantir dalam tabung reaksi yang berisi 100 mg NaSO4 anhidrat, saring. Filtrat dibagi 3 (A,B,C) (Zaini & Indrayanto, 1978 ; Fong, Tin-Wa, & Fransworth, 1990). a.

Tes Liebermann-Burchard A sebagai blanko, B ditambah 3 tetes asam asetat anhidrat dan 1 tetes asam sulfat pekat, kemudian dikocok pelan. Positif ika terjadi perubahan warna hijau-biru untuk saponin steroid, merah violet untuk saponin triterpenoid dan kuning muda untuk saponin tak jenuh (Zaini & Indrayanto, 1978 ; Fong, Tin-Wa, & Fransworth, 1990).

b.

Tes Salkowski A sebagai blanko, C ditambah 1-2 ml H2SO4 pekat melalui dinding tabung reaksi. Positif mengandung sterol tak jenuh bila terdapat cincin merah pada fase asam (Zaini & Indrayanto, 1978 ; Fong, Tin-Wa, & Fransworth, 1990).

3.

Kromatografi Lapis Tipis

a.

Ekstrak yang setara dengan 10 gram bahan ditambah dengan pelarut yang sesuai, ditotolkan pada fase diam sampai terlihat noda pada lampu UV, kemudian di eluasi dengan fase gerak. Langkah ini untuk identifiksai adany steroid atau triterpenoid bebas.

b.

Ekstrak yang setara dengan 10 gram bahan ditambah 2 ml HCl 1N, direfluks diatas penangas air selama 2-6 jam untuk menghidrolisi saponin. Setelah dingin dinetralkan dengan amonia, kemudian diuapkan diatas penangas air sampai kental lalu ditambah 3 ml n-heksan, kemudian diekstraksi sebanyak 3 kali. Setelah itu fase n-heksan dikumpulkan, lalu diuapkan ditambah 5 tetes CHCl3

SKRIPSI



25

Fase diam

: silika gel GF 254

Fase gerak

: n-heksan : etil asetat (3:2)

Penampak noda

: Anisaldehid-asam sulfat

Positif bila terjadi noda warna merah ungu setelah lempeng KLT dipanaskan diatas hot plate (Zaini & Indrayanto, 1978 ; Fong, Tin-Wa, & Fransworth, 1990). 4.6.3 Pemeriksaan Flavonoid 1.

Reaksi warna Ekstrak yang setara dengan 10 gram bahan, dipanaskan diatas penangas air sampai kering. Diekstraksi berulang-ulang dengan petroleum eter atau n-heksan sampai cairan tidak berwarna. Residu ditambahkan 20 ml etanol 80% disaring, filtrat dibagi empat (A,B,C,D)

a.

Tes Bate smith & Metcalf A sebagai blanko, B ditambah 0,5 ml HCl pekat, kemudian dipanaskan selama 15 menit diatas penangas air. Positif jika terjadi warna merah terang atau ungu (leukoantosianin) (Zaini & Indrayanto, 1978 ; Fong, Tin-Wa, & Fransworth, 1990)

b.

Tes Wilstater A sebagai blanko, C ditambahkan 0,5 ml HCl pekat dan 4 potong magnesium. Diamati warna yang terjadi, diencerkan dengan air suling, kemudian ditambah 1 ml butanol. Diamati waran yang terjadi pada setiap lapisan. Perubahan warna merah jingga menunjukkan adanya flavon, merah pucat adanya flavonol, merah tua menunjukan flavanon.

2.

Kromatografi Lapis Tipis Bahan

SKRIPSI

: 0,1-0,2 ml ekstrak etanol



26

Fase diam Fase gerak

: silika gel GF 254 tebal 0,25 mm : butanol : asam asetat glasial : aquadest (4:1:5)

Penampak noda : sitrat borat atau CeSO4 atau uap amonia atau FeCl3 2% Noda yang diamati dengan pereaksi sitrat borat dan dengan sinar UV kemudian dibandingkan dengan noda dari rutin. Adanya flavonoid ditunjukan dengan adanya noda kuning terang, coklat lemah, kuning hijau, merah jingga. Bila disemprot dengan CeSO4 akan timbul warna orange sampai coklat atau bila dialari uap amoia akan timbul warna kuning tidak permanen dan apabila dengan pereaksi FeCl3 2% akan timbul warna gelap (Zaini & Indrayanto, 1978 ; Fong, Tin-Wa, & Fransworth, 1990). 4.6.4 Pemeriksaan Tannin 1.

Preparasi Sampel a.

ekstrak dengan berat 0,3 gram ditambah 6 ml akuades panas,

diaduk dan dibiarkan sampai temperatur kamar, lalu tambahkan 3-4 tetes 10% NaCl, diaduk, dan disaring. b.

Filtrat dibagi menjadi tiga bagian masing-masing ± 4 ml dan

disebut sebagai larutan IVA, IVB, dan IVC 2.

Uji Gelatin a.

Larutan IVA digunakan sebagai blanko, larutan IVB ditambah

dengan sedikit larutan gelatin dan 5 ml larutan NaCl 10%. b. 3.

Jika terjadi endapan putih menunjukkan adanya tannin.

Uji Ferriklorida Sebagai Larutan IVC diberi beberapa tetes larutan FeCl3, kemudian diamati terjadinya perubahan warna.

SKRIPSI



27

a.

Jika terjadi warna hijau kehitaman menunjukkan adanya tannin.

b.

Jika pada penambahan gelatin dan NaCl tidak timbul endapan tetapi setelah ditambahkan dengan larutan FeCl3 terjadi perubahan warna menjadi hijau biru hingga hitam, menunjukkan adanya senyawa polifenol. FeCl3 (+) , Uji Gelatin (+) → tannin (+) FeCl3 (+) , Uji Gelatin (-) → polifenol (+) FeCl3 (-) , Uji Gelatin (-) → tannin (-)

4.6.5 Pemeriksaan Glikosida Jantung 1.

Tes Keller-Killiani Ekstrak yang setara dengan 10 gram bahan, diuapkan diatas penangas air sampai kering. Diekstraksi berulang-ulang dengan n-heksan sampai n-heksan tidak berwarna. Residu

diuapkan

untuk

menghilangkan

n-heksan,

ditambah 3 ml FeCl3, diaduk-aduk, dimasukkan dalam tabung reaksi. Kemudian ditambahkan H2SO4 pekat melalui dinding tabung reaksi. Adanya cincin ungu menunjukan adanya gula 2 deoxy. 2.

Tes Liebermann-Burchard seperti pada saponin Positif untuk inti steroid jika terbentuk warna hijau-biru. (Zaini & Indrayanto, 1978 ; Fong, Tin-Wa, & Fransworth, 1990)

4.6.6 Pemeriksaan Glikosida Antrakuinon 1.

Reaksi warna

a.

Tes Borntrager Ekstrak yang setara dengan 1 gram bahan, diuapkan sampai kering. Setelah dingin, ditambahkan 10 ml air suling, kemudian disaring, filtrat diekstraksi dengan toluen 5 ml dalam corong pisah 2 kali. Fase toluena diambil kemudian dibagi dua

SKRIPSI



28

(A,B). A sebagai blanko, B ditambah 5 ml amonia, kemudian dikocok. Positif jika terjadi warna merah pada lapisan alkali (Zaini & Indrayanto, 1978 ; Fong, Tin-Wa, & Fransworth, 1990) b.

Modifikasi Borntrager Test Ekstrak yang setara dengan 1 gram bahan, diuapkan diatas penangas air sampai kering. Setelah dingin ditambah 10 ml KOH 5N dan 1 ml H2O2 encer, dipanaskan diatas penangas air selama 10 menit kemudian disaring. Filtrat ditambah asam asetat glasial sampai reaksi asam. Diekstraksi dengan toluen 2 kali masing-masing 5 ml. Fase tolena diambil, di bagi dua (A,B). A sebagai blanko, B ditambah 2-5 ml larutan amonia. Positif jika terjadi warna merah pada lapisan alkali (Zaini & Indrayanto, 1978 ; Fong, Tin-Wa, & Fransworth, 1990)

3.

Kromatografi Lapis Tipis Bahan

: 0,1-0,2 ml ekstrak etanol

Fase diam

: silika gel GF 254 tebal 0,25 mm yang telah diimpregnasi dengan NaOH 0,01 M

Fase gerak

: kloroform : etil asetat : asam asetat (75:24:1)

Penampak noda : larutan KOH 10% metanol Positif jika noda kuning, kuning0cokelat, merah, violet, hijau (Harborne, 1973) 4.7 Parameter Fisiko-Kimia 4.7.1 Penentuan Parameter Sari Larut dalam Pelarut Tertentu 1.

Penentuan Kadar Senyawa yang Larut dalam Air Maserasi sejumlah 5 gram ekstrak selama 24 jam dengam 100 ml air kloroform LP (diambil 2,5 ml kloroform ditambahkan aquadest 100 ml dalam beaker glass) menggunakan labu bersumbat

SKRIPSI



29

berkali-kali dikocok selama 6 jam pertama dan kemudian dibiarkan selama 18 jam. Saring, uapkan 20 ml filtrat hingga kering dalam cawan dangkal berdasarkan rata yang telah ditara, panaskan residu pada suhu 105oC hingga bobot tetap, penghitungan terhadap ekstrak awal (Depkes RI,2000). 2.

Penentuan Kadar Senyawa yang Larut dalam Etanol Serbuk dikeringkan diudara, dimaserasi selama 24 jam 5,0 gram serbuk dengab 100 ml etanol (95%), menggunakan labu bersumbat sambil berkali-kali dikocok selama 6 jam pertama dan kemudian dibiarkan selama 18 jam. Disaring cepat dengan menghindar penguapan etanol (95%), diuapkan 25 ml filtrat hingga kering dalam cawan dangkal berdasarkan rata yang telah ditara,dipanaskan sisa pada suhu 105oC hingga bobot tetap. Dihitung kadar dalam persen sari yang larut dalam etanol (95%), penghitungan terhadap bahan yang telah dikeringkan diudara (Depkes RI, 2000).

4.7.2 Kadar Total Golongan kandungan Kimia 1.

Penetapan Kadar Minyak Atsiri Diletakkan labu alas bulat 1 liter, berleher pendek dalam mantel pemanas yang dilengkapi dengan pengaduk magnetik. Masukkan batang pengaduk magnetik kedalam labu, hubungkan labu dengan pendingin dan alat penampung berskala. Ditimbang secukupnya

sejumlah

ekstrak

hingga

diperkiraan

dapat

menghasilkan 1 ml sampai 3 ml minyak atsiri. Masukkan sejumlah ekstrak yang telah ditimbang seksama kedalam labu. Hubungkan dengan bagian pendingin dan penampung berskala. Didihkan isi labu dengan pemanas yang sesuai untuk menjaga agar pendidihan berlangsung tidak terlalu kuat selama 2 jam atau sampai minyak

SKRIPSI



30

atsiri terdestilasi sempurna dan tidak bertambah lagi dalam bagian penampung berskala. Jika sejumlah volume minyak atsiri telah tertampung dalam bagian penampung berskala, pencatatan dapat dilakukan dengan pembacaan sampai 0,1 ml dan volume minyak atsiri untuk setiap 100 g ekstrak dapat dihitung dari bobot ekstrak yang ditimbang. Skala pada penampung dengan minyak atsiri dengan bobot jenis lebih besar dari air diletakkan Sedemikian hingga minyak atsiri tertampung dibawah kondensat air, sehingga otomatis air kembali kedalam labu (Depkes RI,2000). 4.7.3 Susut Pengeringan 1.

Parameter susut pengeringan Ekstrak ditimbang secara seksama sebanyak 1 g sampai 2 g dan dimasukkan kedalam botol timbang dangkap tertutup yang sebelumnya telah dipanaskan pada suhu 105oC selama 30 menit dan telah ditara. Sebelum ditimbang, ekstrak diratakan dalam botol timbang, dengan menggoyangkan botol, hingga merupakan lapisan setebal lebih kurang 5 mm sampai 10 mm. Jika ekstrak yang diuji berupa ekstrak kental, ratakan dengan bantuan pengaduk. Kemudian dimasukkan kedalam ruang pengering, buka tutupnya, keringkan pada suhu 105oC hingga botol tetap. Sebelum setiap pengeringan, biarkan botol dalam keadaan tertutup mendingin dalam eksikator hingga suhu kamar. Jika ekstrak sulit kering dan mencair pada pemanasan, ditambahkan 1 g silika pengering yang telah ditimbang seksama setelah dikeringkan dan disimpan dalam eksikator pada suhu kamar. Campurkan silika tersebut secara rata dengan esktrak pada saat panas,kemudian keringkan kembali pada suhu penetapan hingga bobot tetap (Depkes RI,2000).

SKRIPSI



31

4.7.4 Parameter Kadar Abu 1.

Penetapan kadar abu Lebih kurang 2 g sampai 3 g ekstrak yang telah digerus dan ditimbang saksama, dimasukkan kedalam kurs silikat yang telah dipijarkan dan ditara, ratakan. Pijarkan perlahan-lahan hingga arang habis, dinginkan, timbang. Jika cara ini arang tidak dapat dihilangkan, tambahkan air panas, saring melalui kertas saring bebas abu. Pijarkan sisa kertas dan kertas saring dalam krus yang sama. Masukkan filtrat kedalam kurs, uapkan, pijarkan hingga bobot tetap, timbang. Hitung kadar abu terhadap bahan yang telah dikeringkan diudara. (Depkes RI,2000).

2.

Penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam Abu yang diperoleh pada penetapan kadar abu, didihkan dengan 25 ml asam sulfat encer p selama 5 menit, kumpulkan bagian yang tidak larut dalam asam, saring melalui krus kaca masir atau kertas saring bebas abu, cuci dengan air panas, pijarkan hingga bobot tetap, timbang. Hitung kadar abu yang tidak larut dalam asam terhadap bahan yang telah dikeringkan diudara (Depkes RI, 2000).

4.8 Destilasi Minyak Atsiri dan Sifat Fisika Minyak Atsiri Destilasi minyak atsiri dilakukan dengan metode air dan uap (kukus). Rimpang lengkuas segar dicuci kemudian ditumbuk kasar. Umlah bahan yang digunakan untuk penyulingan sebanyak 20 kg. Uap air bercampur minyak yang dihasilkan kemudian dipisahkan dengan menggunakan corong pisah (Mangestuti et al, 2009) selanjutnya sebagian minyak atsiri disimpan pada suhu 4oC sebelum dianalisis menggunakan GC-MS dan sebagian lagi diidentifikasi sifat-sifat minyak atsiri. Minyak atsiri hasil destilasi dilakukan uji sifat-sifat fisika seperti : organoleptis minyak atsiri adalah warna dan bau aromatis,

SKRIPSI



32

menentukan adanya air dalam minyak atsiri dengan cara meneteskan 1 tetes minyak atsiri dalam air jika permukaan air keruh berarti minyak atsiri mengandung air dan untuk menentukan adanya lemak dalam minyak atsiri adalah dengan cara meneteskan satu tetes minyak atsiri pada kertas saring jika terdapat noda transparan pada kertas saring maka minyak atsiri mengandung lemak, untuk rotasi optik untuk mengukur aktivitas optik alat yang digunakan adalah polarimeter. 4.9 Uji Aktivitas Antimikoba 1.

Penyiapan Media

a.

Pembuatan Media Agar Mueller Hinton Media agar Mueller Hinton digunakan untuk uji anti bakteri, menurut E Merck cara pembuatan media ini dengan cara menimbang 36,5 g Media agar Mueller Hinton lalu dilarutkan dalam 1000 mL air suling. Lalu campuran tersebut dididihkan kemudian diatur pada pH 7,2-7,4 dan volume larutan tetap dijaga. Selanjutnya larutan dimasukkan kedalam tabung bertutup ulir masing-masing sebanyak 4,5 mL lalu disterilkan dengan autoklaf pada suhu 121oC selama 15 menit.

b.

Pembuatan Media Saboraud Dextrose Agar Media Saboraud Dextrose Agar digunakan untuk uji anti jamur, menurut FI IV cara pembuatan media ini dengan menimbang 65 g Media Saboraud Dextrose Agar instan lalu dilarutkan ke dalam 1000 mL air suling. Lalu campuran tersebut dididihkan kemudian diatur pada pH 7,2-7,4 dan volume larutan tetap dijaga. Selanjutnya larutan dimasukkan kedalam tabung bertutup ulir masing-masing sebanyak 4,5 mL lalu disterilkan dengan autoklaf pada suhu 121oC selama 15 menit.

SKRIPSI



33

2.

Pembuatan Inokulum Diambil dalam jumlah tertentu koloni bakteri dan jamur dengan sengkelit dari biakan persediaan, selanjutnya masing-masing kloni dibiakkan (disusupensikan) dalam agar miring dan diinkubasi pada suhu 35-37oC selama 24-48 jam. Koloni dari agar miring diambil menggunakan sengkelit, ditambah dengan salin steril 10 ml, lalu dikocok sampai homogen. Kemudian mengukur kekeruhan suspensi bakteri dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 580 nm, jika perlu diencerkan dengan salin steril sampai diperoleh transmittan 25% dibandingkan terhadap larutan salin sebagai blanko (Anonim, 1995).

3.

Pembuatan Larutan Uji Sampel yang digunakan adalah minyak atsiri, untuk membantu mendispersikan minyak kedalam media berair, maka minyak atsiri terlebih dahulu dilarutkan dengan Tween 80 dan dimetil sulfooksida (DMSO) dengan perbandingan 5:1. Selain dapat membantu mendispersikan minyak dalam media berbasis air, tween 80 juga dapat berfungsi untuk membantu menjaga kestabilan minyak atsiri didalam media. Konsentrasi akhir dari larutan pengencer tidak boleh lebih dari 2% (Rios et al, 1988). Pembuatan larutan uji dibuat dengan 200 µl minyak atsiri, dilarutkan dalam 40 µl tween dan 360 µl DMSO lalu ditambah dengan air steril sampai 2,0 ml kemudian dikocok sampai homogen dan didapat konsentrasi 10 %v/v. Kemudian larutan ini diencerkan dengan campuran larutan tween 80 2% dan DMSO 18% diperoleh konsentrasi 5 %v/v, 2,5 %v/v, 1,25 %v/v, 0,625 %v/v, 0,3 %v/v dan 0,15% v/v. 0,5 ml dari masing-masing larutan tersebut diencerkan dengan media sampai 5.0 ml sehingga diperoleh konsentrasi akhir

SKRIPSI



34

1%v/v ppm, 0,5 %v/v, 0,25%v/v, 0,125%v/v, 0,06%v/v, 0,03%v/v dan 0,015% v/v. Skema pembuatan larutan uji dapat disederhanakan dalam gambar 4.1:

SKRIPSI



35

0,5 ml

200 µL minyak atsiri + 40 µL Tween 80 + 360 µL DMSO + Aqua steril ad 2,0 ml (10% v/v)

1 ml 1 ml

+ 1 ml pelarut 5% v/v

1 ml

+ 1 ml pelarut 2,5% v/v

0,5 ml

1 ml


0,5ml

1 ml

1 ml

+ 1 ml + 1 ml pelarut pelarut 0,625% v/v 0,3125% v/v

0,5 ml

0,5 ml

0,5 ml


0,5 ml

+ 4,5 ml media

1% v/v 0,5% v/v 0,25% v/v 0,125% v/v

0,06% v/v 0,03% v/v

0,015% v/v

Komposisi Pelarut : 2% Tween 80 18% DMSO 80% air steril

Gambar 4.1 skema pembuatan larutan uji

SKRIPSI



36

4.

Pembuatan Larutan Kontrol Positif dan Kontrol Negatif

a.

Kontrol Positif Kontrol positif yang digunakan adalah streptomicin dengan kadar 1000 ppm. Pembuatan kontrol positif ini dengan cara menimbang antibiotik sebanyak 50,0 mg, dilarutkan pada larutan pengencer sampai 5 ml (10.000 ppm). Selanjutnya dipipet 0,5 ml kemudian dimasukkan kedalam tabung yang berisi 4,5 ml media agar lalu dihomogenkan.

b.

Kontrol Negatif Dibuat dengan cara mencampurkan 0,5 ml pelarut dan 4,5 ml media agar, lalu dihomogenkan kemudian dimasukkan ke dalam cawan petri. Sehingga konsentrasi akhir pelarut (tween 80 dan DMSO) dalam media adalah 2%.

5.

Penentuan Kadar Hambat Minimal Penentuan kadar hambat minimal dilakukan dengan mencampur secara homogen media agar yang telah disterilkan dengan larutan uji, larutan kontrol positif dan kontrol negatif. Kemudian campuran dituang pada cawan petri dan diputar agar merata. Suhu pencampuran dilakukan pada 45-50oC. Suspensi mikroba dipipet sebanyak 5 µl lalu masukkan kedalam tabung, homogenkan. Lalu dituang kedalam cawan petri dengan konsentrasi akhir mikroba uji 104-105 CFU/ml lalu diinkubasi pada suhu 35-37oC selama 24-48 jam, adanya pertumbuhan koloni mikroba diamati dengan visual, kemudian ditentukan kadar hambat minimalnya. Perlakuan diatas diulang sebanyak 3 kali untuk tiap jenis mikroba.

SKRIPSI



37

6.

Teknik Analisis Data Metode yang digunakan untuk menentukan KHM adalah metode dilusi agar, alasannya fleksibilitas karena semua bahan yang berbentuk serbuk dapat digunakan dengan dilarutkan dengan pelarut yang sesuai lalu diencerkan dengan air steril. Metode ini memungkinkan digunakan dalam studi antimikroba bagi senyawa yang mudah larut maupun yang tidak mudah larut seperti minyak atsiri, keuntungan yang lainnya adalah hasil dari metode ini bersifat kuantitatif (Rios et al, 1988). Konsentrasi hambat minimum (KHM) ini ditentukan dengan

mengamati

secara visualpertumbuhan mikroba

pada

konsentrasi terkecil yang masih mampu menghambat pertumbuhan mikroba (Mangestuti et al, 2009). 4.10 Kerangka Penelitian Rimpang lengkuas segar dicuci dengan air mengalir, sebagian dari rimpang tersebut digunakan untuk pengamatan ciri morfologi dan anatomi secara makroskopik dan mikroskopik, sebagian lagi dikeringkan kemudian disortasi dan diperkecil ukuran hingga didapatkan serbuk simplisia dan sebagian lagi digunakan untuk destilasi minyak atsiri. Serbuk digunakan untuk untuk pemeriksaan fragmen serbuk rimpang secara mikroskopik, untuk skrining fitokimia dan untuk fisikokima. Kerangka penelitian dapat disederhanakan dalam gambar 4.2 :

SKRIPSI



38 Rimpang segar pencucian Pemeriksaan secara makroskopis, mikroskopis

Destilasi Menghasilkan minyak atsiri

Ciri morfologi dan anatomi rimpang lengkuas

Pengamatan mikroskopis berupa fragmen serbuk simplisia dan organoleptis

Pemeriksaan senyawa yang terkandung dengan GC-MS Aktivitas antimikroba Pemgeringan, sortasi, pengecilan ukuran partikel

Serbuk simplisia

Diekstraksi Fisikokimia : Parameter sari larut  dalam pelarut tertentu  Susut pengeringan Parameter kadar abu 

ekstrak

Skrining fitokimia  Alkaloid Saponin   Flavonoid  Glikosida jantung  Tanin

Skema 4.2 Kerangka Penelitian

SKRIPSI



39

BAB V HASIL PENELITIAN 5.1 Pemeriksaan Morfologi Pada

pemeriksaan

makroskopis

didapatkan

bahwa

rimpang

mempunyai ukuran yang besar dengan warna coklat kemerahan pada bagian permukaan, pada bagian dalam berwarna merah muda dengan bekas patahan berserat pendek. Pengamatan dapat dilihat pada tabel 5.1 Tabel 5.1 Pengamatan morfologi dilakukan secara makroskopis Panjang

7-12 cm

Lebar

2-3 cm

Bentuk

silidris

Ada tidak nya akar kecil

ada

Bentuk

banyak

Daging rimpang

Berserat kasar

Warna permukaan

Coklat kemerahan

Hasil pemeriksaan dapat dilihat pada gambar 5.1, 5.2, 5.3, 5.4, 5.5, 5.6

Gambar 5.1 rimpang Alpinia galanga

SKRIPSI



Gambar 5.2 lebar rimpang saat dipotong melintang

Gambar 5.3 rimpang saat dipotong melintang

Gambar 5.4 serabut kasar pada rimpang

SKRIPSI


40


Gambar 5.5 simplisia rimpang

Gambar 5.6 serbuk rimpang

SKRIPSI


41


42

5.2 Pengamatan Anatomi Pengamatan

anatomi

secara

mikroskopis

dilakukan

meliputi irisan melintang dan pengamatan fragmen pada serbuk simplisia rimpang laos dalam media air dan kloralhidrat. 5.2.1 Pengamatan Irisan Melintang Hasil

pengamatan

irisan

melintang

rimpang

laos

didapatkan hasil sebagai berikut : pada irisan melintang didapatkan epidermis, sel sekresi berisi minyak atsiri, parenkim korteks, korteks, endodermis, berkas pembuluh tipe kolateral tertutup, serabut sklerenkim, amilum. Hasil pengamatan dapat dilihat pada gambar 5.7, 5.8, 5.9, 5.10

A B

Gambar 5.7 pengamatan dengan mikroskop perbesaran 100x dalam media kloralhidrat; A= epidermis; B= parenkim korteks.

SKRIPSI



43

A

Gambar 5.8 pengamatan dengan mikroskop perbesaran 100x dalam media kloralhidrat; A= sel sekresi berisi minyak atsiri.

A B

C D E F

Gambar 5.9 pengamatan dengan mikroskop perbesaran 100x dalam media kloralhidrat; A= xylem; B=floem; C=serabut sklerenkim; D=korteks; E=endodermis; F= berkas pembuluh tipe kolateral tertutup.

SKRIPSI



44

A

Gambar 5.10 pengamatan dengan mikroskop perbesaran 400x dalam media air; A= butir amilum dengan bentuk lonjong dan bulat. 5.2.2 Pengamatan Fragmen Serbuk Hasil pengamatan sediaan serbuk rimpang didapatkan hasil sebagai berikut : pada pengamatan serbuk secara mikroskopik ditemukan fragmen epidermis berhimpitan dengan sel gabus, parenkim dengan sel minyak, butir amilum, korteks dengan butir amilum, fragmen serabut sklerenkim dengan dinding sel tebal, fragmen xylem dengam pembuluh tangga. Hasil pengamatan dapat dilihat pada gambar 5.11, 5.12, 5.13, 5.14, 5.15, 5.16

SKRIPSI



45

Gambar 5.11 epidermis dan jaringan gabus pada pengamatan dengan mikroskop perbesaran 100x dalam media kloralhidrat.

Gambar 5.12 parenkim dengan sel minyak pada pengamatan dengan mikroskop perbesaran 100x dalam media kloralhidrat.

SKRIPSI



46

Gambar 5.13 butir amilum berbentuk lonjong dan bulat telur pada pengamatan dengan mikroskop perbesaran 400x dalam media air.

Gambar 5.14 korteks dengan butir amilum berbentuk lonjong dan bulat telur pada pengamatan dengan mikroskop perbesaran 400x dalam media air.

SKRIPSI



47

Gambar 5.15 fragmen serabut sklerenkim dengan dinding sel tebal pada pengamatan dengan mikroskop perbesaran 100x dalam media kloralhidrat.

Gambar 5.16 fragmen xylem dengan penebalan tangga pada pengamatan dengan mikroskop perbesaran 100x dalam media kloralhidrat.

SKRIPSI



48

5.3 Pengamatan Organoleptis Pengamatan organoleptis dilakukan menggunakan rimpang segar dan serbuk, didapatkan hasil yang tercantum pada tabel 5.2 Tabel 5.2

Hasil Pengamatan Organoleptis

Rimpang Segar

Serbuk Rimpang

Warna

Putih kemerahan

Cokelat

Bau

Bau aromatis

Bau aromatis

Rasa

Pedas

Pedas

5.4 Skrining Fitokimia Ekstrak etanol 96% didapatkan dari 100 gram berat serbuk dimaserasi dalam pelarut etanol 96% sebanyak 1.200 ml, ekstrak yang didapat sebesar 32,17 gram. Hasil penimbangan bahan dan ekstrak dapat dilihat pada tabel 5.3 Tabel 5.3 berat bahan dan ekstrak rimpang laos Berat Rimpang

Laos

Basah

Kering

(g)

(g)

5167

592

Penyusutan

Serbuk

yang

Berat

ekstrak

(%)

diekstraksi(g)

etanol (g)

88,5426

100

32,17

Setelah didapatkan ekstrak dilakukan skrining fitokimia ektrak etanol 96% rimpang laos yang diperoleh hasil positif pada pemeriksaan flavonoid reaksi warna tes Bate Smith & Metcalf yang menghasilkan warna merah dan pada kromatografi lapis tipis dihasilkan noda berwarna coklat dengan penampak noda FeCl3 2%. Juga pada pemeriksaan terpenoid menggunakan kromatografi lapis tipis didapatkan hasil positif dengan timbul noda berwarna merah ungu dengan penampak noda anisaldehid-asam sulfat.

SKRIPSI



49

Hasil pengamatan dapat dilihat pada gambar 5.17, 5.18, 5.19

Gambar 5.17 pemeriksaan flavonoid dengan reaksi warna menghasilkan warna merah

SKRIPSI



50

Rf 2 = 0,20

Rf 1= 0,33

Gambar 5.18 Kromatogram golongan senyawa flavonoid ekstrak etanol 96% rimpang laos dengan fase diam = silika gel GF 254; fase gerak=butanol : asam asetat glasial : aquadest (4:1:5); penampak noda= FeCl3 2%.

Rf

= 0,76

Gambar 5.19 Kromatogram golongan senyawa terpenoid ekstrak etanol 96% rimpang laos.fase diam = silika gel GF 254; fase gerak= n-heksan : etil asetat (3:2); penampak noda= anisaldehid- asam sulfat.

SKRIPSI



51

Hasil skrining fitokimia dapat ekstrak etanol 96% rimpang Alpinia galanga L.dapat dilihat pada tabel 5.4 Tabel 5.4 Skrining fitokimia ekstrak etanol 96% rimpang Alpinia galanga Golongan

Metode pengujian

Hasil

Bouchardat

(-) tidak ada endapan

Meyer


Wagner


senyawa Alkaloid

Kromatografi

lapis

(-) noda merah jingga

tipis Saponin

Uji buih

(-) tidak ada buih

Liebermann-Burchard

(-)

Salkowski

(-)

Kromatografi

lapis

(+)noda berwarna merah ungu

tipis Flavonoid

Bate Smith & Metcalf

(+) merah

Wilstater

(-)

Kromatografi

lapis

(+) cokelat

tipis Glikosida

Keller-Killani

(-) cincin ungu

jantung

Liebermann-Burchard

(-) hijau biru

Tanin

Gelatin

(-) tanin

polifenol

Gelatin-NaCl

(-)tanin

FeCl3

(-) polifenol

Glikosida

Borntrager

(-)warna merah pada lapisan alkali

Antrakuino

Modifikasi Borntrager

(-)warna merah pada lapisan alkali

n

Kromatografi

(-)

lapis

tipis

SKRIPSI



52

5.5 Parameter Fisiko-Kimia Bahan yang digunakan pada parameter fisikokimia adalah serbuk, berikut adalah hasil yang didapat : 5.5.1 Penetapan Kadar Sari Yang Larut Dalam Air Metode : Gravimetri Tujuan

: Memberikan gambaran awal kandungan kimia yang

terdapat dalam simplisia yang larut dalam pelarut air. Kadar sari yang larut dalam air simplisia rimpang laos= (33.1228± 0.6608) % dengan KV =1.9949 %. Hasil penetapan kadar sari yang larut dalam etanol memenuhi syarat yaitu tidak kurang dari 5.2 % . Nilai KV sesuai dengan yang dipersyaratkan yaitu tidak lebih dari 5 % untuk analisis bahan alam (Indrayanto, 1994). Dapat dilihat pada tabel 5.5 Tabel 5.5 Hasil Penetapan Kadar Sari Yang Larut Dalam Air No

Berat awal (g)

Berat akhir (g)

% kadar sari yang larut dalam air

1.

5.0002

1.6760

33.5186

2.

5.0000

1.6745

33.4900

3.

5.0000

1.6180

32.3600

X SD KV

SKRIPSI

33.1228 0.6608 1.9949

SD KV



53

5.5.2 Penetapan Kadar Sari Yang Larut Dalam Etanol Metode : Gravimetri Tujuan

: memberikan gambaran awal kandungan kimia yang terdapat dalam

simplisia yang larut dalam pelarut

etanol. Kadar sari yang larut dalam etanol simplisia rimpang laos= (16.9611± 0.3599) % dengan KV =2.1219 %. Hasil penetapan kadar sari yang larut dalam etanol memenuhi syarat yaitu tidak kurang dari 1.7 % . Nilai KV sesuia dengan yang dipersyaratkan yaitu tidak lebih dari 5 % untuk analisis bahan alam (Indrayanto, 1994). Dapat dilihat pada tabel 5.6 Tabel 5.6 Hasil Penetapan Kadar Sari Yang Larut Dalam Etanol No

Berat awal (g)

Berat akhir (g)

% kadar sari yang larut dalam etanol

1.

5.0066

0.8285

16.5481

2.

5.006

0.8615

17.2076

3.

5.00655

0.8585

17.1277 X SD KV

16.9611 0.3599 2.1219

SD KV

5.5.3 Penetapan Kadar Minyak Atsiri Metode : Stahl Tujuan : Mengetahui jumlah minyak atsiri yang terkandung dalam tanaman. Dari hasil tersebut diketahui bahwa kadar minyak atsiri simplisia rimpang laos tidak memenuhi syarat karena lebih kecil

SKRIPSI



54

dari nilai yang dipersyaratkan yaitu tidak kurang dari 0.5 % v/b. Dapat dilihat pada tabel dibawah ini 5.7 Tabel 5.7 Hasil penetapan kadar minyak atsiri No

Berat sampel (g)

Volume minyak (ml)

% v/b

1.

20.0002

0.07

0.35

2.

20.0002

0.07

0.35

3.

20.0002

0.07

0.35 0.35

X

0

SD

0

KV

5.5.4 Penetapan Susut Pengeringan Metode

: Gravimetri

Tujuan

: Memberikan batasan maksimal rentang tentang besarnya

senyawa

yang hilang pada proses pengeringan. Susut pengeringan simplisia rimpang laos= (14.3990 ±

0.1720) % dengan KV =1.1945 %. Nilai KV sesuai dengan yang dipersyaratkan yaitu tidak lebih dari 5 % untuk analisis bahan alam (Indrayanto, 1994). Dapat dilihat pada tabel Tabel 5.8 Hasil Penetapan Susut Pengeringan No

Berat awal (g)

Berat yang hilang (g)

% susut pengeringan

1.

1.0003

0.1433

14.3257

2.

1.0002

0.1428

14.2757

3.

1.0003

0.1460

14.5956

SKRIPSI

X

14.3990

SD

0.1720

KV

1.1945



55

5.5.5 Penetapan Kadar Abu Metode

: Gravimetri

Tujuan

: Memberikan gambaran awal jumlah total material yang

tersisa setelah pemijaran, yang terdiri dari abu-fisiologis yang berasal dari tanaman itu sendiri, dan abu non-fisiologis yang merupakan residu dari senyawa extraneous yang menempel pada permukaan tanaman. Kadar abu simplisia rimpang laos= (7.5285± 0.1623) % dengan KV =2.1558 %. Hasil penetapan kadar abu tidak memenuhi syarat karena kadar abu yang didapat 7.5285 % sedangkan yang tertera pada MMI adalah tidak lebih dari 3.9 %.. Nilai KV sesuai dengan yang dipersyaratkan yaitu tidak lebih dari 5 % untuk analisis bahan alam (Indrayanto, 1994). Dapat dilihat pada tabel 5.9 Tabel 5.9 Hasil Penetapan Kadar Abu No

Berat awal (g)

Berat akhir (g)

% kadar abu

1.

2.0019

0.1571

7.8475

2.

2.0020

0.1490

7.4425

3.

2.0019

0.1503

7.5078

4.

2.0018

0.1479

7.3883

5.

2.0019

0.1499

7.4878

6.

2.0020

0.1501

7.4975 X SD KV

SKRIPSI

7.5285 0.1623 2.1558



56

5.5.6 Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Dalam Asam Metode

: Gravimetri

Tujuan

: Memberikan gambaran kandungan mineral internal dan

eksternal yang tidak larut dalam asam. Kadar abu tidak larut asam simplisia rimpang laos= (2.9255± 0.1157) % dengan KV =3.9549 %. Nilai KV sesuai dengan yang dipersyaratkan yaitu tidak lebih dari 5 % untuk analisis bahan alam (Indrayanto, 1994). Dapat dilihat pada tabel 5.10 Tabel 5.10 Hasil Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Dalam Asam No

Berat awal (g)

Berat akhir (g)

% kadar abu tidak larut asam

2.0018

0.0561

2.8025

2.0019

0.0607

3.0321

2.0020

0.05589

2.9420 X

2.9255

SD

0.1157

KV

3.9549

5.5.7 Penetapan Kadar Abu Larut Dalam Air Metode

: Gravimetri

Tujuan : Memberikan gambaran kandungan mineral internal dan eksternal yang larut dalam air. Kadar abu larut air simplisia rimpang laos= (2.9720± 0.0328) % dengan KV =1.1036 %. Nilai KV sesuai dengan yang dipersyaratkan yaitu tidak lebih dari 5 % untuk analisis bahan alam (Indrayanto, 1994). Dapat dilihat pada tabel 5.11

SKRIPSI



57

Tabel 5.11 Hasil Penetapan Kadar Abu Larut Dalam Air

No

Berat awal (g)

Berat akhir (g)

% kadar abu larut air

1.

2.0019

0.0602

3.0071

2.

2.0020

0.0589

2.9420

3.

2.0019

0.0594

2.9671 X

2.9720

SD

0.0328

KV

1.1036

5.6 Destilasi Minyak Atsiri Bahan penelitian adalah rimpang laos (Alpinia galanga) yang diperoleh dari desa pelaosan, Magetanyang pada bulan Maret telah diidentifikasi di UPT Balai Konservasi Tumbuhan Kebun Raya Purwodadi, Pasuruan. Rimpang laos yang telah dirajang dengan ukuran lebih kurang 10 cm didestilasi menggunakan alat destilasi air- uap air. Dari 12,452 kg rimpang laos segar didapatkan 2,5 ml minyak atsiri ( kadar minyak atsiri = 20.0770 % v/b).

SKRIPSI



58

5.7 Uji Kandungan Minyak Atsiri menggunakan GC-MS Identifikasi

komponen

minyak

berdasarkan

pada

perbandingan masing-masing spektra dengan yang terdapat pada database. library yang digunakan pada GC-MS ini adalah database NIST02.L dan database Wiley275.L. Berikut adalah hasil uji kandungan minyak atsiri:

Gambar 5.20 profil kromatogram GC-MS minyak atsiri Alpinia galanga L

SKRIPSI



Tabel 5.12 Komponen minyak atsiri Alpinia galanga menggunakan GC-MS menggunakan pelarut n-heksan

Retention

Peak area (%)

Komponen

4.68

5.66

Eucalyptol

5.99

0.09

P-Menth-1(7)-en-9-ol

6.69

0.09

Trans-p-Menth-2-en-1,8-d

Time (min)

iol 6.79

1.04

3-cyclohexen-1-ol

7.03

0.89

α-terpineol

8.27

0.22

4-allylphenol

8.45

0.07

1,2,3,4,5,8-hexahydronap hthalena

9.03

4.81

phenol

9.37

0.33

Geranyl acetat

9.53

0.18

Caryophyllene

9.64

2.22

cyclohexane

9.79

1.66

benzene

SKRIPSI


59


10.07

3.21

caryophyllene

10.34

4.00

(E)-β-Famesene

10.53

0.93

Alpha-caryophyllene

10.68

3.08

Cinnamic acid

10.86

2.56

D-Germacrene

11.06

1.97

Patchoulene

11.33

2.88

Eugenol acetate

11.78

0.75

(E,E)-Farnesyl acetate

12.23

1.43

Alloaromadedrene

12.35

0.44

Viridiflorol

12.46

0.74

naphthalene

13.11

10.87

Aromadendrene

13.93

1.07

2,5-Furandione

14.31

25.00

2-propenoic acid

SKRIPSI


60


15.20

2.08

(E)-Farnesyl acetate

18.04

1.66

n-Hexadecanoic acid

61

Kandungan terbesar dari minyak atsiri berdasarkan hasil GC-MS adalah 2-propenoic acid (25%), Aromadendrene (10.87%), eucalyptol

(5.66%),

(E)-β-Famesene

(4.00%),

caryophyllene

(3.21%). 5.8 Uji Aktivitas Antimikroba Penentuan aktivitas antimikroba dan Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) minyak atsiri laos dilakukan dengan metode pengenceran dalam agar. Mikroba uji yang digunakan adalah Staphylococus aureus ATCC 6538, Eschericia coli ATCC 8739 dan Candida albicans ATCC 10231. Pengulangan dilakukan 3 kali untuk masing-masing mikroba uji dan pengamatan ada tidaknya pertumbuhan dilakuakn secara visual. Hasil penelitian uji aktivitas antimikroba minyak atsiri laos yang telah dilakukan menunjukan bahwa minyak atsiri tersebut pada Staphylococus aureus dan Candida

albicans

mampu

menghambat

pertumbuhan

pada

konsentrasi 0.093% v/v pada Candida albicans dan konsentrasi 0.06% v/v pada Staphylococus aureus, sedangkan pada Eschericia coli tidak terjadi hambatan sama sekali. Hasil dapat dilihat pada tabel berikut.

SKRIPSI



62

Tabel 5. 13 Aktivitas Antijamur dari Minyak Atsiri Alpinia galanga terhadap Candida albicans

Kadar larutan uji

Ada / Tidak nya

( % v/v )

pertumbuhan

KHM yang didapat

0,015 0,031

Ada

0,062 0,083 0,093

0,093% v/v

0,125 0,250

Tidak ada

0,500 1,000

Tabel 5.14 Aktivitas Antibakteri dari Minyak Atsiri Alpinia galanga terhadap Eschericia coli

Kadar larutan uji

Ada / Tidak nya

( % v/v )

pertumbuhan

KHM yang didapat

0,250 0,375 0,500 0,750

Ada

Tidak dapat ditentukan

1,000 1,500

SKRIPSI



63

2,000 2,500 Tabel 5.15 Aktivitas Antibakteri dari Minyak Atsiri Alpinia galanga terhadap Staphylococcus aureus

Kadar larutan uji

Ada / Tidak nya

( % v/v )

pertumbuhan

KHM yang didapat

0,015 0,031 0,040

Ada

0,050 0,062

0,062 % v/v

0,125 0,250

Tidak ada

0,500 1,000

SKRIPSI



73

BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN 7.1 Kesimpulan 1.

Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa rimpang Alpinia galanga yang berasal dari desa Sambilawang Kecamatan Dlanggu Kabupaten Mojokerto memenuhi standar kualitas yang ditetapkan oleh MMI dengan uraian sebagai berikut:

A.

Ciri makroskopik dan mikroskopik rimpang Alpinia galanga : 

Ciri makroskopik meliputi panjang (7-15 cm); lebar (2-3 cm); bentuk(silindris); akar kecil (ada); bentuk (bermacam-macam).



Ciri anatomi rimpang Alpinia galanga : epidermis dengan sel agak pipih, parenkim korteks, endodermis, serabut sklerenkim, berkas pembuluh tipe kolateral tertutup, amilum yang mempunyai bentuk lonjong dan bulat telur dengan lamela tidak jelas.

B.

Hasil skrining didapatkan mengandung senyawa golongan flavonoid dan terpenoid.

C.

Parameter fisiko-kimia rimpang Alpinia galanga memenuhi standar dengan nilai KV sesuai dengan yang dipersyaratkan, dengan uraian sebagai berikut : 

Kadar Sari Yang Larut Dalam Air (33.1228± 0.6608) %



Kadar Sari Yang Larut Dalam Etanol (16.9611± 0.3599) %



Penetapan Kadar Minyak Atsiri 0.35% v/b



Susut Pengeringan (14.3990 ± 0.1720) %



Penetapan Kadar Abu (7.5285± 0.1623) %



Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Dalam Asam (2.9255±

0.1157) % 

Penetapan Kadar Abu Larut Dalam Air (2.9720± 0.0328) %

SKRIPSI



2.

74

Minyak atsiri Alpinia galanga mempunyai aktivitas antimikroba terhadap Staphylococcus aureus dengan KHM 0,06% v/v atau sebesar 0,059 mg/ml , Candida albicans dengan KHM 0,093% v/v atau sebesar 0,091 mg/ml , tapi minyak ini tidak dapat menghambat pertumbuhan Escherichia coli.

7.2 Saran. 1.

Melakukan penelitian lebih lanjut tentang aktivitas antimikroba minyak atsiri Alpinia galanga terhadap jenis mikroba lain.

SKRIPSI



75

DAFTAR PUSTAKA Depkes RI, 1995. Farmakope Indonesia edisi IV, Jakarta : Departemen Kesehatan

Republik Indonesia

Depkes RI, 2014. Farmakope Indonesia edisi V, Jakarta : Departemen Kesehatan

Republik Indonesia

Depkes RI, 2000. Parameter standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta:

Departemen Kesehatan Republik Indonesia

Depkes RI, 1978. Materia Medika Indonesia Jilid II. Jakarta: Departemen

kesehatan

Republik Indonesia

Depkes RI, 1987. Analisis Obat Tradisional. Jilid I, Jakarta Guenther, Ernest. 1978. Minyak Atsiri, Jilid I. Jakarta: UI Press Harborne, J. Phytochemical Methods, a Guide to Modern Techniques of Plant Analysis. London: Chapman and Hall, 1973. Sinaga

Erna.

Alpinia

galanga

(L.)

Willd.

[Internet].

c2005

http://www.iptek.apjii.or.id/artikel/ttg_tanaman_obat/unas/lengkuas. pdf. Fong, H., M. Tin-Wa, and N Fransworth. Phytochemical Screening. Chicago: Department

of Pharmacognosy of Illions Ascriptove

Medical Center, 1990. Jawetz, E., J.L Melnick, E.A Aldelberg, G.F Brooks, J.S. Butel, and Ornston. Medical

Microbiology.

London:

Prectice

Hall

International inc., 1995. Jawetz, E., Melnick, J.L. and Adelberg, E.A (2005) Mikrobiologi Kedokteran. Buku 1. Penerbit Salemba Medika. Jakarta. Lennete, E.N. Manual of clinic Microbiology. USA: Prectice Hall International Inc., 1975.

SKRIPSI



76

Malavadhani, U.V. Standardisation and Quality Control of Multiherbal Formulations. India: Regional Research Laboratory Bhubaneswar, n.d. Martin, Alfred, and et al. Farmasi Fisik : Dasar-Dasar Kimia Fisik dalam Ilmu Farmasetik. Jakarta: UI Press, 1990. Sirait, Midian. Cara Pembuatan Simplisia. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 1985. Rios, J.L, Recio M.C, and A Villar. Screening Method for Nature Product with Antimicrobial Activity: A Review of Literature. Journal of Ethnopharmacology, 1988: 127-149. Backer, C.a., et al., 1968. Flora of java. Volume 3., Nordhlof NU, Groningen., The

Netherlands., p.46-48

Midrian Sirait dkk, 1983. Pemanfaatan Tanaman Obat, Edisi Ketiga. Departemen

Kesehatan

Republik Indonesia, Jakarta, hal 80

Mulja, M., dan Suharman, 1995. Analisis Instrumental. Surabaya : Airlangga Jirawan,

University

O., Tomoko,

Antimicrobial

Press,

S., Piyawan, properties

galangal (Alpinia galanga Linn) on Published by

hal 236-285 G.,

and

Griangsak, E., 2006. action

of

Staphylococcus aureus.

Elsivier Ltd.

Chan, Eric, WC., et al, 2011. Antioxidant and antibacterial properties of Alpinia

galanga,

(Zingiberaceae).

Curcuma

galanga

and

Etlingera

elatior

Pharmacognosy journal, Vol. 3, p.54-61

Dilip et al, 2012. Pharmacognosy study of Kakamichi (Solanum nigrum Linn).

Journal of Pharmaceutical and Scientific Innovation.

Srividya et al, 2010 Antioxidant and antidiabetic activity of Alpinia galanga.

International Journal of Pharmacognosy and

phytochemical Research. Vol.3,

SKRIPSI

p 6-12



77

Zaini, N., & Indrayanto, G. 1978. Cara-cara Skrining Fitokimia. Surabaya :

Fakultas Farmasi Universitas airlangga.

Paliwal, P., Pancholi, S.,& Patel, R.K. 2011. Pharmacognostic parameter for

Evaluation

of the rhizomes of curcuma

caesia. Vol.2, p.56-61 Mangestuti, & Purwitasari, N. 2008. Kandungan Kimia Minyak Atsiri dan Aktivitas Antimikroba Rimpang Jahe Gajah Berasal Dari Indonesia. Jurnal Bahan Alam

Indonesia, Vol. 6 No.6, p. 213-216

Nurwantoro dan Abbas, S. (2001) Mikrobiologi Pangan Hewani Nabati. Penerbit Kanisius, Yogyakarta. Paryati, S.P.Y. (2002) Patogenesis Mastitis Subklinis pada Sapi Perah yang

disebabkan oleh Staphylococcus aureus, Makalah

pengantar Falsafah Sains.

Institute Pertanian Bogor.

Todar, K. (1998) Bacteriology 330 Lecture Topics : Staphylococcus. Kenneth Todar

University

of

Wisconsin

Departement

of

Bacteriology, Wisconsin, USA. Todar, K. (2002) Staphylococcus Bacteriology at UW-Bacteriology 330 Home page

1-7.

Indrayanto, G. 1994. Metode Validasi Pada Analisis, Prosiding Pendidikan

berkelanutan Apoteker, Pensahihan Analisis KCKT

dan Densito-meter KLT,

Fakultas

Farmasi

Universitas

Airlangga-Ikatan Sarjana Farmasi Indonesia. Price,Shirley dan Price, Line, 1997. Aromaterapi bagi profesi Kesehatan, Alih Bahasa Andry

Hartanto,

Penerbit

Buku

Kedokteran EGC, Jakarta, hal.24,71-76,86 Rosanti, Pertiwi, 2002. Intensif Aromaterapi Untuk Suatu Kesehatan Eksklusif, Dexa

Media, vol 15, No 3, hal 100-101

Sahm, D.F., Washington II, J.A., 1991. Antibacterial Susceptibility Test : Dilution SKRIPSI

Method, in : Balows, A., Manual of Clinical



Microbiology, 5th ed., American

Society

78

for

Microbiology,

Washington, p.1105-1115 Mamahit, L., & N.H., S. 2010. Suatu Senyawa asam organik yang diisolasi dari daun gedi (Abelmoschus manihot L. Medik) Asal Sulawesi Utara. Chem. Prog., page 42-45 Sumardji, S., dkk.1989. Analisis Bahan Makanan dan Pertanian. Yogyakarta:

Penerbit Liberti.

Burt S. 2004. Essential Oil: Their antibacterial properties and potential application in food: A Review. Int.J.Food Microbiol. Vol 94:233-253 Wagner H, Houston J, Rowlink F. 1977. New natural Product and Plant with

Pharmacological, Biological or Therapeutical

Activity Spinger. Verlag Berlin,

Heidelberg, New York:142

Habsah, M., Amran, M., Mackeen, M,M., Lajis, N. H., Kikuzaki, H., Nakatani, N., Rahman, A,a., Ghafar, Ali, A.M., 2000. Screening of Zingiberaceae extracts for

antimicrobial and

activities. Journal of Ethnopharmacology,

antioxidant

p.403-410.

Weerakkody et al, 2010. Synergistic antimicrobial activity of galangal (Alpinia galanga), rosemary(Rosmarinus officinalis) and lemon iron bark (Eucalyptus staigerana) extract. wileyonlinelibrary.com Chitra, M & Thoppil, J.E., 2008. A pharmacognostical report on the rhizome of

Alpinia galanga Linn.(Willd). University of Calicut,

Kerala, India Wei, Yea hsu, Simonne, A., weissman A., Kim, M., 2010. Antimicrobial activity of

greater

galangal

[Alpinia

Flowers. Food Sci Biotechnol,

galanga(Linn)Swartz.]

vol 19, p.873-880

Sheng Xie, Zhi., Jun Xu, Xin.,Yan Xie, Chun., Yun huang, Jie., Yang, Mei., Po yang,

De., 2012. Volatile component of Rhizome

Alpinie Officinarum using SKRIPSI

three

different extraction



79

methods combined with gas chromtography-mass spectrometry.Journal of Pharmaceutical Analysis, vol 3 p. 215-220.

SKRIPSI


SKRIPSI STUDI FARMAKOGNOSI RIMPANG DAN UJI AKTIVITAS

Recommend Documents