PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI PLAGIAT

Download penelitian dan penyusunan skripsi berjudul “Efek Antiinflamasi Bunga Telang. ( Clitoria ternatea L.) pada Udema Telapak Kaki Mencit Betina T...

0 downloads 508 Views 3MB Size
PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

EFEK ANTIINFLAMASI INFUSA BUNGA TELANG ((Clitoria ternateaL.) PADA UDEMA TELAPAK KAKI MENCIT BETINA TERINDUKSI KARAGENIN DENGAN PENGUKURAN JANGKA SORONG

SKRIPSI DisusununtukMemenuhi Salah SatuSyarat MemperolehGelarSarjanaFarmasi (S. Farm) MemperolehGelarSarjana Program StudiFarmasi

Oleh: Devi Yanthre S. Manurung NIM : 098114126

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2013

i

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

ii

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

iii

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

HALAMAN PERSEMBAHAN

Bersama Tuhan setiap penghalang bisa jadi peluang, setiap kesulitan bisa jadi kesempatan, setiap tantangan bisa jadi kemenangan. “There’s a time and place for everything, for everyone”

Kupersembahkan skripsi ini untuk: Sahabat sejatiku Tuhan Yesus Kristus dan Bunda Maria yang lembut hati Bapak dan Mama tercinta atas kasih sayang yang sejati dan tak terhingga Kakakku Aurora dan adikku Audrin yang terkasih Para Sahabat dan Almamaterku

iv

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

v

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

vi

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

PRAKATA

Puji dan syukur penulis haturkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa, atas berkat, kasih dan penyertaan-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penyusunan skripsi berjudul “Efek Antiinflamasi Bunga Telang (Clitoria ternatea L.) pada Udema Telapak Kaki Mencit Betina Terinduksi Karagenin dengan Pengukuran Jangka Sorong”. Skripsi ini merupakan salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi, Universitas, Sanata Dharma, Yogyakarta. Penyusunan skripsi ini tidak lepas dari bantuan berbagai pihak, oleh karena itu pada kesempatan ini penulis ingin menyampaikan terima kasih kepada: 1. Dekan Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. 2. Bapak Ipang Djunarko, M.Sc., Apt., selaku Dosen Pembimbing atas semangat, bimbingan, pengarahan dan dukungan selama penelitian sampai penyusunan skripsi ini. 3. Ibu Phebe Hendra, M.Si., Ph.D., Apt., selaku Dosen Penguji yang telah memberikan saran dan kritik hingga skripsi ini tersusun. 4. Bapak Prof. Dr. C. J. Soegihardjo, Apt., selaku Dosen Penguji yang telah memberikan saran dan kritik hingga skripsi ini tersusun. 5. Dra. Maria Margaretha Yetty Tjandrawati, M.Si., selaku Dosen Pembimbing Akademik penulis atas bimbingan, pengarahan dan dukungan selama ini. 6. Mas Kayat, Mas Parjiman, dan Mas Heru yang telah membantu dalam penelitian.

vii

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

7. Teman-teman penelitian, Febria Sinaga, Endang M. Tabalubun dan Sr. Novita Sagala. Teman kelas semenjak semester 1 dan sahabat dekat selama 4 tahun. Kalian adalah sahabat yang berharga. Terima kasih buat dukungan dan bantuannya selama ini. 8. Sahabat-sahabat penulis, Friska Ambuk, Regina Arningsari, Rosa Delima, terima kasih untuk kebersamaan kita selama ini serta teman-teman FKK B Fakultas Farmasi 2009, terima kasih atas dukungan dan pertemanan yang telah terjalin selama ini. 9. Sahabat-sahabat terbaik Oksendi Sihombing, Tiurma Siahaan dan Siska Saragih, terimakasih untuk kasih sayang dan dukungannya selama ini. 10. Nichkhun Horvejkul dan 2PM sebagai idola dan inspirasi bagi penulis. 11. Bapak dan Ibu “Kos Meilani” yang seperti orang tua penulis di kota Yogyakarta ini. Terima kasih buat bantuan dan nasihatnya selama ini. 12. Serta semua pihak yang telah banyak membantu penulis dalam menyelesaikan skripsi ini, namun tidak dapat penulis sebutkan satu per satu. Penulis menyadari bahwa tidak ada manusia yang sempurna. Oleh karena itu, penulis mengharapkan adanya saran dan kritik yang membangun demi kemajuan di masa mendatang. Penulis juga berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi perkembangan ilmu pengetahuan. Yogyakarta, Juni 2013

Penulis

viii

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

DAFTAR ISI Halaman HALAMAN JUDUL................................................................................................ i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ..................................................... ii HALAMAN PENGESAHAN................................................................................ iii HALAMAN PERSEMBAHAN ............................................................................ iv PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI ................................................... v PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ................................................................ vi PRAKATA............................................................................................................ vii DAFTAR ISI.......................................................................................................... ix DAFTAR TABEL................................................................................................. xii DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... xiii DAFTAR LAMPIRAN........................................................................................ xiv INTISARI............................................................................................................ xvii ABSTRACT......................................................................................................... xviii BAB I PENGANTAR ............................................................................................. 1 A. Latar Belakang ................................................................................................. 1 1. Permasalahan............................................................................................... 3 2. Keaslian penelitian ...................................................................................... 4 3. Manfaat penelitian....................................................................................... 5 B. Tujuan Penelitian .............................................................................................. 5 1. Tujuan umum .............................................................................................. 5 2. Tujuan khusus ............................................................................................. 6

ix

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

BAB II PENELAAHAN PUSTAKA...................................................................... 7 A. Tanaman Telang (Clitoria ternatea L.)............................................................. 7 1. Klasifikasi dan nama daerah ....................................................................... 7 2. Morfologi .................................................................................................... 7 3. Ekologi ........................................................................................................ 8 4. Kandungan fitokimia................................................................................... 8 5. Antosianin ................................................................................................... 9 6. Khasiat tumbuhan...................................................................................... 10 B. Infusa............................................................................................................... 11 C. Inflamasi.......................................................................................................... 11 1. Pengertian inflamasi.................................................................................. 11 2. Jenis inflamasi........................................................................................... 13 3. Metode uji inflamasi ................................................................................. 13 D. Karagenin ........................................................................................................ 15 E. Obat Anti Inflamasi Non Steroid .................................................................... 16 F. Cataflam® D-50 (Kalium Diklofenak) ............................................................ 17 G. Landasan Teori................................................................................................ 19 H. Hipotesis.......................................................................................................... 20 BAB III METODE PENELITIAN........................................................................ 21 A. Jenis dan Rancangan Penelitian ...................................................................... 21 B. Variabel dan Definisi Operasional .................................................................. 21 1. Variabel utama .......................................................................................... 21 2. Variabel pengacau..................................................................................... 21

x

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

3. Definisi Operasional ................................................................................. 22 C. Bahan Penelitian............................................................................................. 22 1. Hewan uji .................................................................................................. 22 2. Bahan uji ................................................................................................... 23 3. Bahan uji farmakologi............................................................................... 23 D. Alat Penelitian................................................................................................. 23 E. Tata Cara Penelitian ........................................................................................ 24 1. Determinasi tanaman................................................................................. 24 2. Pengumpulan bahan .................................................................................. 24 3. Pembuatan larutan karagenin 1%.............................................................. 24 4. Pembuatan infusa bunga telang................................................................. 25 5. Pembuatan larutan diklofenak................................................................... 25 6. Penentuan waktu pemberian kalium diklofenak .................................. ….25 7. Pembuatan inflamasi ................................................................................. 25 8. Dosis bunga telang .................................................................................... 26 9. Penentuan kontrol negatif ......................................................................... 26 10. Perlakuan pada hewan uji.......................................................................... 26 11. Penentuan persen (%) penghambatan inflamasi ....................................... 28 F. Analisis Hasil .................................................................................................. 28 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .............................................................. 30 A. Hasil Determinasi Tanaman............................................................................ 30 B. Infusa Bunga Telang ....................................................................................... 30 C. Efek Antiinflamasi Infusa Bunga Telang........................................................ 31

xi

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN................................................................ 40 A. Kesimpulan ..................................................................................................... 40 B. Saran................................................................................................................ 40 DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 41 LAMPIRAN.......................................................................................................... 45 BIOGRAFI PENULIS................................................................................... ……73

xii

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

DAFTAR TABEL Halaman Tabel I. Hasil pembuatan infusa bunga telang ...................................................... 31 Tabel II. Rata-rata persen penghambatan inflamasi pada setiap kelompok perlakuan dan hasil uji Mann Whitney masing-masing kelompok ......... 36

xiii

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

DAFTAR GAMBAR

Halaman Gambar 1. Bunga telang (Clitoria ternatea L.) .................................................... 8 Gambar 2. Struktur kimia antosianin .................................................................. 10 Gambar 3. Struktur kalium diklofenak................................................................ 18 Gambar 4. Skema jalannya penelitian................................................................. 27 Gambar 5. Kurva rata-rata udema kaki mencit yang diinduksi karagenin 1% selama 6 jam pengamatan.................................................................. 32 Gambar 6. Diagram batang AUC untuk masing-masing kelompok perlakuan beserta kontrol ................................................................................... 35 Gambar 7. Simplisia bunga telang (Clitoria ternatea L.) .................................... 50 Gambar 8. Sediaan infusa bunga telang (Clitoria ternatea L.)............................ 50 Gambar 9. Pembuatan udema kaki mencit dengan karagenin 1% ....................... 51 Gambar 10. Pengukuran udema kaki mencit menggunakan jangka sorong ......... 51 Gambar 11. Syringe per oral dan subplantar......................................................... 52

xiv

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman Lampiran 1. Surat determinasi tanaman telang (Clitoria ternatea L.)................ 46 Lampiran 2. Surat kalibrasi jangka sorong ......................................................... 47 Lampiran 3. Surat Ethical Clearance (EC)......................................................... 49 Lampiran 4. Bunga telang dan infusa bunga telang (Clitoria ternatea L.)......... 50 Lampiran 5. Pembuatan udema dan pengukuran udema kaki mencit................. 51 Lampiran 6. Alat spuit injeksi............................................................................. 52 Lampiran 7. Perhitungan dosis............................................................................ 53 Lampiran 8. Tabel selisih udema kaki mencit dengan perlakuan kontrol positif (kalium diklofenak 9,1 mg/Kg BB mencit) setelah injeksi karagenin 1% .................................................................................................... 55 Lampiran 9. Tabel selisih udema kaki mencit dengan perlakuan kontrol negatif (aquadest 25 g/Kg BB mencit) setelah injeksi karagenin 1% .......... 56 Lampiran 10. Tabel selisih udema kaki mencit dengan perlakuan infusa bunga telang dosis 328 mg/Kg BB mencit setelah injeksi karagenin 1% . 57 Lampiran 11. Tabel selisih udema kaki mencit dengan perlakuan infusa bunga telang dosis 655 mg/Kg BB mencit setelah injeksi karagenin 1%... 58 Lampiran 12. Tabel selisih udema kaki mencit dengan perlakuan infusa bunga telang dosis 1310 mg/Kg BB mencit setelah injeksi karagenin 1%. 59 Lampiran 13. Tabel perhitungan AUC masing-masing kelompok perlakuan infusa bunga telang beserta kontrol ............................................................ 60

xv

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

Lampiran 14. Tabel perhitungan persen (%) penghambatan inflamasi infusa bunga telang beserta kontrol positif (kalium diklofenak 9,1 mg/Kg BB mencit) ............................................................................................. 61 Lampiran 15. Hasil analisis uji Kruskal-Wallis .................................................... 62 Lampiran 16. Hasil analisis uji Mann-Whitney AUC antara kelompok aquadest 25 g/Kg BB mencit dan kalium diklofenak 9,1 mg/Kg BB mencit ...... 63 Lampiran 17. Hasil analisis uji Mann-Whitney AUC antara kelompok aquadest 25 g/Kg BB mencit dan infusa bunga telang dosis 655 mg/Kg BB mencit............................................................................................... 64 Lampiran 18. Hasil analisis uji Mann-Whitney AUC antara kelompok aquadest 25 g/Kg BB mencit dan infusa bunga telang dosis 328 mg/Kg BB mencit............................................................................................... 65 Lampiran 19. Hasil analisis uji Mann-Whitney AUC antara kelompok aquadest 25 g/Kg BB mencit dan infusa bunga telang dosis 1310 mg/Kg BB mencit............................................................................................... 66 Lampiran 20. Hasil analisis uji Mann-Whitney AUC antara kelompok kalium diklofenak 9,1mg/Kg BB mencit dan infusa bunga telang dosis 328 mg/Kg BB mencit ............................................................................ 67 Lampiran 21. Hasil analisis uji Mann-Whitney AUC antara kelompok kalium diklofenak 9,1mg/Kg BB mencit dan infusa bunga telang dosis 655 mg/Kg BB mencit ............................................................................ 68

xvi

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

Lampiran 22. Hasil analisis uji Mann-Whitney AUC antara kelompok kalium diklofenak 9,1 mg/Kg BB mencit dan infusa bunga telang dosis 1310 mg/Kg BB mencit ............................................................................ 69 Lampiran 23. Hasil analisis uji Mann-Whitney AUC antara kelompok infusa bunga telang dosis 328mg/Kg BB mencit dan infusa bunga telang dosis 655 mg/Kg BB mencit............................................................ 70 Lampiran 24. Hasil analisis uji Mann-Whitney AUC antara kelompok infusa bunga telang dosis 328 mg/Kg BB mencit dan infusa bunga telang dosis 1310 mg/Kg BB mencit.......................................................... 71 Lampiran 25. Hasil analisis uji Mann-Whitney AUC antara kelompok infusa bunga telang dosis 655 mg/Kg BB mencit dan infusa bunga telang dosis 1310 mg/Kg BB mencit.......................................................... 72

xvii

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

INTISARI

Bunga telang (Clitoria ternatea L.) mengandung senyawa antosianin golongan flavonoid. Antosianin mampu memperlambat penuaan, menghambat penyakit neurologis, inflamasi, diabetes, dan infeksi bakteri (Mazza, 2002cit., Rhone dan Basu, 2008). Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek antiinflamasi infusa bunga telang (Clitoria ternatea L.)terhadap udema telapak kaki mencit betina yang terinduksi karagenin. Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental murni dengan rancangan penelitian acak lengkap pola searah. Hewan uji dikelompokkan menjadi 5 kelompok. Kelompok kontrol negatif menerima aquadest 25 g/Kg BB, kelompok kontrol positif menerima Cataflam® D-50 (kalium diklofenak) 9,1 mg/Kg BB, dan kelompok lainnya menerima infusa bunga telang dengan dosis masing-masing 328; 655 dan 1310 mg/Kg BB mencit, secara per oral dalam dosis tunggal 15 menit sebelum injeksi subplantar dengan larutan karagenin 1%. Kaki mencit diukur dengan jangka sorong selama 6 jam, pada menit ke-0, 15, 30, 45, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240, 270, 300, 330, 360, kemudian dihitung selisih ukuran kaki kiri yang terinduksi dengan kaki kanan yang tidak terinduksi karagenin 1%. Data yang diperoleh dianalisis dengan uji Shapiro-Wilk, dilanjutkan analisis Kruskal-Wallis dan uji Mann-Whitney taraf kepercayaan 95%. Hasil penelitian menunjukkan bahwa infusa bunga telang yang diberikan secara per oral dapat menurunkan udema kaki mencit yang diinduksi karagenin 1%, namun efeknya tidak sebanding dengan kalium diklofenak 9,1 mg/Kg BB mencit. Hasil persentase penghambatan inflamasi yang ditimbulkan oleh infusa bunga telang dengan dosis 328; 655 dan 1310 mg/kg BB mencit berturut-turut sebesar 23,57%; 44,5% dan 27,95%. Kata kunci : infusa, bunga telang, antiinflamasi, Clitoria ternatea L.

xviii

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

ABSTRACT

Butterfly pea flower (Clitoria ternatea L.) contains flavonoidanthocyanin. Anthocyanin is able to reduce aging, proven neurological illness, inflammation, diabetes, and bacterial infection (Mazza, 2002 cit., Rhone and Basu, 2008). The research is aimed at discovering anti-inflammatory effect of butterfly pea flower infusion on carrageenan-induced edema in female mice. The research conducted with a pure experimental using the completely randomized design with direct pattern. The mice were grouped into five groups. Negative-controlled group received aquadest 25 g/kg BW, positive-controlled group received Cataflam® D-50 (calium diclofenac) 9.1 mg/kg BW, and other groups received infusion of the butterfly pea flowers with each dosage 328; 655 and 1310 mg/kg BW and was given orally per dosage, fifteen minutes before the sub plantar injection using 1% carrageenan. Edema was measured by using calliper digital for 6 hours (starting from the 0th, 15th, 30th, 45th, 60th, 90th, 120th, 150th, 180th, 210th,240th,270th, 300th, 330th, 360th minutes). Size of the induced edema and the non-induced 0.05 mL of 1% carrageenan was measure. The obtained data was analyzed using the Shapiro-Wilk test, continued by using the analysis of Kruskal-Wallis and Mann-Whitney test with the 95% trust scale. The result showed that the infusion of the butterfly pea flower which was given orally was able to reduce edema in the mice induced by 1% carrageenan. However, the effect was disproportionate to the calium diclofenac 9.1 mg/kg BW. The percentage of inflammation which was resulted by the infusion of the butterfly pea flower with dosage 328; 655 and 1310 mg/kg BW chart of the mice consecutively were 23.57; 44.5; and 27.95%. Keywords: infusion, butterfly pea flowers, anti-inflammation, Clitoria ternatea L.

xix

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

BAB I PENGANTAR

A. Latar Belakang Inflamasi merupakan tindakan protektif yang berperan dalam melawan agen penyebab jejas sel. Inflamasi melakukan misi pertahanannya dengan cara melarutkan, menghancurkan, atau menetralkan agen patologis (Kumar, Abbas, Fausto dan Mitchell, 2007). Pemberian obat antiinflamasi non steroid (OAINS) secara per oral sering dilakukan untuk menangani inflamasi tersebut. Akan tetapi, mayoritas obat antiinflamasi non steroid dapat mengiritasi lambung karena ketidakselektifan terhadap enzim siklooksigenase (COX). Hampir semua obat AINS bekerja pada isoform dari enzim sikloosigenase sehingga senyawa proteksi lambung yang seharusnya dihasilkan oleh enzim siklooksigenase-1 (COX-1) dihambat pembentukannya (Schror dan Meyer-Kirchrath, 2000). Derivat fenilasetat ini termasuk NSAID yang terkuat daya antiradangnya (Tjay dan Rahardja, 2002). Efek samping obat ini berupa gangguan gastrointestinal seperti mual, muntah, diare, kejang perut, dispepsia, kembung; sakit kepala dan erupsi kulit atau ruam (Anonim, 2009). Karena hal tersebut, maka muncul kecenderungan masyarakat untuk memanfaatkan tanaman sekitar sebagai pengobatan tradisional yang berkhasiat untuk mengatasi penyakit dan dianggap relatif lebih aman daripada produk obat sintetik.

1

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

2

Menurut Herman (2005), penduduk sakit di pedesaan Provinsi Jawa Barat melakukan pengobatan sendiri menggunakan obat tradisional. Salah satu koleksi yang menarik di desa tersebut adalah tanaman bunga telang (Clitoria ternatea L.). Masyarakat pada umumnya memanfaatkan bunga telang dengan merendamnya dalam air panas sehingga dapat diminum sebagai teh untuk mengurangkan sakit akibat sariawan (ulcer) mulut dan perawatan insomnia (susah tidur). Air rendaman bunganya dapat digunakan untuk obat tetes mata pada penderita mata merah atau konjungtivitis. Tanaman telang (Clitoria ternatea L.) merupakan tanaman polong multiguna karena selain untuk hiasan tanaman ini mengandung senyawa bioaktif yang berguna untuk pengobatan, termasuk dalam famili Fabaceae. Bunga telang memiliki aktivitas hambat tumbuh dengan konsentrasi hambat tumbuh minimal terhadap bakteri B. substilis, E. coli, dan P. aeruginosa dan Staph. aureus (Rokhman, 2007). Bunga Clitoria ternatea L. juga terbukti memiliki aktivitas antioksidan yang kuat dan dapat sebagai inklusi antioksidan dalam produk kosmetik (Kamkaen dan Wilkinson, 2009). Dari sejumlah senyawa flavonoid yang terdapat pada bunga telang, antosianin adalah yang paling utama. Antosianin adalah senyawa berwarna golongan flavonoid yang bertanggung jawab untuk kebanyakan warna merah, biru, dan ungu pada buah, sayur dan tanaman hias. Manfaatnya terhadap kesehatan tubuh telah banyak dilaporkan. Selain sebagai antioksidan yang berfungsi menangkap radikal bebas, antosianin juga berperan dalam pemeliharaan jaringan mata, antidiabetes, antiinflamasi, menjaga sistem imun dan mencegah

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

3

agregasi trombosit (Mukherjee, Kumar, dan Heinrich, 2008). Antosianin yang merupakan bagian flavonoid dapat menjadi inhibitor enzim siklooksigenase (COX). Antosianin akan mencegah sintesis prostaglandin (salah satu mediator inflamasi) dan menekan pengeluaran sel T. Sel imun yang berkomunikasi dengan sinyal kimia yang disebut sitokin akan dikendalikan oleh antosianin (Sandhar, Kumar, Prasher, Tiwari, Salhan, dan Sharma, 2011). Berdasarkan uraian di atas, maka peneliti tertarik untuk melakukan penelitian mengenai efek antiinflamasi infusa bunga telang. Untuk menguji efek antiinflamasi digunakan metode induksi karagenin 1% pada udema kaki belakang mencit betina, sehingga dapat mendukung data ilmiah lainnya dalam penggunaan dan pemanfaatan bunga telang (Clitoria ternatea L.) sebagai obat tradisional. 1. Permasalahan Berdasarkan uraian yang dikemukakan di atas, maka permasalahan yang diteliti adalah: a. Apakah infusa bunga telang (Clitoria ternatea L.) memiliki efek terhadap penurunan inflamasi akibat injeksi karagenin 1% pada udema kaki belakang mencit? b. Seberapa besar persentase infusa bunga telang (Clitoria ternatea L.) dalam memberikan efek penghambatan inflamasi akibat injeksi karagenin 1% pada udema kaki belakang mencit?

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

4

2. Keaslian penelitian Sejauh yang diketahui penulis, penelitian mengenai uji efek antiinflamasi bunga telang pada mencit betina dengan pengukuran jangka sorong belum pernah dilakukan. Adapun penelitian terkait tentang bunga telang (Clitoria ternatea L.) adalah sebagai berikut: a. Aktivitas Antibakteri Filtrat Bunga Telang (Clitoria ternatea L.) terhadap Bakteri Penyebab Konjungtivitis (Rokhman, 2007). Hasil penelitian menunjukkan filtrat bunga telang memiliki aktivitas hambat tumbuh dengan konsentrasi hambat tumbuh minimal sebesar 50 mg/mL terhadap bakteri B. substilis, E. coli, dan P. aeruginosa dan 125 mg/mL terhadap bakteri Staph. aureus. b. The antioxidant activity of Clitoria ternatea flower petal extracts and eye gel (Kamkaen dan Wilkinson, 2009). Hasil penelitian menunjukkan ekstrak air bunga Clitoria ternatea L. terbukti memiliki aktivitas antioksidan yang lebih kuat (diukur dengan aktivitas scavenging DPPH) dari ekstrak etanol (nilai IC50 adalah 1 mg/mL dan 4 mg/mL). Ekstrak air yang tergabung dalam sebuah formulasi gel mata juga ditunjukkan dapat mempertahankan aktivitas ini. Total kandungan fenolik 1,9 mg/g ekstrak yang setara dengan asam galat. Data dari penelitian ini mendukung penggunaan ekstrak bunga C. ternatea sebagai inklusi antioksidan dalam produk kosmetik.

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

5

c. Evaluation of Antiasthmatic Activity of Clitoria ternatea L. roots (Taur dan Patil, 2011). Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa LD50 dari ekstrak akar Clitoria ternatea lebih dari 1.300 mg/kg. Ekstrak akar Clitoria ternatea secara signifikan menurunkan susu yang diinduksi leukositosis dan eosinofilia, melindungi telur albumin yang diinduksi degranulations sel mast pada tikus dan menghambat daerah kebocoran pewarna biru dianafilaksis kutan pasif pada tikus di (100-150 mg/kg, ip). Studi fitokimia mengamati adanya steroid, saponin, flavonoid, dan glikosida. 3. Manfaat penelitian a. Manfaat teoritis Penelitian ini diharapkan dapat bermanfaat untuk perkembangan ilmu kefarmasian tentang infusa bunga telang (Clitoria ternatea L.) yang bermanfaat sebagai antiinflamasi. b. Manfaat praktis Penelitian diharapkan dapat memberikan informasi ilmiah mengenai efek antiinflamasi infusa bunga telang (Clitoria ternatea L.) akibat injeksi karagenin 1% pada udema kaki belakang mencit.

B. Tujuan Penelitian 1. Tujuan umum Memperoleh informasi mengenai manfaat bunga telang (Clitoria ternatea L.) sebagai antiinflamasi.

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

6

2. Tujuan khusus 1. Membuktikan bahwa infusa bunga telang (Clitoria ternatea L.) memiliki efek terhadap penurunan inflamasi akibat injeksi karagenin 1% pada udema kaki belakang mencit. 2. Menentukan persentase infusa bunga telang (Clitoria ternatea L.) dalam memberikan efek penghambatan inflamasi akibat injeksi karagenin 1% pada udema kaki belakang mencit.

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

BAB II PENELAAHAN PUSTAKA

A. Tanaman Telang (Clitoria ternatea L.) 1. Klasifikasi dan nama daerah Tanaman telang berdasarkan taksonomi termasuk dalam kingdom Plantae, subkingdom Tracheobionta, divisi Spermatophyta, subdivisi Magnoliophyta, kelas Magnoliopsida, subkelas Rosidae, bangsa Fabales, suku Fabaceae, marga Clitoria, species Clitoria ternatea L. (Michael dan Kalamani, 2003). Nama daerah: bunga biru, bunga talang (Sumatera); kembang telang (Sunda); menteleng, kembeng teleng (Jawa); bunga talang (Sulawesi); bisi, sayama gulele (Maluku); dan bunga temen raleng (Bugis) (Utami, 2008). 2. Morfologi Ciri-ciri umum: merupakan tanaman perdu yang tumbuh merambat. Batang berambut halus, pangkal batang berkayu, batang muda bewarna hijau, dan batang tua bewarna putih kusam. Daun majemuk dengan pertulangan menyirip ganjil. Anak daun berjumlah 3-9 lembar, bewarna hijau, bertangkai pendek, berbentuk oval atau elips, pangkal daun runcing, sedangkan ujungnya tumpul. Di ketiak daun terdapat daun penumpu yang berbentuk garis. Bunga tunggal, muncul dari ketiak daun, dan bentuknya menyerupai kupu-kupu. Kelopak bunga bewarna hijau, sedangkan mahkota bunga bewarna biru nila dengan warna putih di tengahnya. Buah polong, berbentuk pipih memanjang. Polong muda bewarna hijau, dan polong matang bewarna kecokelatan (Utami, 2008).

7

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

8

3. Ekologi Lokasi tumbuh yang sering dijumpai dan tumbuh subur yaitu di daerah basah, berpasir dengan ketinggian 700 meter di atas permukaan laut. Tanaman ini dapat tumbuh subur dalam medium yang agak lembab atau tanah yang mempunyai kandungan humus yang tinggi. Tanaman ini dapat membiak dengan cara stek batang atau biji. Tanaman telang tergolong terna menahun karena pangkal tanamannya berkayu, batangnya merambat dengan pola membelit ke kiri. Tanaman rambat ini biasa digunakan sebagai tanaman penghias pagar. Bunganya yang bewarna biru keunguan akan mekar sepanjang tahun seperti terlihat pada gambar 1 (Michael dan Kalamani, 2003).

Gambar 1. Bunga telang (Clitoria ternatea L.)

4. Kandungan fitokimia Fitokimia adalah semua senyawa alami pada tanaman yang memiliki efek fisiologis yang positif bagi manusia. Di antara fitokimia yang terpenting adalah senyawa-senyawa fenol, khususnya dari golongan flavonoid atau polifenol. Senyawa flavonoid memiliki struktur kimia yang khas, yakni terdiri dari 15 atom

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

9

karbon yang tersusun dalam kerangka C6-C3-C6. Berdasarkan perbedaan pada cincin furannya flavonoid dibagi menjadi 5 kelompok, yaitu antosianin, flavonol, flavanon, flavon, dan flavonol (Andersen dan Markham, 2006). Mahkota bunga telang kaya dengan kandungan kimia yang sudah diketahui kadarnya. Hasil penelitian Kazuma, et al (2003) menunjukkan bahwa ekstrak mahkota bunga telang mengandung 14 flavonol glikosida serta 19 antosianin. Empat di antaranya delfinidin dan 15 lainnya berupa ternatin. 5. Antosianin Flavonoid merupakan kelompok zat polifenol yang menunjukkan sifat antiinflamasi

dan

antioksidan.

Flavonoid

dilaporkan

dapat

menangkap

superoksigen, radikal hidroksi dan peroksinitrit, dan menghambat berbagai enzim, termasuk siklooksigenase, myeloperoksidase, NADPH oksidase dan xanthine oksidase, yang semuanya memainkan peran penting dalam reaksi inflamasi (Rao et al, 2003). Dari sejumlah senyawa flavonoid yang terdapat pada bunga telang, antosianin adalah yang paling utama. Antosianin adalah senyawa berwarna golongan flavonoid yang bertanggung jawab untuk kebanyakan warna merah, biru, dan ungu pada buah, sayur dan tanaman hias. Manfaatnya terhadap kesehatan manusia telah banyak dilaporkan. Beberapa peneliti melaporkan bahwa antosianin merupakan antioksidan yang kuat (Rein, 2005). Antosianin juga dilaporkan memiliki kemampuan untuk mencegah kanker (Wang dan Stoner, 2008), memperlambat penuaan, menghambat penyakit neurologis, inflamasi, diabetes dan infeksi bakteri (Mazza, 2002 cit., Rhone & Basu, 2008).

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

10

Struktur kimia dari antosianin adalah sebagai berikut:

Gambar 2. Struktur kimia antosianin (Nakajima, Tanaka, Seo, Yamakazi, dan Saito, 2004)

6. Khasiat tumbuhan Tanaman telang diduga berkhasiat sebagai tonikum otak yang sangat baik dan berguna untuk mengatasi infeksi mata dan tenggorokan, penyakit kulit, gangguan urinaria, sariawan mulut atau ulcer dan keperluan anti racun (Malabodi dan Nataraja, 2001). Tanaman telang juga berkhasiat sebagai

obat bronkis, demam,

menghilangkan dahak, mengatasi radang mata merah, abses, bisul, untuk cuci darah, dan sebagai bahan pewarna (Utami, 2008). Daunnya dapat dimakan sebagai lalap maupun pakan ruminansia, tumbukan daunnya bermanfaat untuk mempercepat pematangan bisul, bermanfaat sebagai obat batuk jika diformulasikan dengan bawang merah dan adas pulosari (Herman, 2005). Bunganya yang bewarna biru dapat digunakan untuk pewarna makanan. Bunganya direndam air panas dan diminum seperti teh utuk mengurangkan sakit akibat ulcer mulut dan perawatan insomnia. Air rendaman bunganya dapat digunakan untuk obat tetes mata pada penderita konjungtivitis (Herman, 2005).

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

11

B. Infusa Infusa adalah sediaan cair yang dibuat dengan mengekstraksi simplisia nabati dengan air pada suhu 90o selama 15 menit (Depkes RI, 1995). Pembuatan infusa dengan mencampur simplisia dengan derajat halus yang sesuai dalam panci dengan air secukupnya, dipanaskan di atas tangas air selama 15 menit terhitung mulai suhu mencapai 90o sambil sekali-sekali diaduk. Serkai selagi panas melalui kain flannel, ditambahkan air panas secukupnya melalui ampas hingga diperoleh volume infusa yang dikehendaki (Depkes RI, 1995). Infusa adalah hasil proses penyarian yang umumnya digunakan untuk menyari zat kandungan aktif yang larut dalam air dari bahan-bahan nabati. Penyarian dengan cara ini menghasilkan sari yang tidak stabil dan mudah tercemar oleh kuman dan kapang. Oleh sebab itu, sari yang diperoleh dengan cara ini tidak boleh disimpan lebih dari 24 jam (Depkes RI, 1986).

C. Inflamasi 1. Pengertian inflamasi Inflamasi merupakan respons terhadap jejas pada jaringan hidup yang memiliki vaskularisasi. Respons ini dapat ditimbulkan oleh infeksi mikroba, agen fisik, zat kimia, jaringan nekrotik atau reaksi imun. Inflamasi bertujuan untuk menyekat serta mengisolasi jejas, menghancurkan mikroorganisme yang menginvasi tubuh serta menghilangkan aktivitas toksinnya, dan mempersiapkan jaringan bagi kesembuhan serta perbaikan. Meskipun pada dasarnya merupakam respons yang bersifat protektif, namun inflamasi dapat pula berbahaya; respons ini

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

12

dapat menyebabkan reaksi hipersensitivitas yang bisa membawa kematian atau kerusakan organ yang persisten serta progresif akibat inflamasi kronik dan fibrosis yang terjadi kemudian (misalnya arthritis rheumatoid, sterosklerosis) (Kumar et al., 2007). Inflamasi merupakan tindakan protektif yang berperan dalam melawan agen penyebab jejas sel. Inflamasi melakukan misi pertahanannya dengan cara melarutkan, menghancurkan, atau menetralkan agen patologis (Kumar et al., 2007). Fenomena yang terjadi dalam proses inflamasi meliputi kerusakan mikrovaskular, meningkatnya permeabilitas kapiler dan migrasi leukosit menuju jaringan radang. Tanda-tanda dari proses inflamasi antara lain rubor, kalor, tumor, dolor, dan functio laesa (Tanu, Syarif, Estuningtyas, Setiawati, Muchtar dan Arif, 2002). Rubor, kalor, dan tumor pada inflamasi akut terjadi karena peningkatan aliran darah dan edema (Kumar et al., 2007). Gejala-gejala ini merupakan akibat dari gangguan aliran darah yang terjadi akibat kerusakan jaringan dalam pembuluh pengalir terminal, gangguan keluarnya plasma darah (eksudasi) ke dalam ruang ekstrasel akibat meningkatnya ketelapan kapiler dan perangsangan reseptor nyeri. Respon ini disebabkan oleh pembebasan bahan-bahan mediator (histamine, serotonin, prostaglandin, kinin) (Sudoyo, 2007). Saat berlangsungnya fenomena inflamasi ini banyak mediator kimiawi yang dilepaskan secara lokal seperti histamin, 5-hidroksitriptamin (5HT) atau

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

13

serotonin, faktor kemotaktik, bradikinin, leukotrien, dan prostaglandin (Tanu et al, 2002). 2. Jenis inflamasi Inflamasi dapat dibedakan menjadi akut dan kronik. Inflamasi akut memiliki onset dan durasi lebih cepat. Inflamasi akut dapat terjadi beberapa menit hingga beberapa hari, ditandai dengan adanya cairan eksudasi protein plasma maupun akumulasi leukosit neutrofilik yang dominan. Inflamasi kronik memiliki durasi yang lebih lama (hari hingga tahun). Inflamasi kronis dapat bersifat berbahaya. Tipe dari inflamasi kronik ditentukan oleh peningkatan limfosit dan makrofag yang berhubungan dengan proliferasi vaskular dan fibrosis (Kumar et al., 2007). Pengobatan pasien dengan inflamasi mempunyai dua tujuan utama, yaitu: meringankan rasa nyeri, yang sering kali gejala awal yang terlihat dan keluhan utama yang terus menerus dari pasien dan memperlambat atau membatasi proses perusakan jaringan. Pengurangan inflamasi dengan NSAID sering berakibat meredanya rasa nyeri selama periode yang bermakna. Lebih jauh lagi, sebagian besar nonopioid analgesik mempunyai efek antiinflamasi, jadi tepat digunakan untuk pengobatan inflamasi akut maupun kronis (Katzung, 2001). 3. Metode uji inflamasi a. Uji eritema telinga Eritema (kemerahan) merupakan tanda awal dari reaksi inflamasi. Timbulnya eritema adalah akibat dari terjadinya sejumlah iritan kimiawi seperti xilem, minyak kroton, vesikan, histamin, dan bradikinin (Gryglewski,

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

14

1977). Eritema ini dapat diamati dua jam setelah kulit diradiasi dengan sinar UV. Kelemahan metode ini adalah eritema dapat dihambat oleh obat yang kerjanya tidak menghambat sintesa prostaglandin (Turner, 1965). b. Induksi udema telapak kaki belakang Dasar metode ini adalah kemampuan agen dalam menghambat terjadinya udema pada telapak kaki tikus setelah pemberian bahan-bahan phlogistic seperti brewer’s yeast, formaldehid, dextran, albumin, kaolin, serta polisakarida sulfat (Vogel, 2002). Pada metode ini induksi udema dilakukan pada kaki hewan percobaan yaitu tikus jantan atau betina, dengan cara penyuntikan suspensi karagenin secara subplantar pada telapak kaki kiri bagian belakang. Ukuran udema kaki diukur dengan alat plestimometer segera setelah injeksi (Khanna dan Sarma, 2001). Aktivitas antiinflamasi obat ditunjukkan oleh kemampuannya mengurangi udema yang diinduksi pada kaki tikus (Vogel, 2002). Keuntungan metode ini antara lain cepat (waktu yang dibutuhkan tidak terlalu lama) dan pengukuran volume udema dapat dilakukan dengan lebih akurat dan objektif, mudah dilakukan karena caranya mudah diamati atau visible. Kekurangan teknik penyuntikan pada telapak kaki tikus atau jika penyuntikan

karagenin

secara

subplantar

tersebut

tidak

menjamin

pembentukan volume udema yang seragam pada hewan percobaan, akan dapat mempengaruhi nilai simpangan pada masing-masing kelompok tikus yang cukup besar (Gryglewski, 1977).

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

15

c. Percobaan in vitro Percobaan in vitro berguna untuk mengetahui peran dan pengaruh substansi-substansi fisiologis seperti histamin, bradikinin, prostaglandin, dan lain-lain dalam terjadinya inflamasi. Contoh beberapa percobaan in vitro adalah: penghambatan ikatan reseptor 3H-bradikinin, ikatan reseptor neurokinin, dan uji kemotaksis leukosit polimorfonuklear (Vogel, 2002).

D. Karagenin Karagenin merupakan senyawa iritan yang diperoleh dari ekstrak Chindrus crispus, yang merupakan mukopolisakarida yang disusun oleh monomer unit galaktosa sulfat. Karagenin mampu menginduksi reaksi inflamasi yang bersifat akut, non-imun, dapat diamati dengan baik dan mempunyai reprodusibilitas tinggi (Morris, 2003). Penggunaan karagenin sebagai penginduksi radang memiliki beberapa keuntungan antara lain: tidak meninggalkan bekas, tidak menimbulkan kerusakan jaringan dan memberikan respon yang lebih peka terhadap obat antiinflamasi dibanding senyawa iritan lainnya (Siswanto dan Nurulita, 2005). Pada umumnya bahan penginduksi radang yang digunakan adalah karagenin 1% dalam NaCl fisiologis 0,9% (b/v) dengan volume sebesar 0,1 mL untuk tikus dan 0,05 mL untuk mencit. Reaksi yang diinduksi karagenin mempunyai 2 fase: fase awal dan fase akhir. Fase awal berakhir setelah 60 menit dan dihubungkan dengan pelepasan histamin, serotonin, dan bradikinin. Fase akhir terjadi antara 60 menit setelah injeksi dan berakhir setelah 3 jam. Fase ini

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

16

dihubungkan dengan pelepasan prostaglandin dan neutrofil yang menghasilkan radikal bebas seperti H2O2, superoksida, dan radikal hidroksil (Suleyman, Demircan, Karagoz, dan Ozta, 2004). Zat yang dapat digunakan untuk memicu terbentuknya udema antara lain: mustard oil 5%, dextran 1%, egg white fresh undiluted, serotonin kreatinin sulfat, lamda karagenin 1% yang diinduksikan secara subplantar pada telapak kaki tikus. Karagenin ada beberapa tipe, yaitu lambda (λ) karagenin, iota (i) karagenin dan kappa (k) karagenin. Lambda (λ) karagenin ini dibandingkan dengan jenis karagenin yang lain, lambda karagenin paling cepat menyebabkan inflamasi dan memiliki bentuk gel yang baik dan tidak keras (Rowe, Sheskey, dan Weller,2003).

E. Obat Anti Inflamasi Non Steroid Obat antiinflamasi golongan non steroid (OAINS) berperan sebagai antiinflamasi dengan satu atau beberapa mekanisme, diantaranya dengan inhibisi metabolisme asam arakidonat, inhibisi enzim siklooksigenase (COX) atau inhibisi sintesis prostaglandin, inhibisi lipooksigenase, inhibisi sitokin, pelepasan hormon steroid, stabilisasi membran lisosom, dan pelepasan fosforilasi oksidatif (Kohli, Ali, dan Raheman, 2005). Hampir semua OAINS adalah menghambat sintesis prostaglandin dengan inhibisi COX-1 dan COX-2. Berdasarkan pada selektifitasnya terhadap COX, OAINS dapat diklasifikasikan menjadi beberapa golongan, yaitu: a. Inhibitor COX nonselektif, meliputi aspirin, indometasin, diklofenak, piroksikam, ibuprofen, naproxen, dan asam mefenamat;

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

17

b. Inhibitor selektif COX-2, meliputi nimesulid, meloksikam, nabumeton, dan aseklofenak. Golongan OAINS ini bekerja secara selektif preferential COX-2, dimana penghambatan pada COX-2-nya tidak sekuat golongan rofecoxib sehingga tidak mengganggu fungsi fisiologis COX-2 yang berguna pada kardiovaskular. Golongan OAINS ini disebut aman untuk kardiovaskular (Ignatius, Zarraga, and Ernest, 2007); c. Inhibitor sangat selektif COX-2, meliputi celecoxib, rofecoxib, valdecoxib, parecoxib, etoricoxib dan lumiracoxib (Derle, Gujar, dan Sagar, 2006). OAINS sangat selektif COX-2 memiliki efek samping pada kardiovaskular, yaitu dapat meningkatkan resiko terjadinya AMI (Acute Myocardial Infarction) karena mempunyai penghambatan yang sangat kuat terhadap COX-2. COX-2 mempunyai fungsi fisiologis dalam mensintesis prostasiklin yang berfungsi sebagai vasodilator pada pembuluh darah jantung (Ignatius, dkk, 2007).

F. Cataflam® D-50 (Kalium Diklofenak) Cataflam® D-50 (gambar 3) yang berisi kalium diklofenak immediaterelease dengan kekuatan 50 mg setiap tabletnya. Kalium diklofenak merupakan turunan asam benzenasetat yang termasuk dalam golongan obat antiinflamasi non steroid (OAINS). Kalium diklofenak sendiri memiliki nama kimia 2-[(2,6dichlorophenyl) amino] benzeneacetic acid, monopotassium salt dengan bobot molekul sebesar 334,25 dan rumus molekul C14H10Cl2NKO2 (Novartis, 2009).

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

18

Gambar 3. Struktur kalium diklofenak (Novartis, 2009)

Tablet Cataflam® D-50 merupakan sediaan tablet tanpa salut sehingga bersifat dispersible atau dapat digerus dan memungkinkan digunakan dalam peracikan obat untuk resep. Selain kalium diklofenak, bahan inaktif yang terkandung dalam Cataflam® D-50 antara lain kalsium fosfat, silikon dioksida koloidal, besi oksida, magnesium stearat, mikrokristalin selulosa, polietilen glikol, povidone, natrium glikolat, pati jagung, talk, serta titanium dioksida (Novartis, 2009). Derivat fenilasetat ini termasuk NSAID yang terkuat daya antiradangnya dengan efek samping yang kurang keras dibandingkan dengan obat kuat lainnya (indometasin dan piroxicam). Obat ini adalah penghambat siklooksigenase yang relatif nonselektif dan kuat, juga mengurangi bioavailabilitas asam arakidonat (Tjay dan Rahardja, 2002). Absorpsi obat ini melalui saluran cerna berlangsung cepat dan lengkap yang terikat 99% pada protein plasma dan mengalami efek lintas awal (first-pass) sebesar 40-50%. Walaupun waktu paruh singkat yakni 1-3 jam, diklofenak diakumulasi di cairan sinovilia yang menjelaskan efek terapi di sendi jauh lebih

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

19

panjang dari waktu paruh obat tersebut. Efek samping yang lazim ialah mual, gastritis, eritema kulit dan sakit kepala. Dosis orang dewasa 100-150 mg sehari terbagi dua atau 3 dosis (Gunawan, 2008).

G. Landasan Teori Inflamasi merupakan tindakan protektif yang berperan dalam melawan agen penyebab jejas sel. Inflamasi melakukan misi pertahanannya dengan cara melarutkan,

menghancurkan,

atau

menetralkan

agen

patologis.

Saat

berlangsungnya feomena inflamasi ini banyak mediator kimiawi yang dilepaskan secara lokal seperti histamin, 5-hidroksitriptamin (5HT) atau serotonin, faktor kemotaktik, bradikinin, leukotrien, dan prostaglandin (Tanu et al, 2002). Dari sejumlah senyawa flavonoid yang terdapat pada bunga telang, antosianin adalah yang paling utama. Antosianin adalah senyawa berwarna golongan flavonoid yang bertanggung jawab untuk kebanyakan warna merah, biru, dan ungu pada buah, sayur dan tanaman hias. Antosianin adalah pigmen yang mudah larut di air sehingga senyawa ini akan ditemukan dalam infusa bunga telang. Menurut Mazza, 2002 (cit., Rhone & Basu, 2008) bahwa antosianin merupakan antioksidan yang kuat, memiliki kemampuan untuk mencegah kanker, memperlambat penuaan, menghambat penyakit neurologis, inflamasi, diabetes dan infeksi bakteri. Antosianin yang merupakan bagian flavonoid dapat menjadi inhibitor enzim siklooksigenase (COX). Antosianin akan mencegah sintesis prostaglandin (salah satu mediator inflamasi) dan menekan pengeluaran sel T. Sel imun yang

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

20

berkomunikasi dengan sinyal kimia yang disebut sitokin akan dikendalikan oleh antosianin (Sandhar, dkk, 2011). H. Hipotesis Infusa bunga telang (Clitoria ternatea L.) memberikan efek antiinflamasi dengan berkurangnya udema yang diinduksi karagenin 1% pada kaki mencit.

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

BAB III METODE PENELITIAN

A. Jenis dan Rancangan Penelitian Penelitian ini merupakan jenis penelitian eksperimental murni karena dilakukan dengan adanya perlakuan dan tanpa ada penelitian sebelumnya dengan rancangan acak pola searah. Rancangan acak pola searah digunakan karena faktor yang diuji dalam penelitian ini hanya ada satu, yaitu pengaruh dosis pemberian infusa bunga telang (Clitoria ternatea L.) terhadap udema pada kaki mencit yang diinduksi karagenin 1 % dengan pengukuran jangka sorong.

B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional 1. Variabel utama a. Variabel bebas: dosis infusa bunga telang. b. Variabel tergantung: penurunan udema dilihat dari perbandingan kaki mencit yang normal dengan kaki yang terinduksi karagenin 1%. 2. Variabel pengacau a. Variabel yang dikendalikan : hewan uji adalah mencit betina galur Swiss, umur 2-3 bulan, berat badan 20-30 gram, cara pemberian bahan uji secara per oral. b. Variabel yang tidak dikendalikan : kondisi patologis mencit.

21

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

22

3. Definisi operasional 1. Infusa bunga telang adalah sejumlah (gram) bahan yang dipanaskan dengan air dalam panci selama 15 menit terhitung mulai suhu mencapai 90oC sambil sekali-sekali diaduk. Kemudian diserkai selagi panas, tambahkan air panas secukupnya melalui ampas hingga diperoleh volume infus yang dikehendaki (Depkes RI, 1995). 2. Dosis infusa bunga telang adalah sejumlah berat infusa bunga telang tiap satuan berat badan hewan uji dengan satuan mg/kg BB. 3. Udema adalah tebal telapak kaki yang diinduksi oleh larutan karagenin 1% yang diinjeksikan secara subplantar dan diukur dengan jangka sorong dalam satuan millimeter. 4. AUC (Area Under Curve) ditentukan menggunakan rumus trapezoid di mana selisih udema antara kaki kiri dan kanan mencit dikali dengan selisih waktu pengukuran (mm.menit).

C. Bahan Penelitian 1. Hewan uji Mencit dengan jenis kelamin betina usia 2-3 bulan, berat 20-30 g, dan bergalur Swiss yang diperoleh dari Laboratorium Imono Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

23

2. Bahan uji Bahan uji yang digunakan adalah bunga telang (Clitoria ternatea L.) yang diperoleh dari kebun tanaman obat Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. 3. Bahan uji farmakologi Bahan-bahan uji farmakologi yang digunakan dalam penelitian ini yaitu: a. Karagenin sebagai agen inflamasi yang diperoleh dari Laboratorium Farmakologi dan Toksikologi Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. b. Tablet Cataflam® D-50 (Novartis Indonesia) yang mengandung kalium diklofenak 50 mg sebagai kontrol positif diperoleh dari Apotek Condong Catur, Sleman, Yogyakarta. c. NaCl fisiologis 0,9 % sebagai pelarut karagenin diperoleh dari Apotek Kimia Farma, Seturan, Sleman, Yogyakarta. d. Aquadest sebagai kontrol negatif yang diperoleh dari Laboratorium Farmakologi dan Toksikologi Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

D. Alat Penelitian Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah sebagai berikut: 1. Neraca analitik 2. Syringe dan spuit injeksi per oral 3. Stopwatch

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

24

4. Jangka sorong Digital Caliper “Wipro” 5. Alat-alat gelas (beaker glass, pengaduk, gelas ukur dan labu ukur merk Pyrex) 6. Alat-alat pembuat infusa (heater, panci lapis alumunium, pengaduk, termometer, corong, kain flanel)

E. Tata Cara Penelitian 1. Determinasi tanaman Determinasi tanaman telang (Clitoria ternatea L.) menggunakan bunga, daun, batang yang dilakukan secara benar sesuai dengan buku acuan, “Flora untuk Sekolah di Indonesia” di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. 2. Pengumpulan bahan Bunga telang diperoleh dari kebun tanaman obat Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Bunga yang diambil adalah bunga yang segar bewarna biru keunguan dan tidak berlubang. Waktu panen bunga telang dilakukan pagi hari pada bulan Maret 2013. 3. Pembuatan larutan karagenin 1% Larutan karagenin yang digunakan sebagai zat peradang dibuat dengan cara 1 gram karagenin dilarutkan dalam larutan NaCl fisiologis 0,9% hingga volume 100 mL, akan diperoleh konsentrasi karagenin 1% (b/v) yang setara dengan dosis 25 mg/kgBB.

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

25

4. Pembuatan infusa bunga telang Bunga yang dipilih adalah bunga yang masih segar, tidak rusak dan tidak layu. Bunga ditimbang sesuai dengan banyaknya penggunaannya di masyarakat, kemudian bunga ditambah dengan 100 mL air dalam panci dipanaskan selama 15 menit dengan suhu 90oC sambil sesekali diaduk. Lalu ditambahkan air panas hingga diperoleh volume infusa 100 mL. 5. Pembuatan larutan diklofenak Tablet Cataflam® D-50 yang mengandung kalium diklofenak 50 mg sebanyak 20 tablet diuji keseragaman bobotnya. Diambil 1 tablet Cataflam® D-50 yang mengandung kalium diklofenak 50 mg yang telah diuji keseragaman bobotnya tersebut, ditimbang 204 mg dan digerus dalam mortar, lalu dilarutkan dalam aquadest hingga volume 100 mL sehingga diperoleh konsentrasi 2,04 mg/mL. Perhitungan dosis kalium diklofenak dapat dilihat pada lampiran 8. 6. Penentuan waktu pemberian kalium diklofenak Kalium diklofenak (Cataflam® D-50) 9,1 mg/Kg BB sebagai kontrol positif diberikan 15 menit sebelum induksi udema dengan injeksi karagenin 1% secara subplantar berdasarkan penelitian Gunawan (2010). 7. Pembuatan inflamasi Kaki mencit sebelah kiri diinduksi dengan karagenin 1% secara subplantar (di bawah kulit telapak kaki mencit), sedangkan kaki mencit sebelah kanan hanya disuntik secara subplantar tanpa karagenin.

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

26

8. Dosis bunga telang Uji antiinflamasi ini dilakukan karena tidak ada literatur yang menyebutkan dosis terapi yang biasa digunakan di masyarakat, maka takaran yang dipakai dalam penelitian ini adalah 5 gram (± 14 kuntum bunga). Perhitungan dosis bunga telang dapat dilihat pada lampiran 8. Dalam penelitian ini, infusa bunga telang dibuat dalam tiga peringkat dosis yaitu 328; 655; 1310 mg/kg BB mencit. 9. Penentuan kontrol negatif Kontrol negatif adalah zat yang tidak memiliki efek antiinflamasi sehingga dapat digunakan sebagai pembanding terhadap zat yang diuji. Pada penelitian digunakan aquadest sebagai kontrol negatif yang merupakan pelarut dalam pembuatan infusa bunga telang. Perhitungan dosis aquadest dapat dilihat pada lampiran 8. 10. Perlakuan pada hewan uji Dua puluh lima ekor mencit diukur ketebalan kaki kirinya menggunakan jangka sorong. Mencit dibagi acak dalam 5 kelompok masing-masing terdiri dari 5 ekor mencit, yaitu kelompok kontrol negatif (aquadest 25 g/kg BB mencit), kelompok kontrol positif (kalium diklofenak 9,1 mg/kg BB mencit), kelompok infusa bunga telang dosis I (328 mg/Kg BB mencit), kelompok infusa bunga telang dosis II (655 mg/Kg BB mencit) dan kelompok infusa bunga telang dosis III (1310 mg/Kg BB mencit). Skema jalannya penelitian dapat dilihat pada gambar 4.

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

25 ekor mencit diberi senyawa secara per oral sesuai kelompok berikut

Kel. I

Kel. II

Kel. III

Kel. IV

Kel. V

15 menit kemudian Masing-masing kaki kiri mencit diinjeksi karagenin 1% secara subplantar dan kaki kanan disuntik dengan spuit tanpa larutan karagenin

Udema diukur menggunakan jangka sorong selama 6 jam dan diukur pada menit ke-0, 15, 30, 45, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240, 270, 300, 330 dan 360

Dihitung selisih udema kaki kiri yang terinduksi karagenin dengan kaki kanan yang tidak terinduksi karagenin Gambar 4. Skema jalannya penelitian

Keterangan: Kel. I : Kelompok kontrol negatif (aquadest 25 g/Kg BB mencit) Kel. II : Kelompok kontrol positif (kalium diklofenak 9,1 mg/Kg BB mencit) Kel. III: Kelompok infusa bunga telang dosis I (328 mg/Kg BB mencit) Kel. IV: Kelompok infusa bunga telang dosis II (655 mg/Kg BB mencit) Kel. V : Kelompok infusa bunga telang dosis III (1310 mg/Kg BB mencit)

27

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

28

11. Penentuan persen (%) penghambatan inflamasi Metode penentuan persen penghambatan inflamasi yang digunakan dalam penelitian ini adalah dengan menghitung luas area di bawah kurva (AUC-Area Under Curve) untuk setiap mencit pada setiap rentang waktu pengukuran sehingga dapat dihitung % penghambatan inflamasinya dengan rumus: Penghambatan inflamasi (%) =

(୅୙େ౥ష౮)୭ି(୅୙େ౥ష౮)୬ (୅୙େ౥ష౮)୭

x 100%

Keterangan: (AUCo-x)o = AUCo-x rata-rata kelompok kontrol negatif (mm.menit) (AUCo-x)n = AUCo-x rata-rata masing-masing hewan uji yang diberi senyawa uji dengan dosis sebesar n (mm.menit) (Ikawati, Suparjan, dan Asmara, 2007). Hasil yang diperoleh kemudian dianalisis secara statistik untuk menemukan dosis infusa bunga telang yang dapat menurunkan udema kaki mencit secara signifikan.

F. Analisis Hasil Data yang diperoleh dianalisis dengan Shapiro Wilk untuk melihat distribusi data. Jika data terdistribusi normal maka dilanjutkan dengan analisis ANOVA satu arah taraf kepercayaan 95% dan jika data tidak terdistribusi normal maka dilanjutkan dengan analisis Kruskal Wallis. Analisis ini dilakukan untuk melihat apakah ada perbedaan pada kelompok perlakuan. Analisis dilanjutkan dengan uji Scheffe untuk data dengan distribusi yang normal dan uji Mann Whitney untuk data dengan distribusi yang tidak normal. Analisis ini dilakukan untuk mengetahui perbedaan tersebut bermakna atau tidak bermakna. Jika diperoleh nilai p< 0,05 maka diartikan perbedaan bermakna secara statistik, jika

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

29

diperoleh p> 0,05 maka diartikan perbedaan tersebut tidak bermakna. Data kuantitatif persen penghambatan inflamasi disajikan dalam nilai rata-rata ± SE (Mean ± Standard Error).

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Hasil Determinasi Tanaman Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah infusa bunga telang (Clitoria ternatea L.). Sebelum bunga Clitoria ternatea L. ini digunakan dalam pengujian efek antiinflamasi maka diperlukan determinasi tanaman untuk memastikan bahwa tanaman yang digunakan adalah benar-benar tanaman Clitoria ternatea L. Bagian tanaman yang digunakan dalam determinasi adalah bagian batang, daun, bunga dan biji. Determinasi dilakukan sesuai dengan buku acuan “Flora untuk Sekolah di Indonesia” hingga kategori jenis (species) untuk membuktikan bahwa batang, daun, bunga dan biji yang dideterminasi adalah benar Clitoria ternatea L. Berdasarkan hasil determinasi tersebut maka terbukti bahwa tanaman yang diuji ini benar merupakan tanaman Clitoria ternatea L. (Lampiran 1).

B. Infusa Bunga Telang Sebanyak 5 gram bunga telang ditambah 100 mL air. Campuran tersebut dimasukkan ke dalam panci infusa dan dipanaskan di atas heater pada suhu 900 C selama 15 menit sambil sesekali diaduk. Waktu 15 menit dapat dihitung setelah campuran mencapai suhu 900 C. Selama pemanasan, panci dalam keadaan tertutup, agar suhu saat pemanasan tidak terpengaruh oleh suhu lingkungan atau suhu kamar. Campuran diserkai menggunakan kain flannel selagi panas hingga

30

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

31

diperoleh volume infusa 100 mL. Bila belum mencapai volume 100 mL, dapat ditambahkan air panas melalui ampas. Dari hasil pembuatan infusa didapatkan cairan infusa bewarna ungu dan diduga dari warna ungu tersebut infusa sudah mengandung antosianin karena antosianin merupakan senyawa pemberi warna pada bunga telang. Hasil pembuatan infusa dapat dilihat pada tabel I. Tabel I. Hasil pembuatan infusa bunga telang

No 1. 2. 3. 4.

Ciri organoleptis Bentuk Warna Bau Rasa

Hasil Cairan agak kental Ungu Tidak berbau Pahit

C. Efek Antiinflamasi Infusa Bunga Telang Penelitian efek antiinflamasi infusa bunga telang (Clitoria ternatea L.) pada mencit putih betina ini bertujuan untuk mengetahui kemampuan sekaligus besarnya kemampuan efek antiinflamasi infusa bunga telang. Efek antiinflamasi ditandai dengan penurunan udema kaki mencit setelah diinjeksi karagenin 1% secara subplantar akibat pemberian infusa bunga telang tersebut secara per oral. Metode pengukuran efek antiinflamasi yang digunakan dalam penelitian ini mengadopsi Mahmood et al., (2009) di mana pengukurannya terletak pada ketebalan kaki mencit (dari telapak kaki mencit dengan posisi jangka sorong vertikal). Metode pengukuran dengan jangka sorong merupakan salah satu metode yang seringkali digunakan dalam uji antiinflamasi di samping metode potong kaki atau metode pengukuran volume udema dengan pletismometer. Alasan pemilihan metode ini dalam uji antiinflamasi yang dilakukan adalah karena metode ini relatif sederhana, baik dari instrument yang dibutuhkan, proses perlakuan, pengamatan,

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

32

pengukuran sampai dengan pengolahan data. Sebelum memulai rangkaian penelitian, alat jangka sorong yang akan digunakan dikalibrasi terlebih dahulu untuk memastikan kelayakan dan akurasi serta presisi alat tersebut dalam mengukur. Dalam penelitian ini udema diukur selama 6 jam pada menit ke-0, 15, 30, 45, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240, 270, 300, 330 dan 360, maka didapatkan

rata-rata udema (mm)

profil rata-rata udema kaki mencit saat pengukuran tiap waktu pada gambar 5. 1,6 1,4 1,2 1 0,8 0,6 0,4 0,2 0

Series1 Series2 Series3 Series4 Series5 0

100

200

300

400

waktu pengukuran (menit)

Gambar 5. Kurva rata-rata udema kaki mencit yang diinduksi karagenin 1% selama 6 jam pengamatan

Keterangan: Series 1 Series 2 Series 3 Series 4 Series 5

: aquadest (25 g/kg BB mencit) : Cataflam® D-50 (kalium diklofenak 9,1 mg/kg BB mencit) : infusa bunga telang dosis I (328 mg/kg BB mencit) : infusa bunga telang dosis II (655mg/kg BB mencit) : infusa bunga telang dosis III (1310 mg/kg BB mencit)

Dari kurva tersebut dapat dilihat pada aquadest 25 g/kg BB mencit tidak terjadi penurunan udema yang signifikan. Hal ini menunjukkan bahwa aquadest tidak memiliki kemampuan untuk menghambat inflamasi, penurunan di awal pengamatan mungkin disebabkan oleh respon dari tubuh yang berupaya untuk mempertahankan dan memulihkan tubuh dari adanya peradangan. Pada kalium

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

33

diklofenak 9,1 mg/kg BB mencit terlihat penurunan udema yang signifikan dan tidak terjadi peningkatan udema, hal ini menunjukkan bahwa kalium diklofenak yang merupakan OAINS memang memiliki daya penghambatan inflamasi. Sedangkan pada ketiga dosis infusa bunga telang terjadi penurunan udema dan selang beberapa jam terjadi peningkatan udema kembali. Hal ini mungkin disebabkan karena ketiga dosis infusa bunga telang hanya memiliki efek untuk menurunkan inflamasi sampai jam tertentu saja dan terjadi peningkatan udema kembali karena karagenin sendiri sebagai penginduksi udema mampu bertahan selama 6 jam dan berangsur-angsur berkurang dalam waktu 24 jam setelah injeksi. Pada pengujian ini, zat penginduksi dipilih karagenin 1% karena karagenin merupakan salah satu zat inflamatogen udema pada kaki mencit yang paling banyak digunakan untuk memprediksi efektivitas potensial terapeutik dari obat-obat antiinflamasi, baik dari golongan steroid maupun non steroid. Selain itu karagenin juga tidak menimbulkan kerusakan jaringan pada kaki mencit. Menurut Baghdikian et al., (1997), karagenin akan menginduksi cedera sel sehingga sel yang cedera melepaskan mediator yang mengawali proses inflamasi. Setelah pelepasan mediator inflamasi, terjadi edema yang mampu bertahan selama 6 jam dan berangsur-angsur berkurang dalam waktu 24 jam setelah injeksi. Pada penelitian ini digunakan aquadest sebagai kontrol negatif untuk mengetahui apakah aquadest yang digunakan sebagai pelarut memiliki pengaruh terhadap aktivitas antiinflamasi pada infusa bunga telang dan kalium diklofenak atau tidak, juga sebagai pembanding aktivitas antiinflamasi. Sebagai kontrol positif digunakan Cataflam® D-50 yang berisi kalium diklofenak. Cataflam® D-50

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

34

dipilih karena termasuk dalam golongan obat antiinflamasi non steroid (OAINS) yang menghambat sintesis prostaglandin. Pemilihan kontrol positif tersebut berdasarkan penggunaan produk antiinflamasi yang beredar di pasaran, namun sediaan diklofenak yang beredar merupakan tablet salut enterik yang ditujukan untuk mengurangi iritasi lambung. Bahan salut tersebut berfungsi untuk mempertahankan obat di dalam lambung terhadap asam lambung hingga menuju ke usus kemudian siap diabsorpsi. Melalui hal inilah maka obat tersebut tidak hanya mengandung kalium diklofenak saja melainkan ada lapisan yang melindunginya (coated), sedangkan dalam penelitian ini tablet dharuskan untuk digerus dan ditimbang sesuai dengan yang dibutuhkan. Jika terdapat lapisan salut ini maka dapat mempengaruhi penimbangan sekaligus efek obat itu sendiri dalam menimbulkan daya antiinflamasi, karena mungkin saja yang ditimbang hanya salut enteriknya bukan obat yang seharusnya digunakan sebagai zat antiinflamasi. Untuk itu dipilih Cataflam® D-50 yang merupakan tablet dispersible (D) tanpa salut dengan tujuan mempermudah dalam proses pelarutan bersama aquadest sehingga lebih homogen ketika akan diberikan pada mencit secara peroral. Dosis Cataflam® D-50 yang digunakan adalah 9,1 mg/kg BB mencit. Pada uji antiinflamasi ini, infusa bunga telang diberikan dalam tiga peringkat dosis berturut-turut sebesar 328; 655 dan 1310 mg/kg BB mencit, untuk mengetahui masing-masing perbandingan khasiat bunga telang terhadap kontrolnya sebagai antiinflamasi. Penghambatan inflamasi ditunjukkan dengan penurunan udema kaki mencit setelah pemberian suspensi karagenin 1%. Data selisih udema kaki mencit

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

35

digunakan untuk menghitung persen penghambatan inflamasi. Terlebih dahulu dihitung luas daerah di bawah kurva atau AUC dari masing-masing kelompok perlakuan. Untuk menentukan persen penghambatan inflamasi akibat pemberian infusa bunga telang, dihitung hubungan antara selisih udema telapak kaki mencit yang diinjeksi karagenin 1% pada setiap t (waktu) dari menit ke-0 dengan waktu pengamatan untuk masing-masing mencit pada tiap perlakuan yang ditentukan dengan nilai AUC setiap satuan waktu dan AUC total. Diagram batang perbedaan AUC antar kelompok perlakuan disajikan dalam gambar 6.

Gambar 6. Diagram batang AUC untuk masing-masing kelompok perlakuan beserta kontrol

Keterangan dosis: Aquadest Kalium diklofenak Infusa bunga telang dosis 1 Infusa bunga telang dosis 2 Infusa bunga telang dosis 3

: 25 g/kg BB mencit : 9,1 mg/kg BB mencit : 328 mg/kg BB mencit : 655 mg/kg BB mencit : 1310 mg/kg BB mencit

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

36

Dari perhitungan AUC masing-masing kelompok perlakuan beserta kontrol, kemudian ditentukan AUC rata-ratanya. Data AUC rata-rata ini kemudian digunakan untuk menentukan persen penghambatan inflamasi untuk setiap kelompok perlakuan. Hasil pengujian pada kelompok perlakuan menunjukkan bahwa pada kelompok kontrol negatif (aquadest) menghasilkan rata-rata AUC udema yang paling besar di antara kelompok perlakuan lainnya, yaitu sebesar 302,16 mm.menit. Hal ini menunjukkan bahwa aquadest tidak memiliki efek penghambatan inflamasi. Data persen penghambatan terhadap inflamasi dapat dilihat pada tabel II. Tabel II. Rata-rata persen penghambatan inflamasi pada setiap kelompok perlakuan dan hasil uji Mann Whitney masing-masing kelompok

% PI ± SE

I

II

III

IV

V

I

‫ ̅ݔ‬± ܵ‫ܧ‬ (mm.menit)

302,16 ± 16,6

-

-

B

B

B

B

II

143,61 ± 2,24

52, 47 % ± 2,24

B

-

B

B

B

III

230,94 ± 6,18

23.57 % ± 6,18

B

B

-

B

TB

IV

167,82 ± 2,82

44,5 % ± 2,82

B

B

B

-

B

V

217,71 ± 3,16

27,95 % ± 3,16

B

B

TB

B

-

Kelompok

Keterangan: Kel. I : kelompok yang diberi aquadest dosis 25 g/kg BB mencit Kel. II : kelompok yang diberi kalium diklofenak dosis 9,1 mg/kg BB mencit Kel. III: kelompok yang diberi infusa bunga telang dosis 328 mg/kg BB mencit Kel. IV: kelompok yang diberi infusa bunga telang dosis 655 mg/kg BB mencit Kel. V : kelompok yang diberi infusa bunga telang dosis 1310 mg/kg BB mencit ‫ݔ‬ҧ : mean (rata-rata) SE : standard error % PI : persen penghambatan inflamasi B : berbeda bermakna (p < 0,05) TB : berbeda tidak bermakna (p > 0,05)

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

37

Dari tabel di atas terlihat bahwa masing-masing dosis infusa bunga telang memiliki efek antiinflamasi yang dinilai dari persen penghambatan inflamasi yang diperoleh dengan membandingkan AUC rata-rata tiap kelompok perlakuan dengan AUC rata-rata kelompok kontrol negatif (aquadest 25 g/kg BB mencit). Dari hasil perhitungan diperoleh data persen penghambatan inflamasi Cataflam® D-50 (kalium diklofenak) dosis 9,1 mg/kg BB sebesar 52,47%. sedangkan untuk kelompok perlakuan infusa bunga telang dosis 328; 655; dan 1310 mg/kg BB mencit masing-masing menunjukkan persen penghambatan inflamasi sebesar 23,57; 44,5 dan 27,95%. Dari persen penghambatan inflamasi ketiga dosis tersebut didapat hasil bahwa infusa bunga telang dosis 655 mg/kg BB mencit memiliki persen penghambatan inflamasi yang paling besar dibandingkan dosis 328 dan 1310 mg/kg BB mencit yaitu 44,5%. Hal ini berarti bahwa dosis 655 mg/kg BB mencit memiliki efek antiinflamasi yang paling baik meskipun belum mencapai 50% (ED50) dan belum sebanding dengan efek antiinflamasi dari Cataflam® D-50 (kalium diklofenak). Pada infusa bunga telang dosis 1310 mg/kg BB mencit terjadi penurunan persen penghambatan inflamasi yang menunjukkan bahwa semakin besarnya dosis infusa bunga telang tidak semakin besar pula efek penghambatan inflamasinya. Hal ini mungkin dapat disebabkan karena adanya senyawa dari infusa bunga telang yang bersifat sebagai prooksidan. Beberapa penelitian mengatakan bahwa senyawa bioaktif seperti fenol dapat bertindak sebagai prooksidan, dalam kondisi tertentu, seperti dosis yang tinggi atau adanya ion

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

38

logam (Decker, 1997 cit., Yordi, Perez, Matos dan Villares, 2012). Prooksidan merupakan sifat senyawa yang dapat mendorong oksidasi pada komponen sel yang melibatkan senyawa radikal bebas dan berujung terjadinya reaksi rantai sedangkan antioksidan merupakan sifat senyawa yang dapat melindungi sel dari efek berbahaya radikal bebas oksigen reaktif (Mandal, 2012). Kemudian dilakukan analisis statistik menggunakan uji Kruskal Wallis dan hasil analisis menunjukkan bahwa data antar kelompok perlakuan memberikan hasil yang signifikan (p < 0,05). Untuk mengetahui perbedaan antar kelompok perlakuan bermakna atau tidak bermakna, dilakukan uji Mann Whitney. Analisis statistik ini digunakan karena distribusi data pada penelitian tidak normal sehingga tidak dapat dilakukan uji ANOVA. Analisis Kruskal Wallis serta uji Mann Whitney yang dilakukan menunjukkan bahwa efek penghambatan inflamasi infusa bunga telang dosis 328; 655; dan 1310 mg/kg BB berbeda bermakna (p < 0,05) terhadap kontrol positif, yaitu Cataflam® D-50 yang berisi kalium diklofenak. Hal ini berarti bahwa ketiga dosis tersebut belum dapat bekerja sebagai antiinflamasi dengan persen penghambatan inflamasi yang sebanding dengan kerja kalium diklofenak dalam Cataflam® D-50 sebagai senyawa yang diketahui secara pasti sebagai agen antiinflamasi. Pada kelompok perlakuan dengan infusa bunga telang, perbedaan yang bermakna terletak pada kelompok dosis 655 mg/kg BB terhadap kedua kelompok dosis 328 dan 1310 mg/kg BB, sedangkan infusa bunga telang dengan dosis 328 mg/kg BB berbeda tidak bermakna terhadap infusa bunga telang dosis 1310 mg/kg BB yang berarti kedua dosis tersebut memiliki efek yang sebanding di mana pada kedua dosis tersebut

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

39

belum menimbulkan adanya penghambatan inflamasi. Berdasarkan hasil yang didapat dalam penelitian ini, dapat dikembangkan penelitian lebih lanjut mengenai efek antiinflamasi bunga telang dalam bentuk sediaan lain, seperti dalam bentuk ekstrak. Mekanisme kerja OAINS meliputi reduksi sintesis prostaglandin dengan menghambat enzim siklooksigenase melalui antagonisme dengan asam arakidonat untuk berikatan dengan enzim siklooksigenase (COX). Agar suatu obat dapat menjadi inhibitor kompetitif terhadap asam arakidonat untuk dapat berikatan dengan enzim COX, obat tersebut harus memiliki lipofilitas yang tinggi serta properti asam untuk menyerupai substrat alami dari COX itu sendiri (Mehanna, 2003). Diklofenak sendiri yang dalam penelitian ini digunakan sebagai kontrol positif merupakan golongan OAINS turunan asam asetat yang memiliki fungsionalitas asam sehingga dapat berikatan dengan enzim COX untuk menghambat biosintesis prostaglandin. Antosianin yang berperan dalam penghambatan inflamasi pada bunga telang (Clitoria ternatea L.) memiliki mekanisme yang sama dengan kalium dikofenak sebagai OAINS. Antosianin yang merupakan bagian flavonoid dapat menjadi inhibitor enzim siklooksigenase (COX). Antosianin akan mencegah sintesis prostaglandin (salah satu mediator inflamasi) dan menekan pengeluaran sel T. Sel imun yang berkomunikasi dengan sinyal kimia yang disebut sitokin akan

dikendalikan

oleh

antosianin

(Sandhar,

dkk,

2011).

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan Berdasarkan hasil dari penelitian ini, dapat disimpulkan bahwa: 1.

Infusa bunga telang dosis 328; 655 dan 1310 mg/kg BB mencit yang diberikan secara per oral dapat menurunkan udema kaki mencit yang diinduksi karagenin 1%, namun efeknya tidak sebanding dengan kalium diklofenak dosis 9,1 mg/kg BB sebagai kontrol positif.

2.

Persentase penghambatan inflamasi yang ditimbulkan oleh infusa bunga telang yang diberikan secara oral pada udema kaki mencit betina galur Swiss yang diinduksi dengan karagenin 1% dengan dosis 328; 655; 1310 mg/kg BB mencit berturut-turut sebesar 23,57; 44,5 dan 27,95%.

B. Saran Berdasarkan penelitian yang dilakukan, perlu dilakukan penelitian tentang: 1.

Penelitian lebih lanjut mengenai efek antiinflamasi bunga telang (Clitoria ternatea L.) dengan bentuk sediaan yang lain.

40

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

DaftarPustaka Andersen, O.M., Markham, K.R., 2005, Flavonoid: Chemistry, Biochemistry and Application, CRC Press, Boca Raton, FL. Anonim, 2009, MIMS Indonesia Petunjuk Konsultasi, Edisi 9, PT Medidata Indonesia, Jakarta Selatan, 136. Baghdikian, B., Lanhers, M.C., Fleurentin, J., Olivier, E., Maillard, C., Balansard, G., dan Mortier, F., 1997, An Analytical Study, Anti-Inflammatory and Analgesic Effects of Hapagophytum procumbens and Harpagophytum zeyheri. Planta Medica, 63: 171-176. Decker, E., 1997, Phenolics: Prooxidants or Antioxidants, Nutrition Review, Vol. 55, 396-398. Depkes RI, 1986, Sediaan Galenik, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, 8-25. Depkes RI, 1995, Farmakope Indonesia, Edisi IV, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, 649. Gryglewski, R.J., 1977, Some Experimental Models for the Study of Inflammation and Anti-Inflammatory Drugs, Agent Actions Suppl, Birkhaueser Verlag Basel, Rotterdam, 19-21, 59. Gunawan, S.G., 2008, Farmakologi dan Terapi, Edisi 5, Departemen Farmakologi dan Terapeutik Fakultas Kedokteran UI, 231. Gunawan, T., 2010, Efek Analgesik-Antiinflamasi Sari Buah Nanas (Ananas comosus L.) pada Mencit Putih Betina, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Herman, 2005, Pengetahuan, Sikap dan Perilaku Pengguna Tanaman Obat di Desa Sukajadi, Kecamatan Tamansari di Kabupaten Bogor dan Faktor-Faktor yang Mempengaruhinya, Skripsi, Jurusan Gizi Masyarakat dan Sumberdaya Keluarga Fakultas Pertanian IPB, Bogor. Ignatius, G.E., Zarraga, M.D., dan Ernest, R.S., 2007, Coxibs and Heart Disease, J. American Col. of Cardio., 49: 1-14. Ikawati, Z., Suparjan, A.M., dan Asmara, L.S., 2007, Pengaruh Senyawa Heksagamavunon-1 (HGV-1) Terhadap Inflamasi Akut Akibat Reaksi Anafilaksis Kutaneus Aktif pada Tikus Wistar Jantan Terinduksi Ovalbumin, Kemajuan Terkini Riset Universitas Gadjah Mada, 36-46.

41

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

42

Kamkaen, N., dan Wilkinson J.M., 2009, The Antioxidant Activity of Clitoria ternatea Flower Petal Extracts and Eye Gel, Thesis, Faculty of Pharmacy, Srinakharinwirot University, Ongkharak District, Thailand. Katzung, B.G., 2001, Farmakologi Dasar dan Klinik, diterjemahkan oleh Dripa, S., Salemba Medika, Jakarta, 449-471. Kazuma, K., Noda, N., dan Suzuki, M., 2003, Flavonoid Composition Related to Petal Color in Differrent Lines of Clitoria ternatea, Phytochemistry, 64, 1133-1139. Khanna N., dan Sarma, S.B., 2001, Antiinflammatory and Analgesic Effect of Herbal Preparation: Septilin, Indian J. Med. Sci., 55: 195-202. Kohli, K., Ali, J., dan Raheman, Z., 2005, Curcumin: A Natural Antiinfammatory Agent, Indian J. Pharmacol., 37: 141-147. Kumar, V., Abbas, A.K., Fausto, N., dan Mitchell R.N., 2007, Robbins Basic Pathology, Philadelpia, Saunders Elsevier, 29, 37-41, 53-54. Mahmood, K., Aorahman, Z.A., Tariq, I.N., dan Hussain, S.A.R., 2009, DoseDependent Anti-inflammatory Effect of Silymarin in Experimental Animal Model of Chronic Inflammation, African J. of Pharm. and Pharmacol., 3 (5), 242-247. Malabodi., R.B., Nataraka., K., 2001, Shoot Regeneration in Leaf Explants of Clitoria ternatea L. Cultured In Vitro, Phytomorphology, 51: 169-171. Mandal, A., 2012, Antioxidant: Pro-Oxidant Activities, www.newsmedical.net/health/Antioxidant-Pro-Oxidant-Activities.aspx, diakses tanggal 7 juli 2013. Mazza, 2002, Absorption of Anthocyanins from Blueberries and Serum Antioxidant Status in Human Subjects, J. Agric. Food Chem., 50: 77317737. Mehanna, A.S., 2003, NSAIDs: Chemistry and Pharmacological Actions, American J. of Pharm. Edu., 67: 1-5. Michael S.G., Kalamani A., 2003, Butterfly Pea (Clitoria ternatea): A Nutritive Multipurpose Forage Legume for The Topics – An Overview, Pakistan J. of Nutri., 2: 374-379. Morris, C.J., 2003, Carragenin Induced Paw Edema in The Rat an Mouse Inflammation Protocols, Methods in Molecular Biology, Vol. 2, 115-122.

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

43

Mukherjee, P.K., Kumar, V., Kumar, N.S., Heinrich, M., 2008, The Ayurvedic Medicine Clitoria ternatea-From Traditional Use to Scientific Assessment. J. Ethnopharm., 120 (3): 291-301. Nakajima, J., Tanaka, I., Seo, S., Yamakazi, M., dan Saito, K., 2004, LC/PDA/ESI-MS Profiling and Radical Scavenging Activity of Anthocyanins in Various Berries, J. Biomed. and Biotech., 5: 241-247. Novartis, 2009, Cataflam® (Diclofenac Potassium Immediate-Release Tablet), www.pharma.us.novartis.com/product/pi/pdf/Cataflam.pdf, diakses tanggal 17 Mei 2013. Rao, V.S.N., Paiva, L.A.F., Santos L.A., Silva, R.M., Gurgel, L.A., Sousa, E.T., dan Silveira E.R., 2003, Anti-inflammatory Effect of Ternatin, A Flavonoid from Egletes viscose Less., In The Rat Model of Colitis Induced by Acetic Acid, Plants Medicinal Buletin, vol. 2, University of Santiago, Chile, 48-51. Rein, M., 2005, Copigmentation Reactions and Color Stability of Berry Anthocyanins, Disertasi, Helsinki: Department of Applied Chemistry and Microbiology, University of Helsinki. Rhone, M., dan Basu, A., 2008, Phytochemicals and Age-Related Eye Diseases, Nutrition Reviews, Department of Nutritional Sciences, Oklahoma State University, USA, 66(8): 465-472. Rokhman, F., 2007, Aktivitas Antibakteri Filtrat Bunga Telang (Clitoria ternatea L.) terhadap Bakteri Penyebab Konjungtivitis, Skripsi, Program Studi Biokimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor, Bogor. Rowe, C.R., Sheskey, J.P., dan Weller, J.W., 2003, Handbook of Pharmaceutical Excipien, Edisi IV, Pharmaceutical Press and American Pharmaceutical, 101-103. Sandhar, H.K., Kumar, B., Prasher, S., Tiwari, P., Salhan, M., Sharma, P., 2011, A Review of Phytochemistry and Pharmacology of Flavonoids, International Pharmaceutical Science, Lovely Professional University, Punjab, India. Schror, K., dan Meyer-Kirchrath, J., 2000, Cyclooxygenase-2 Inhibition and Side Effects of Non-Steroidal Anti-Inflammatory Drugs in The Gastrointestinal Tract, Curr. Med. Chem., 7, 1121-1129. Siswanto, A., dan Nurulita N.A., 2005. Daya Antiinflamasi Infus Daun Mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa Scheff. Boerl) pada Tikus Putih (Rattus

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

44

norvegicus) Jantan, Prossiding Seminar Nasional TOI XXVII, Batu, 177181. Sudoyo, A.W., 2007, Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam, Edisi 4 Jilid 2, Pusat Penerbitan Ilmu Penyakit Dalam FKUI, Jakarta, 1107. Suleyman, H., Demircan, B., Karagoz, Y., dan Ozta, N., 2004, Antiinflamattory Effect of Selective COX-2 Inhibitors, J. Pharmacol., 56(6), 775-780. Tanu, I., Syarif, A., Estuningtyas, A., Setiawati, A., Muchtar, H.A. dan Arif, A., 2002, Farmakologi dan Terapi, Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta, 216-217. Taur, D.J., dan Patil, R.Y., 2011, Evaluation of Antiasthmatic Activity of Clitoria ternatea L. roots, Thesis, Department of Pharmacognosy, S.V.P.M’s College of Pharmacy, Malegaon, India.

Tjay, T.H., dan Kirana, R., 2002, Obat-Obat Penting: Khasiat Penggunaan dan Efek-Efek Sampingnya, Edisi 5, PT Elexmedia Komputindo Kelompok Gramedia, Jakarta, 313. Turner, R.A., 1965, Screening Method in Pharmacology, Volume I, Academic Press, New York, 100-107, 160. Utami, P., 2008, Buku Pintar Tanaman Obat, PT Agromedia Pustaka, Jakarta, 139. Vogel H.G., 2002, Drug Discovery & Evaluation : Pharmacological Assays, 2nd edition, Springer, New York, 669-691, 725, 751-761. Wang, L., dan Stoner, G.D., 2008, Anthocyanins and Their Role in Cancer Prevention, Cancer Lett., 269, 281-290. Yordi, E.G., Perez, E.M., Matos, M.J., dan Villares, E.U., 2012, Antioxidant and Pro-oxidant of Polyphenolic Compounds and Structure-Activity Relationship Evidence, Nutrition Well-Being Health, University of Santiago, Spanyol, 23-48.

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

45

LAMPIRAN

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

Lampiran 1. Surat determinasi tanaman telang (Clitoria ternatea L.)

46

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

Lampiran 2. Surat kalibrasi jangka sorong

47

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

48

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

Lampiran 3. Surat Ethical Clearance (EC)

49

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

Lampiran 4. Bunga telang dan infusa bunga telang (Clitoria ternatea L.)

Gambar 7. Simplisia bunga telang (Clitoria ternatea L.)

Gambar 8. Sediaan infusa bunga telang (Clitoria ternatea L.)

50

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

Lampiran 5. Pembuatan udema dan pengukuran udema kaki mencit

Gambar 9. Pembuatan udema kaki mencit dengan karagenin 1%

Gambar 10. Pengukuran udema kaki mencit menggunakan jangka sorong

51

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

Lampiran 6. Alat spuit injeksi

Gambar 11. Syringe per oral dan subplantar

52

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

53

Lampiran 7. Perhitungan dosis a. Dosis aquadest Perhitungan dosis untuk aquadest yaitu: 0,5 ml/20 g BB mencit = 0,5 mg/20 g BB mencit = 25 g/kg BB mencit. b. Dosis karagenin Dosis karagenin ditetapkan berdasarkan penelitian Williamson et al (1996) yaitu dengan kadar 1% yang dilarutkan dalam NaCl fisiologis 0,9% yang disuntikkan secara subplantar pada telapak kaki mencit sebesar 0,05 ml sehingga diperoleh dosis 25 mg/kg BB. Dosis karagenin = c. Dosis kalium diklofenak

భబబౣ ౝ భబౣ ౢ

଴,଴ହ୶

଴,଴ଶ଴୩୥

= 25 mg/kg BB mencit

Dosis kalium diklofenak untuk manusia dengan berat badan 50 kg adalah 50 mg, maka dosis untuk manusia 70 kg adalah sebesar 70 mg. Konversi dari manusia 70 kg ke mencit 20 g sebesar 0,0026, sehingga dosis untuk mencit 20 g = 70 mg x 0,0026 = 0,182 mg/20 g BB mencit = 9,1 mg/kg BB mencit d. Dosis bunga telang Uji antiinflamasi ini dilakukan karena tidak ada literatur yang menyebutkan dosis terapi yang biasa digunakan di masyarakat, maka takaran yang dipakai dalam penelitian ini adalah 5 gram (± 14 kuntum bunga). Bunga ditimbang dan didapat hasil penimbangan 5,03 gram dan dilarutkan dalam 100

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

54

mL aquadest sehingga didapat konsentrasi 5,03 g/100 ml, maka dosis bunga telang pada manusia adalah: Dosis bunga telang =

௄௢௡௦௘௡௧௥௔௦௜௫௏௢௟௨௠ ௘ ஻௘௥௔௧஻௔ௗ௔௡

=

ఱ,బయ೒ ௫ଵ଴଴௠ భబబ೘ ೗

= 5040 mg/70 kg manusia

଻଴௞௚



= 0,072 g/kg

Jika dikonversikan dari manusia 70 kg ke mencit 20 g, maka dosis bunga telang untuk mencit 20 g adalah: 0,0026 x 5040 mg = 13,104 mg/20 g = 0,655 mg/g BB = 655 mg/kg BB mencit. Dalam penelitian ini, infusa bunga telang dibuat dalam tiga peringkat dosis yaitu 328; 655; 1310 mg/kg BB mencit.

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

55

Lampiran 8. Tabel selisih udema kaki mencit dengan perlakuan kontrol positif (kalium diklofenak 9,1 mg/Kg BB mencit) setelah injeksi karagenin 1%

t (me nit) 0’ 15’ 30’ 45’ 60’ 90’ 120’ 150’ 180’ 210’ 240’ 270’ 300’ 330’ 360’

Tebal kaki mencit (mm) pada rentang waktu (menit) setelah injeksi karagenin 1% (kaki kiri – kaki kanan) Mencit I 1,21 0,78 0,8 0,61 0,48 0,50 0,48 0,44 0,43 0,39 0,35 0,27 0,22 0,10 0,05

Mencit II 1,33 0,83 0,58 0,54 0,45 0,41 0,39 0,39 0,35 0,33 0,35 0,32 0,19 0,16 0,12

Mencit III 1,17 0,92 0,53 0,57 0,51 0,48 0,46 0,45 0,42 0,39 0,35 0,30 0,24 0,18 0,10

Mencit IV 1,42 0,84 0,59 0,57 0,50 0,47 0,42 0,41 0,38 0,36 0,31 0,27 0,18 0,14 0,11

Mencit V 1,73 1,32 0,99 0,94 0,64 0,48 0,43 0,31 0,33 0,31 0,25 0,28 0,23 0,20 0,18

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

56

Lampiran 9. Tabel selisih udema kaki mencit dengan perlakuan kontrol negatif (aquadest 25 g/Kg BB mencit) setelah injeksi karagenin 1% t (me nit) 0’ 15’ 30’ 45’ 60’ 90’ 120’ 150’ 180’ 210’ 240’ 270’ 300’ 330’ 360’

Tebal kaki mencit (mm) pada rentang waktu (menit) setelah injeksi karagenin 1% (kaki kiri – kaki kanan) Mencit I 0,85 0,80 0,84 0,83 0,74 0,73 0,71 0,71 0,72 0,70 0,72 0,76 0,76 0,76 0,74

Mencit II 0,97 0,92 0,77 0,75 0,75 0,79 0,84 0,85 0,84 0,84 0,84 0,84 0,84 0,84 0,83

Mencit III 0,88 0,83 0,70 0,69 0,68 0,67 0,67 0,69 0,70 0,68 0,72 0,71 0,71 0,70 0,70

Mencit IV 1,13 1,13 1,08 1,02 1,02 0,96 0,94 0,96 0,96 0,93 0,93 0,92 0,92 0,92 0,92

Mencit V 1,01 1,01 0,94 0,91 0,93 0,95 0,96 0,95 0,95 0,92 0,93 0,94 0,95 0,95 0,95

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

57

Lampiran 10. Tabel selisih udema kaki mencit dengan perlakuan infusa bunga telang dosis 328 mg/Kg BB mencit setelah injeksi karagenin 1% t (me nit) 0’ 15’ 30’ 45’ 60’ 90’ 120’ 150’ 180’ 210’ 240’ 270’ 300’ 330’ 360’

Tebal kaki mencit (mm) pada rentang waktu (menit) setelah injeksi karagenin 1% (kaki kiri – kaki kanan) Mencit I 1,20 1,07 0,98 0,77 0,64 0,59 0,56 0,56 0,56 0,54 0,50 0,47 0,54 0,59 0,65

Mencit II 1,27 1,19 1,01 0,86 0,72 0,63 0,60 0,57 0,50 0,47 0,43 0,45 0,47 0,48 0,52

Mencit III 1,41 0,92 0,83 0,73 0,68 0,59 0,45 0,41 0,38 0,35 0,33 0,36 0,38 0,43 0,51

Mencit IV 1,37 1,17 1,00 0,81 0,78 0,67 0,60 0,60 0,53 0,48 0,46 0,44 0,51 0,57 0,62

Mencit V 1,32 1,17 0,89 0,79 0,77 0,59 0,52 0,49 0,46 0,40 0,44 0,46 0,47 0,49 0,52

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

58

Lampiran 11. Tabel selisih udema kaki mencit dengan perlakuan infusa bunga telang dosis 655 mg/Kg BB mencit setelah injeksi karagenin 1% subplantar t (me nit) 0 15 30 45 60 90 120 150 180 210 240 270 300 330 360

Tebal kaki mencit (mm) pada rentang waktu (menit) setelah injeksi karagenin 1% (kaki kiri – kaki kanan) Mencit I 1,24 1,03 0,64 0,50 0,46 0,43 0,40 0,38 0,36 0,35 0,35 0,38 0,40 0,43 0,45

Mencit II 1,31 0,96 0,68 0,54 0,49 0,49 0,44 0,39 0,37 0,35 0,33 0,39 0,42 0,44 0,45

Mencit III 1,14 0,93 0,68 0,63 0,53 0,47 0,42 0,36 0,33 0,30 0,28 0,33 0,36 0,41 0,45

Mencit IV 1,44 0,87 0,82 0,74 0,57 0,53 0,44 0,39 0,37 0,36 0,34 0,36 0,41 0,45 0,49

Mencit V 1,43 1,00 0,72 0,57 0,49 0,44 0,40 0,36 0,33 0,31 0,29 0,32 0,35 0,40 0,44

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

59

Lampiran 12. Tabel selisih udema kaki mencit dengan perlakuan infusa bunga telang dosis 1310 mg/Kg BB mencit setelah injeksi karagenin 1% t (me nit) 0’ 15’ 30’ 45’ 60’ 90’ 120’ 150’ 180’ 210’ 240’ 270’ 300’ 330’ 360’

Tebal kaki mencit (mm) pada rentang waktu (menit) setelah injeksi karagenin 1% (kaki kiri – kaki kanan) Mencit I 1,32 0,99 0,86 0,67 0,62 0,56 0,47 0,43 0,49 0,58 0,60 0,62 0,65 0,63 0,44

Mencit II 1,44 0,75 0,69 0,58 0,46 0,40 0,32 0,43 0,59 0,71 0,72 0,74 0,75 0,75 0,66

Mencit III 1,35 0,94 0,81 0,59 0,56 0,50 0,42 0,48 0,61 0,62 0,64 0,68 0,70 0,67 0,72

Mencit IV 1,41 1,02 0,84 0,67 0,55 0,47 0,44 0,56 0,57 0,68 0,59 0,61 0,61 0,64 0,65

Mencit V 1,40 1,04 0,97 0,91 0,75 0,72 0,67 0,57 0,61 0,63 0,64 0,66 0,68 0,69 0,71

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

60

Lampiran 13. Tabel perhitungan AUC masing-masing kelompok perlakuan infusa bunga telang beserta kontrol

Kelompok Aquadest 25 mg/Kg BB mencit Kalium diklofenak 9,1 mg/Kg BB mencit Infusa telang dosis 328 mg/KgBB mencit Infusa telang dosis 655 mg/KgBB mencit Infusa telang dosis 1310 mg/KgBB mencit

di mana:

‫̅ݔ‬ ± ܵ‫ܧ‬

II

III

IV

V

271,28

298,8

253,2

346,88

340,65

302,16 ± 37,0

302,16 ± 16,6

148,88

137,85

150,15

141,75

139,43

143,61 ± 5,00

143,61 ± 2,24

219,15

223,65

228,23

257,93

225,75

230,94 ± 13,82

230,94 ± 6,18

163,35

168,9

171,23

176,93

158,70

167,82 ± 6,31

167,82 ± 2,82

222,75

217,43

213,38

227,63

207,38

217,71 ± 7,06

217,71 ± 3,16

େ୬ାେ୬ିଵ

AUCtotal = ቀ

‫̅ݔ‬ ± ܵ‫ܦ‬

I

ଶ

ቁx tn- tn-1

Cn = selisih udema kaki pada waktu n Cn-1 = selisih udema kaki pada waktu n-1 tn – tn-1 = selisih waktu

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

61

Lampiran 14. Tabel perhitungan persen (%) penghambatan inflamasi infusa bunga telang beserta kontrol positif (kalium diklofenak 9,1 mg/Kg BB mencit) Kelompok Infusa bunga telang dosis 328 mg/KgBB mencit

Infusa bunga telang dosis 655 mg/KgBB mencit

Infusa bunga telang dosis 1310 mg/KgBB mencit

Aquadest 25 g/Kg BB mencit

Kalium Diklofenak 9,1 mg/Kg BB mencit

AUC rata-rata (mm.menit)

302,16

143,61

230,94

167,82

217,71

% penghambatan inflamasi

-

52,47 %

23,57 %

44,5 %

27,95 %

Keterangan: % penghambatan inflamasi = AUC rata − rata kontrol negatif − AUC kelompok perlakuan x 100% AUC rata − rata kontrol negatif Contoh cara perhitungan % penghambatan inflamasi: Kelompok kontrol positif (Kalium diklofenak): ଷ଴ଶ,ଵ଺ିଵସଷ,଺ଵ % penghambatan inflamasi = x 100% = 52,47 % ଷ଴ଶ,ଵ଺

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

Lampiran 15. Hasil analisis uji Kruskal-Wallis

Ranks perlakuan udema

N

aquadest

5

22.80

kalium diklofenak

5

3.00

infusa telang dosis 1

5

17.40

infusa telang dosis 2

5

8.00

infusa telang dosis 3

5

13.80

Total

25

Test Statisticsa,b udema Chi-Square df Asymp. Sig.

Mean Rank

22.250 4 .000

a. Kruskal Wallis Test b. Grouping Variable: perlakuan

62

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

63

Lampiran 16. Hasil analisis uji Mann-Whitney AUC antara kelompok aquadest 25 mg/Kg BB mencit dan kalium diklofenak 9,1 mg/Kg BB mencit

Ranks perlakuan

N

udema Aquadest kalium diklofenak Total

Mean Rank Sum of Ranks 5

8.00

40.00

5

3.00

15.00

10

Test Statisticsb udema Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009 Exact Sig. [2*(1-tailed .008a Sig.)] a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: perlakuan

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

64

Lampiran 17. Hasil analisis uji Mann-Whitney AUC antara kelompok aquadest 25 mg/Kg BB mencit dan infusa bunga telang dosis 328 mg/Kg BB mencit

Ranks perlakuan udema

N

Mean Rank Sum of Ranks

Aquadest

5

7.80

39.00

infusa telang dosis 1

5

3.20

16.00

Total

10

Test Statisticsb udema Mann-Whitney U 1.000 Wilcoxon W 16.000 Z -2.402 Asymp. Sig. (2-tailed) .016 Exact Sig. [2*(1-tailed .016a Sig.)] a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: perlakuan

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

Lampiran 18. Hasil analisis uji Mann-Whitney AUC antara kelompok aquadest 25 mg/Kg BB mencit dan infusa bunga telang dosis 655 mg/Kg BB mencit

Ranks perlakuan

N

udema aquadest infusa telang dosis 2 Total

Mean Rank Sum of Ranks 5

8.00

40.00

5

3.00

15.00

10

Test Statisticsb udema Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009 Exact Sig. [2*(1-tailed .008a Sig.)] a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: perlakuan

65

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

66

Lampiran 19. Hasil analisis uji Mann-Whitney AUC antara kelompok aquadest 25 mg/Kg BB mencit dan infusa bunga telang dosis 1310 mg/Kg BB mencit

Ranks perlakuan udema

N

Mean Rank Sum of Ranks

aquadest

5

8.00

40.00

infusa telang dosis 3

5

3.00

15.00

Total

10

Test Statisticsb udema Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009 Exact Sig. [2*(1-tailed .008a Sig.)] a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: perlakuan

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

67

Lampiran 20. Hasil analisis uji Mann-Whitney AUC antara kelompok kalium diklofenak 9,1 mg/Kg BB mencit dan infusa bunga telang dosis 328 mg/Kg BB mencit

Ranks perlakuan udema

N

Mean Rank Sum of Ranks

kalium diklofenak

5

3.00

15.00

infusa telang dosis 1

5

8.00

40.00

Total

10

Test Statisticsb Udema Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009 Exact Sig. [2*(1-tailed .008a Sig.)] a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: perlakuan

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

68

Lampiran 21. Hasil analisis uji Mann-Whitney AUC antara kelompok kalium diklofenak 9,1 mg/Kg BB mencit dan infusa bunga telang dosis 655 mg/Kg BB mencit

Ranks perlakuan udema

N

Mean Rank Sum of Ranks

kalium diklofenak

5

3.00

15.00

infusa telang dosis 2

5

8.00

40.00

Total

10

Test Statisticsb udema Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009 Exact Sig. [2*(1-tailed .008a Sig.)] a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: perlakuan

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

69

Lampiran 22. Hasil analisis uji Mann-Whitney AUC antara kelompok kalium diklofenak 9,1 mg/Kg BB mencit dan infusa bunga telang dosis 1310 mg/Kg BB mencit

Ranks perlakuan udema

N

Mean Rank Sum of Ranks

kalium diklofenak

5

3.00

15.00

infusa telang dosis 3

5

8.00

40.00

Total

10

Test Statisticsb udema Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009 Exact Sig. [2*(1-tailed .008a Sig.)] a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: perlakuan

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

70

Lampiran 23. Hasil analisis uji Mann-Whitney AUC antara kelompok infusa bunga telang dosis 328 mg/Kg BB mencit dan infusa bunga telang dosis 655 mg/Kg BB mencit

Ranks perlakuan udema

N

infusa telang dosis 1 infusa telang dosis 2 Total

5

8.00

40.00

5

3.00

15.00

10

Test Statisticsb udema Mann-Whitney U Wilcoxon W Z Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Not corrected for ties.

Mean Rank Sum of Ranks

.000 15.000 -2.611 .009 .008a

b. Grouping Variable: perlakuan

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

71

Lampiran 24. Hasil analisis uji Mann-Whitney AUC antara kelompok infusa bunga telang dosis 328 mg/Kg BB mencit dan infusa bunga telang dosis 1310 mg/Kg BB mencit

Ranks perlakuan udema

N

infusa telang dosis 1 infusa telang dosis 3 Total

Mean Rank Sum of Ranks 5

7.20

36.00

5

3.80

19.00

10

Test Statisticsb udema Mann-Whitney U 4.000 Wilcoxon W 19.000 Z -1.776 Asymp. Sig. (2-tailed) .076 Exact Sig. [2*(1-tailed .095a Sig.)] a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: perlakuan

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

72

Lampiran 25. Hasil analisis uji Mann-Whitney AUC antara kelompok infusa bunga telang dosis 655 mg/Kg BB mencit dan infusa bunga telang dosis 1310 mg/Kg BB mencit

Ranks perlakuan udema

N

infusa telang dosis 2 infusa telang dosis 3 Total

Mean Rank Sum of Ranks 5

3.00

15.00

5

8.00

40.00

10

Test Statisticsb udema Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009 Exact Sig. [2*(1-tailed .008a Sig.)] a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: perlakuan

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

73

BIOGRAFI PENULIS

Penulis skripsi dengan judul: “Efek Antiinflamasi Infusa Bunga Telang (Clitoria ternatea L.) pada Udema Telapak Kaki Mencit Betina Terinduksi Karagenin dengan Pengukuran Jangka Sorong” memiliki nama lengkap Devi Yanthre Sari Manurung. Penulis lahir di Laguboti pada tanggal 17 September 1991, merupakan anak kedua dari tiga bersaudara pasangan Arbaik Manurung dan Dra. Rosemary Hutagaol, M.Si., Apt.. Penulis menempuh pendidikan formal dari tingkat TK hingga SMA di Balige, Kab. Toba Samosir, Sumatera Utara, yaitu TK Santa Maria Balige (1995-1997), kemudian melanjutkan pendidikan di SD Katolik San Fransisco Balige(1997-2003), SMP Budhi Dharma Balige (2003-2006) dan melanjutkan pendidikan di SMA Negeri 2 Balige (2006-2009) dan menempuh pendidikan sarjana di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma pada tahun 2009. Semasa di bangku kuliah, penulis cukup aktif dalam kepanitiaan, baik dalam fakultas maupun di luar fakultas. Penulis pernah menjadi anggota Unit Kegiatan Fakultas (UKF) Seni Tari (20092012) dan anggota Kesenian Kepanitian Inisiasi Fakultas Farmasi “TITRASI” (2011). Penulis juga pernah ikut berperan serta sebagai peserta dalam Gelora Sumpah Pemuda “Jogja Pawai, Jogja Bersih, Jogja Harum, Jogja Berjanji dan Music Roadshow” (2009).